簡(jiǎn)介：蘇州大學(xué)博士學(xué)位論文GP130及相關(guān)分子在多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞及樹突狀細(xì)胞生物學(xué)行為中的作用姓名王月丹申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)血液學(xué)指導(dǎo)教師張學(xué)光200251GPL30及相關(guān)分子在多發(fā)性量髓癌細(xì)胞及樹突狀細(xì)盥生袖學(xué)行為中的作用中文提要是人MM發(fā)生和發(fā)展中最主要的生物因子。／在本研究中。通過DNAMICROARRAY分析發(fā)現(xiàn)，II6依賴的MM細(xì)胞株XGS以及新鮮的骨髓瘤細(xì)胞不僅表達(dá)GPL30分子及其相關(guān)細(xì)胞因子如IL6等和相應(yīng)的受體，而且還高表達(dá)表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子EGF家族分子以及EGF受體分子。經(jīng)過RT。PCR和流式細(xì)胞術(shù)分析，分別證實(shí)了IL6、肝素結(jié)合表皮生長(zhǎng)因子樣生長(zhǎng)因子皿一EGF和EGFR在上述MM細(xì)胞株中的表達(dá)。通過細(xì)胞生物學(xué)的觀察，還發(fā)現(xiàn)HB，EGF的特，異性拮抗劑CRML97可以阻斷IL6誘導(dǎo)的XGS細(xì)胞的增殖。／而且即使撤除IL6后，LHBEGF仍可以支持IL6依賴的XGS細(xì)胞的生存，通過單克隆抗體中和IL6活性或阻斷GPL30的信號(hào)，則可以同時(shí)阻斷IL6和HBEGF誘導(dǎo)的XGS細(xì)胞的生存和增殖。由此表明HBEGF／ERBBL和IL6／GPL30自分泌環(huán)路的相互協(xié)同作用是MM細(xì)胞維持其自身增殖和生長(zhǎng)的重要環(huán)節(jié)。然而，在臨床治療MM過程中發(fā)現(xiàn)，在IL6濃度較高的情況下，單獨(dú)應(yīng)用抗IL6單抗不能產(chǎn)生理想的效果，這可能是由于此時(shí)單抗在體內(nèi)很難達(dá)到徹底中和IL6活性的濃度，如果聯(lián)合應(yīng)用抗IL6的中和型單抗和抗ERBBL分子、／的單抗則可以大大減少拮抗MM細(xì)胞增殖所需要的抗體濃度／因此，聯(lián)合應(yīng)用這兩種／中和型單克隆抗體在MM的生物治療中具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。樹突狀細(xì)胞DC是體內(nèi)一種重要的抗原遞里細(xì)胞APC，可以攝取、加工和處T理各種抗原物質(zhì)，并將抗原信息遞呈給T細(xì)胞，從而啟動(dòng)機(jī)體的免疫應(yīng)答。FMM細(xì)胞可以分泌大量的獨(dú)特型免疫球蛋I芻IDI曲，業(yè)已證實(shí)，IDIG是一種良好腫瘤特異性抗原且易獲得大量純化的IDIG，這為尋找腫瘤特異性抗原負(fù)載DC開拓了獨(dú)特的途徑。鑒此，以IDIG負(fù)載DC為基礎(chǔ)的MM腫瘤免疫治療引起人們極大關(guān)注，并進(jìn)行臨床嘗試DC治療，且取得令人振奮的療效。因此，以DC為基礎(chǔ)的免疫治療療法是MM治療的一種潛在有效治療手段。然而，DC在步周血的數(shù)量少且缺乏特異性的表面標(biāo)志難以分離純化。因此，如何在體外獲得大量功能性的DC是目前需要解決的一個(gè)重要課題。為探索體外誘導(dǎo)獲得功能性DC的新途徑，我們從DC表面的GPL30分子表達(dá)及其功能著手探討，率先發(fā)現(xiàn)DC表面表達(dá)功能性的GPL30分子，通過GPL30分子的激發(fā)型單克隆抗體BS121激發(fā)DC的GPL30分子，可以通過增強(qiáng)某些細(xì)胞因子如GMCSF和IL_4體外誘導(dǎo)DC增殖、分化和成熟的效應(yīng)。同時(shí)還證實(shí)，激發(fā)DC的GPL30分子兒

