擬南芥DREB1A基因轉化紫花苜蓿的研究.pdf

1、植物的生長經常受到干旱、高鹽和低溫脅迫的嚴重影響。因此，提高植物抗逆性的研究有著極為重要的現(xiàn)實意義。紫花苜蓿(Medicago sativa L.)為世界上重要的豆科牧草，也是優(yōu)良的水土保持植物。利用基因工程技術來提高苜?？购?、抗旱、耐鹽堿能力具有重要意義。本研究采用了農桿菌介導和花粉管通道兩種轉基因方法，將擬南芥DREB1A基因導入紫花苜蓿，為提高苜?？鼓嫘源蛳禄A。主要結果如下： 1.較系統(tǒng)地研究并優(yōu)化了紫花苜蓿組織培養(yǎng)再生

2、體系。本研究通過對不同紫花苜蓿品種(阿爾岡金、West blend和WL323)、不同外植體(下胚軸和子葉)、不同基本培養(yǎng)基(MS和SH)以及不同激素濃度組合等影響植株再生因子的篩選和優(yōu)化，確定了最理想試驗材料為阿爾岡金、最適外植體為下胚軸、最佳基本培養(yǎng)基為MS。在不同激素濃度配比中，2 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L 6-BA愈傷組織誘導率最高，2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA芽分化率最高，在1/2 MS+1.

3、0 mg/L IBA的生根培養(yǎng)基上獲得再生植株。 2.在已建立紫花苜蓿組培再生體系的基礎上，較系統(tǒng)地研究并優(yōu)化了根癌農桿菌介導的紫花苜蓿遺傳轉化體系。對影響基因轉化的一些因子進行了優(yōu)化，確定了外植體最佳預培養(yǎng)時間為7d、最佳共培養(yǎng)時間為3d、誘導愈傷組織時的慶大霉素選擇壓為20mg/L，生根過程選擇壓為10mg/L。獲得的轉化再生植株經PCR檢測，結果證明目的基因已整合到紫花苜?；蚪M中。 3.較系統(tǒng)地研究建立了紫花苜蓿花粉管通