ODC和AdoMetDC雙義腺病毒對肺癌增殖和侵襲抑制作用的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、多胺是機體中一種重要的陽離子脂肪族有機胺，在細胞增殖、分化中起重要的作用，細胞周期的維持也需要多胺的合成。鳥氨酸脫梭酶(ODC)和S-腺苷甲硫氨酸脫羧酶(AdoMetDC)是多胺生物合成的的關鍵酶。研究已證實，肺腫瘤中多胺水平明顯增高，鳥氨酸脫羧酶(ODC)和S-腺苷甲硫氨酸脫羧酶(AdoMetDC)的表達也明顯高于正常肺組織。我們在成功構(gòu)建并擴增出ODC和AdoMetDC雙反義RNA腺病毒載體的基礎之上。研究鳥氨酸脫羧酶和S-腺苷甲硫

2、氨酸脫羧酶雙反義腺病毒對肺癌增殖和侵襲抑制作用 目的:探討重組鳥氨酸脫羧酶和S-腺苷甲硫氨酸脫羧酶雙反義腺病毒載體(Ad-ODC-AdoMetDCas)介導的鳥氨酸脫羧酶(ODC)和S-腺苷甲硫氨酸脫羧酶(AdoMetDC)反義RNA對肺癌細胞多胺合成、增殖和侵襲的抑制作用。 方法： 1.構(gòu)建并擴增出ODC和SAMDC雙反義RNA腺病毒載體； 2.采用活細胞計數(shù)法實驗觀察Ad-ODC-AdOMetDCas

3、對肺癌A-549細胞生長增殖的影響； 3.采用Western印跡和高效液相色譜分別檢測腺病毒對肺癌A-549細胞中ODC和AdoMetDC蛋白表達以及胞內(nèi)多胺含量； 4.采用活細胞計數(shù)和流式細胞儀分別檢測腺病毒介導的鳥氨酸脫羧酶反義RNA和Ad-ODC-AdoMetDCas對A-549細胞增殖和細胞周期分布的影響： 5.應用Matrigel侵襲實驗分析腺病毒對肺癌細胞侵襲活性的改變。 結(jié)果： 1.

4、成功構(gòu)建并擴增出ODC和SAMDC雙反義RNA腺病毒載體2.當感染效率為50時，腺病毒對A-549細胞感染率約75％； 3.Ad-ODC-AdoMetDCas可明顯抑制A-549細胞ODC和AdoMetDC基因表達；A-549細胞感染Ad-ODC-AdoMetDCas后，胞內(nèi)多胺含量明顯降低； 4.感染Ad-ODC-AdoMetDCas的A-549細胞停滯在G1期； 5.Ad-ODC-AdoMetDCas可顯著降

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