簡(jiǎn)介：博士學(xué)位論文學(xué)校代碼10023學(xué)號(hào)B2008380腫瘤標(biāo)志物中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)載脂蛋白NGAL與鈣調(diào)磷酸酶B同源蛋白2CHP2的生物學(xué)功能研究BIOLOGICALEFFECTSOFTUMORPROTEINMAKERSNEUTROPHILGELATINASEASSOCIATEDLIPOCALINNGALANDCALCINEURINBHOMOLOGOUSPROTEIN2CHP2所院姓名指導(dǎo)教師導(dǎo)師小組學(xué)科專業(yè)研究方向完成日期血液學(xué)研究所血液病醫(yī)院王立洪龐天翔教授熊冬生教授李慶華副教授病理學(xué)與病理生理學(xué)腫瘤生物學(xué)二零一一年五月第一章中文摘要英文摘要‘LL刖吾第一節(jié)第二節(jié)第三節(jié)第四節(jié)第五節(jié)第六節(jié)討論結(jié)論參考文獻(xiàn)洲IRFLTRILLIIIIIJLLJIⅢY1985921目錄中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)載脂蛋白NGAL在乳腺癌1MDAMB231細(xì)胞轉(zhuǎn)移生物學(xué)中的功能研究不同腫瘤細(xì)胞系NGAL基因的表達(dá)分析中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)載脂蛋白NGAL的干擾17NGAL干擾對(duì)乳腺癌MDAMB231細(xì)胞系遷移與侵襲功能的‘￡影響一V轉(zhuǎn)錄因子C／EBP對(duì)NGAL介導(dǎo)的MDAMB23L細(xì)胞的遷移OC與侵襲能力的調(diào)控～轉(zhuǎn)錄因子C／EBP對(duì)NGAL基因表達(dá)的調(diào)控的機(jī)制47鈉氫交換體INIIEL對(duì)MDAMB231細(xì)胞遷移與侵襲能力54的調(diào)控636768第二章絲裂原活化蛋白激酶信號(hào)通路調(diào)節(jié)NGAL蛋白介導(dǎo)的小分子73化合物RHL23在腫瘤細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)中文摘要73英文摘要74前言76日O吾，B第一節(jié)NGAL干擾對(duì)腫瘤細(xì)胞內(nèi)小分子化合物RHL23累積的影響79第二節(jié)P的3累8積ERKL／2信號(hào)通路調(diào)控NGAL介洲瘤細(xì)胞內(nèi)RHL2383第三節(jié)NHEI調(diào)節(jié)NGAL介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞內(nèi)RHL23累積87

簡(jiǎn)介：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文高甲醚聯(lián)合RNA干擾沉默VCAM1對(duì)膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞生物學(xué)行為的影響姓名王英濱申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)臨床醫(yī)學(xué)；外科學(xué)指導(dǎo)教師劉云會(huì)201205并在腫瘤的遷移和侵襲過程中起到重要作用，因此作為抑制膠質(zhì)瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的靶點(diǎn)得到廣泛關(guān)注。P13K／AKT信號(hào)通路在腫瘤的增殖、凋亡、血管發(fā)生以及細(xì)胞運(yùn)動(dòng)中發(fā)揮著重要作用，研究證明P13K／AKT信號(hào)通路與調(diào)節(jié)MMP蛋白的表達(dá)。ARTEMETHER是否通過P13K／AKT信號(hào)通路抑制MMP2和MMP9達(dá)到抑制膠質(zhì)瘤的效果，目前尚未見報(bào)道。本論文首先研究ARTEMETHER對(duì)人腦膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞的作用效果與機(jī)制，在此基礎(chǔ)上，應(yīng)用RNA干擾技術(shù)沉默VCAML的表達(dá)，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染U87細(xì)胞，研究ARTEMETHER聯(lián)合RNA干擾沉默VCAML對(duì)U87細(xì)胞遷移、侵襲、凋亡的作用效果和相關(guān)機(jī)制，旨在為人腦膠質(zhì)瘤的治療提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。實(shí)驗(yàn)材料和方法一、實(shí)驗(yàn)材料一實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株人膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞株購(gòu)自于南京凱基生物科技有限公司。二主要試劑蒿甲醚云南昆明制藥廠，MTR，DMSO美國(guó)SIGMA公司，DMEM／F．12培養(yǎng)基美國(guó)HYCLONE公司，胎牛血清天津?yàn)笊锟萍加邢薰?，ANNEXINV／PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒南京凱基生物科技有限公司，羊抗AKTL／2多克隆抗體，兔抗P．AKT1／2／3SER473多克隆抗體，兔抗MMP2多克隆抗體，羊抗MMP9多克隆抗體，兔抗VCAML多克隆抗體，小鼠抗B．AETIN單克隆抗體，增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法試劑盒美國(guó)SANTACRUZ公司，兔抗山羊HRP標(biāo)記的IGG二抗，山羊抗兔HRP標(biāo)記的IGG二抗，山羊抗小鼠HRP標(biāo)記的IGO二抗北京中山生物技術(shù)公司。三主要儀器細(xì)胞培養(yǎng)箱美國(guó)FORMASCIENTIFIC公司；超凈工作臺(tái)蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司；倒置顯微鏡日本TMS公司；紫外．可見光分光光度計(jì)R本島津公司；BDFACSCALIBUR流式細(xì)胞儀美國(guó)BECTONDICKINSON公司；超聲粉碎機(jī)德國(guó)DR．HIELSCHER公司；臺(tái)式低溫超速離心機(jī)德國(guó)SIGMA公司；聚丙烯酰胺凝膠電泳2

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多人Foxp3基因修飾的NKL-NK-92細(xì)胞系生物學(xué)特性研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文胎鼠腦神經(jīng)干細(xì)胞鑒定純化與生物學(xué)特性觀察姓名高國(guó)一申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)外科學(xué)（神外）指導(dǎo)教師盧亦成200251WCTCFNBLOT檢測(cè)結(jié)果于240KDA和220KDA處可以清晰辨別兩條神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白NEUROEPITHIALSTEMCCLLPROTEIN，TIESTIN組化染色陽性條帶結(jié)論實(shí)驗(yàn)證明細(xì)胞膜中存在神經(jīng)干細(xì)胞特異性的NESTIN蛋白這一結(jié)果表明1在胎鼠腦神經(jīng)細(xì)胞膜蛋白樣品中，存在FLCTIN蛋白，根據(jù)目前對(duì)胚胎動(dòng)物腦內(nèi)存在神經(jīng)干細(xì)胞以及NCSTIN蛋白是神經(jīng)系統(tǒng)干細(xì)胞特異性表達(dá)的抗原產(chǎn)物的認(rèn)識(shí)，可以推斷，這些TICSTIN來自胎腦細(xì)胞中含有的神經(jīng)干細(xì)胞細(xì)胞膜中；2與單克隆抗體發(fā)生特異性反應(yīng)的蛋白表現(xiàn)為不同的分子量，這可能是在細(xì)胞膜NESTIN中，部分發(fā)生糖基化，從而改變了蛋白的表現(xiàn)分子量3NESTIN定位于神經(jīng)干細(xì)胞膜的發(fā)現(xiàn)，為神經(jīng)干細(xì)胞研究方法的拓展，包括利用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)膜表面蛋白陽性的神經(jīng)干細(xì)胞和利用磁性細(xì)胞分離技術(shù)分離膜表面蛋白陽性的神經(jīng)千細(xì)胞提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)；4NESTIN部分分布在細(xì)胞膜中，提示NETIN蛋白可能參與細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)，并且在維持干細(xì)胞特性方面具有獨(dú)特的作用2以漉式■忠技術(shù)檢測(cè)NESFIA陽性神經(jīng)干細(xì)胞目的標(biāo)記膜分布NESTIN抗原，以流式細(xì)胞檢測(cè)，胎鼠及成年大鼠腦內(nèi)不同腦區(qū)NOTIN陽性神經(jīng)干細(xì)胞比值方法采取胎鼠及成年大鼠大腦皮質(zhì)與皮質(zhì)下腦組織大腦皮質(zhì)及皮質(zhì)下組織吸管吹打，制成單細(xì)胞懸液1X106／M1，QPREP儀COULTCR公司直接處理溶解紅細(xì)胞，細(xì)胞懸液05毫升，加NESTIN單抗05PG，并設(shè)同型對(duì)照，冰浴45MIN，PBS洗滌，加羊抗小鼠IGPE，冰浴45MN，洗滌重懸于PBS中用流式細(xì)胞儀及其配套軟件進(jìn)行取教和分析結(jié)果胎鼠全大腦組織及大腦皮質(zhì)、皮質(zhì)下組織中均可檢出NESTIN陽性細(xì)胞，皮質(zhì)下組織中陽性細(xì)胞比值顯著高于全大腦組織中陽性細(xì)胞比值，P‘O05胎鼠皮質(zhì)組織與皮質(zhì)下組織、皮質(zhì)與全大腦組織相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差4

簡(jiǎn)介：目的和意義闡明腸上皮細(xì)胞模型CACO2細(xì)胞在侵襲性大腸桿菌（EIEC）感染后的生物學(xué)功能改變，包括單層細(xì)胞的完整性和通透性、緊密連接（TIGHTJUNCTION，TJ）蛋白、FACTIN的表達(dá)變化及乳酸菌對(duì)EIEC感染腸上皮細(xì)胞緊密連接蛋白生物學(xué)功能的調(diào)控機(jī)制研究闡明乳酸菌對(duì)EIEC對(duì)CACO2細(xì)胞相關(guān)基因和蛋白表達(dá)的調(diào)控。研究方法1、建立單層CACO2細(xì)胞感染模型；單層上皮細(xì)胞極性檢測(cè)（堿性磷酸酶染色）；采用免疫金標(biāo)記及電鏡觀察上皮細(xì)胞間緊密連接的位置和超微結(jié)構(gòu)。2、實(shí)驗(yàn)分組正常組、感染組、乳酸菌處理組、慶大霉素處理組。用MILLIPEERS電阻儀測(cè)定單層細(xì)胞跨膜電阻值TER的變化；用高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定甘露醇溶液的透過率間接反映單層細(xì)胞的通透性；采用細(xì)胞免疫組化、免疫熒光、WESTERNBLOT方法觀察緊密連接（TJ）相關(guān)蛋白CLAUDIN1蛋白，OCCLUDIN蛋白JAM1蛋白ZO1蛋白的分布和超微結(jié)構(gòu)變化；FITCPHALLOIDIN染色觀察細(xì)胞骨架FACTIN的表達(dá)變化；采用基因芯片分析各實(shí)驗(yàn)組間基因表達(dá)的差異；采用2D電泳分析各實(shí)驗(yàn)組間蛋白的差異表達(dá)，并進(jìn)行蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析。所有數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P005認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，采用SPSS130版統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果1、堿性磷酸酶染色后發(fā)現(xiàn)，腸道上皮樣細(xì)胞CACO2呈單層分布，具有明顯的極性。免疫膠體金及電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，緊密連接結(jié)構(gòu)位于相鄰上皮細(xì)胞間的頂端，間隙大小約25～38NM。2、EIEC感染CACO2細(xì)胞后，單層細(xì)胞的TER值和甘露醇的透過率隨時(shí)間延長(zhǎng)而升高；而經(jīng)乳酸菌處理后，TER值升高趨緩且甘露醇的透過率降低，處理組、感染組間與正常組比較，P005。3、EIEC感染后，相鄰CACO2細(xì)胞間TJ結(jié)構(gòu)遭到破壞，TJ相關(guān)蛋白（CLAUDIN1蛋白，OCCLUDIN蛋白JAM1蛋白ZO1蛋白）的表達(dá)亦減少；而乳酸菌處理后可以減輕EIEC引起的TJ結(jié)構(gòu)受損，相關(guān)蛋白表達(dá)增多。4、EIEC感染后，細(xì)胞骨架FACTIN遭到破壞，而乳酸菌處理后FACTIN的表達(dá)明顯增多。5、基因芯片分析各實(shí)驗(yàn)組間基因表達(dá)后發(fā)現(xiàn)與正常組相比，感染組基因表達(dá)有差異的共137組，其中94組下調(diào)，43組上調(diào)；乳酸菌處理組基因表達(dá)有差異的共91組，其中39組下調(diào)，52組上調(diào)；慶大霉素處理組基因表達(dá)有差異的共138組，其中38組下調(diào)，100組上調(diào)；單純?nèi)樗峋幚砗?，差異表達(dá)的基因有15組，其中9組下調(diào)，5組上調(diào)；進(jìn)行差異基因分析。6、經(jīng)2D電泳分析各實(shí)驗(yàn)組間蛋白表達(dá)后發(fā)現(xiàn)感染組與正常組相比，差異表達(dá)的蛋白有30個(gè)，其中11個(gè)表達(dá)減少，19個(gè)表達(dá)增多；乳酸菌處理組與正常組相比，差異表達(dá)的蛋白有25個(gè)，其中11個(gè)表達(dá)減少，14個(gè)表達(dá)增多；乳酸菌處理組與感染組相比，差異表達(dá)的蛋白有15個(gè)，其中5個(gè)表達(dá)減少，10個(gè)表達(dá)增多；采用MALDITOF進(jìn)行蛋白鑒定分析。結(jié)論EIEC感染后可引起腸道單層上皮的完整性、細(xì)胞間緊密連接結(jié)構(gòu)和細(xì)胞內(nèi)骨架的破壞，而乳酸菌黏附于腸上皮樣細(xì)胞CACO2后，可以抑制EIEC引起的單層細(xì)胞完整性破壞，改善緊密連接的結(jié)構(gòu)變化和相關(guān)蛋白的表達(dá)分布。應(yīng)用基因芯片和蛋白質(zhì)質(zhì)譜技術(shù)初步篩選了與乳酸菌抑制EIEC感染相關(guān)的差異表達(dá)基因和蛋白，為闡明其作用途徑提供新的線索。

簡(jiǎn)介：河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文小鼠淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞株L1210及其克隆細(xì)胞生物學(xué)特性比較研究姓名劉秋燕申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)免疫學(xué)指導(dǎo)教師呂占軍劉福英200131及L3E1L克隆細(xì)胞表面都有微嵴、微皺褶，但是微嵴、微皺褶疏密程度有所不同L2C9的微嵴和微皺褶較為粗大且有豐富的微絨毛；L3F9克隆細(xì)胞表面有大量的突起，突起的直徑05～13微米。13染色體數(shù)目腫瘤所L1210細(xì)胞的染色體數(shù)目從12條到78條不等，主流范圍在6263條，主流染色體所占比例為216％；7株克隆細(xì)胞L289、L2C9、L2H7、L3812、L3E11、L3F9及L2H8染色體數(shù)目依次為48、58、64、66、62、63及58軸14DNA含量測(cè)定流式細(xì)胞儀測(cè)定腫瘤所L1210細(xì)胞和7株克隆株L289、L2C9、L2H7、L2H8、L3812、L3E1L及L3F9的DNA含量，每個(gè)細(xì)胞株DNA含量依次為88、89、86、83、85、87、90及83PG。15免疫組化染色結(jié)果腫瘤所L1210細(xì)胞和4株克隆細(xì)胞對(duì)著十種抗體免疫組化染色，其中腫瘤所L1210細(xì)胞及4株克隆細(xì)胞與單抗FIK1呈100％細(xì)胞著色，而與單抗CYCLM100％反應(yīng)陰性；腫瘤所L1210細(xì)胞和克隆細(xì)胞L3E11與單抗GDNF呈陽性反應(yīng)，而克隆細(xì)胞L2C9、L2H7及L3F9反應(yīng)呈陰性；對(duì)于其它單抗，L1210細(xì)胞及4種不同克隆細(xì)胞反應(yīng)均呈陽性，但反應(yīng)陽性率有所不同。16SDSPAGE電泳結(jié)果對(duì)腫瘤所L1210細(xì)胞株和不同克隆株作SDSPAGE電泳分析，腫瘤所L1210細(xì)胞蛋白質(zhì)條帶數(shù)為24條帶，克隆細(xì)胞L3F9和L3E11均為21條帶，L3812和L2H8分別為22及19條帶。2L1210細(xì)胞及4株克隆細(xì)胞生物學(xué)特性研究21瘤細(xì)胞腹腔接種DBA／2小鼠的結(jié)果腫瘤所L1210細(xì)胞及4株克隆細(xì)胞腹腔接種DBA／2小鼠，均能使小鼠生長(zhǎng)腹水和致小鼠死亡，但接種后第7天的腹水性質(zhì)、腹水瘤細(xì)胞的濃度及致小鼠死亡時(shí)間有所不同。

簡(jiǎn)介：南方醫(yī)科大學(xué)2010級(jí)碩士學(xué)位論文人根尖乳頭千細(xì)胞與牙髓干細(xì)胞體外生物學(xué)特性的比較研究COMPARATIVEANALYSISOFINVITROBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFHUMANSTEMCELLSFROMAPICALPAPILLAANDDENTALPULPSTEMCELLS課題來源廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目200980603000062011861300060學(xué)位申請(qǐng)人黃義彬?qū)熜彰惪轮魅吾t(yī)師專業(yè)名稱口腔醫(yī)學(xué)碩士培養(yǎng)類型專業(yè)型培養(yǎng)層次碩士研究生所在學(xué)院南方醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)院2013年5月9日廣州摘要而最近發(fā)現(xiàn)的存在于年輕恒牙根尖乳頭中的新間質(zhì)干細(xì)胞群，在一定程度上能佐證上述病理現(xiàn)象。這些細(xì)胞被稱為根尖乳頭干細(xì)胞STEMCELLSFROMAPICALPAPILLA，SCHPT12】。在牙根開始發(fā)生時(shí)，頸環(huán)處內(nèi)釉和外釉上皮細(xì)胞向根尖方向增殖，牙乳頭間質(zhì)細(xì)胞分化成成牙本質(zhì)細(xì)胞，后者形成原發(fā)性牙本質(zhì)，將牙乳頭包圍起來并使其發(fā)育成為牙髓。在根尖乳頭和牙髓間有一個(gè)富含細(xì)胞的區(qū)域，而干細(xì)胞分別位于牙髓和根尖乳頭組織中，且各自特性也不同【L2。15J。三氧化礦物聚合物MINERALTRIOXIDEAGGREGATE，MTA是一種已被美國(guó)食品藥物管理局FOODANDDRUGADMINISTRATION，F(xiàn)DA認(rèn)可的新型生物材料，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于年輕恒牙血管再生術(shù)、直接蓋髓術(shù)、根尖誘導(dǎo)成形術(shù)和活髓切斷術(shù)等。MTA毒性低，具有抗菌性和良好的生物組織相容性，與細(xì)胞和／或組織接觸后能夠促進(jìn)組織的再生。而近年來研究發(fā)現(xiàn)，在以MTA為誘導(dǎo)劑的牙髓血管再生治療中，可觀察到根管壁明顯增厚、根尖延長(zhǎng)成形，更有意義的是部分病例牙齒活力測(cè)試有反應(yīng)，這在一定程度上表明了MTA可能在根尖繼續(xù)發(fā)育中起著一定的作用【LO’11】。然而，目前MTA促進(jìn)組織再生的機(jī)制尚未完全清楚，有待進(jìn)一步的研究以證實(shí)。目前SCAP生物學(xué)特性的研究正處于初始階段。因此，本實(shí)驗(yàn)的第一章的研究目的是比較年輕恒牙的DPSCS和SCAP兩者的干細(xì)胞表型特點(diǎn)、細(xì)胞活性、礦化潛能、組織再生能力、多向分化潛能等體外生物學(xué)特性。同時(shí)在上述實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，進(jìn)一步比較研究MTA對(duì)SCAP與DPSCS增殖、分化的影響，為臨床治療根尖病變的年輕恒牙提供新思路及理論指導(dǎo)，進(jìn)而為牙齒的繼續(xù)發(fā)育以及牙齒再生的研究提供一定的理論依據(jù)。第一章人根尖乳頭干細(xì)胞和牙髓干細(xì)胞的體外培養(yǎng)和鑒定方法完整拔除人牙根尚未發(fā)育完成的正畸牙或第三磨牙，分離根尖乳頭和牙髓組織，并用組織貼塊法進(jìn)行原代培養(yǎng)SCAP和DPSCS。倒置顯微鏡下觀察SCAP和DPSCS原代細(xì)胞和傳代細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。將兩者的第2代細(xì)胞接種于蓋玻片上，利用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)干細(xì)胞標(biāo)志物STROL的表達(dá)情II

簡(jiǎn)介：鄭碩士學(xué)位授予單位代碼Q壘5里學(xué)號(hào)或申請(qǐng)?zhí)朡2Q8壘壘密級(jí)金孟堂J論文論文題目AURORAA在食管鱗癌組織中的表達(dá)及其對(duì)細(xì)胞生物學(xué)性狀的影響作者姓名學(xué)科門類專業(yè)方向?qū)熜彰⒙毞Q鐘亞莉醫(yī)學(xué)消化道腫瘤楊觀瑞研究員2005年06月01日鄭卅L大學(xué)2005年碩士畢業(yè)論文AURORAA在食管鱗癌中的表達(dá)及其對(duì)細(xì)胞生物學(xué)性狀的影響體監(jiān)測(cè)點(diǎn)失控，細(xì)胞周期繼續(xù)進(jìn)行，最終導(dǎo)致基因組不穩(wěn)定和異倍體的產(chǎn)生，細(xì)胞向惡性方向轉(zhuǎn)化。細(xì)胞學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，在RATL細(xì)胞中過表達(dá)野生型AURORAA可以使裸鼠致瘤，提示AURORAA是一個(gè)癌基因。目前在乳腺癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、膀胱癌、卵巢癌、前列腺癌等多種腫瘤組織中檢測(cè)到AURORAAMRNA及蛋白水平增高。研究者已經(jīng)設(shè)計(jì)出針對(duì)AURORA激酶的小分子抑制劑，并且在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中顯示出一定的前景。然而，AURORAA在ESCC中表達(dá)情況和生物學(xué)意義尚未見報(bào)道；還不能很好地解釋AURORAA為何能引發(fā)腫瘤以及它在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中的作用。本實(shí)驗(yàn)的目的在于分析AURORAA在ESCC和癌周正常組織中的表達(dá)情況，并進(jìn)一步通過細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法研究AURORAA對(duì)ESCC細(xì)胞生物學(xué)性狀的影響，以探索其在ESCC發(fā)生發(fā)展中的作用和機(jī)制，為ESCC的分子病理診斷、臨床預(yù)后判斷和治療方案選擇帶來新的思路和理論基礎(chǔ)。材料與方法1收集20對(duì)ESCC組織和配對(duì)癌周正常組織標(biāo)本，提取組織總蛋白，WESTERNBLOT法檢測(cè)組織中AURORAA的蛋白表達(dá)水平；收集64例ESCC組織以及61例癌周正常組織，免疫組化方法檢測(cè)組織中AURORAA的表達(dá)和定位；其中64例ESCC標(biāo)本按分化程度分類，包括14例高分化腫瘤、41例中分化腫瘤、9例低分化腫瘤；按浸潤(rùn)程度分類包括41例原位癌和23例浸潤(rùn)性癌。2培養(yǎng)12株ESCC細(xì)胞系，提取細(xì)胞總蛋白，WESTERNBLOT檢測(cè)12株ESCC細(xì)胞系中AURORAA蛋白的表達(dá)水平。選取基礎(chǔ)表達(dá)水平較低的KYSE30細(xì)胞作為轉(zhuǎn)染對(duì)象，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染含AURORAACDNA全長(zhǎng)的重組質(zhì)粒，構(gòu)建AURORAA高表達(dá)細(xì)胞株，觀察AURORAA高表達(dá)對(duì)KYSE30細(xì)胞生長(zhǎng)速度、細(xì)胞黏附能力的影響。3細(xì)胞體外移動(dòng)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)12株ESCC細(xì)胞體外移動(dòng)能力，分析細(xì)胞移動(dòng)能力與AURORAA表達(dá)水平間的關(guān)系；以AURORAA高表達(dá)的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染株和親本細(xì)胞為對(duì)象以觀察AURORAA高表達(dá)對(duì)細(xì)胞體外移動(dòng)能力的影響；選擇AURORAA表達(dá)水平較高的EC9706和COLO680為對(duì)象，轉(zhuǎn)染AURORAASIRNA抑制AURORAA蛋白表達(dá)，檢測(cè)其對(duì)EC9706細(xì)胞體外移動(dòng)能力的影響。結(jié)果1WESTERNBLOT結(jié)果顯示在20例ESCC組織和及其癌周正常組織中，12例2

簡(jiǎn)介：鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文新型細(xì)胞因子CKLFSF8體外轉(zhuǎn)染對(duì)腫瘤細(xì)胞生物學(xué)功能的影響姓名黃玉敏申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)免疫學(xué)指導(dǎo)教師杜英20060520鄭州大學(xué)2∞6年碩士學(xué)位論文新型細(xì)胞因子CKI邱F8體外轉(zhuǎn)染對(duì)腫瘤細(xì)胞生物學(xué)功能的影響用RTPCR方法檢測(cè)AU峪F8基因在這兩種腫瘤細(xì)胞株中的表達(dá)，然后用帶有綠色熒光蛋白的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染兩種腫瘤細(xì)胞檢測(cè)脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染率；用脂質(zhì)體介導(dǎo)的方法將CKU、SF8基因轉(zhuǎn)染到腫瘤細(xì)胞造成細(xì)胞內(nèi)該基因的過表達(dá)，倒置顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)。分別取轉(zhuǎn)染前后的兩種細(xì)胞和培養(yǎng)上清進(jìn)行檢測(cè)。MRR法檢測(cè)細(xì)胞增殖，免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)腫瘤細(xì)胞中EGFR表達(dá)情況。另外，對(duì)BGC823細(xì)胞株轉(zhuǎn)染前后的上清，用密度梯度離心法提取EXOSOMES，WJSTEMBLOT和斑點(diǎn)免疫組化方法檢測(cè)EXOSOMES組分的變化。分離人外周血淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞，使用MILLICEN小室測(cè)定法檢測(cè)基因轉(zhuǎn)染前后腫瘤細(xì)胞趨化能力的變化。結(jié)果1脂質(zhì)體介導(dǎo)的兩種腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)染率分別為BGC823755％、K562655％。2轉(zhuǎn)染CKU峪F8基因?qū)GC823和K562的增殖均有抑制作用，與空白對(duì)照組和空質(zhì)粒組相比有顯著性差異PO05。A缸正SF8轉(zhuǎn)染前后BGC823和K562細(xì)胞EGFR陽性率對(duì)比有顯著性差異P005。3MHCI、MHCII、CD54和L氣MP1分子在轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞內(nèi)及EXOSOMES分子中表達(dá)沒有差別。4轉(zhuǎn)染后趨化指數(shù)大于3。結(jié)論1CKⅡSF8對(duì)腫瘤細(xì)胞EGFR有抑制作用，對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖也有抑制作用。提示該因子可能通過干擾EGFR而影響細(xì)胞增殖。2C娜F8的轉(zhuǎn)染對(duì)腫瘤細(xì)胞EXOSOMES中的MHC一1、MHCII、CD54和L蝴P1分子的表達(dá)沒有明顯的影響。3該因子轉(zhuǎn)染人胃腺癌細(xì)胞株BGC823能夠提高其EXOSOMES對(duì)淋巴細(xì)胞的趨化活性。4本實(shí)驗(yàn)對(duì)這種新型CC趨化因子超家族成員生物學(xué)功能以及它和腫瘤細(xì)胞之間關(guān)系研究的初步結(jié)果表明，該因子具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖和增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)淋巴細(xì)胞的趨化活性，為進(jìn)一步的腫瘤免疫治療提供理論和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞趨化因子；人趨化素樣因子超家族8；轉(zhuǎn)染I腫瘤細(xì)胞；腫瘤治療2

簡(jiǎn)介：本研究利用共聚焦顯微鏡觀察了未成熟樹突狀細(xì)胞對(duì)凋亡腫瘤細(xì)胞的攝取，采用流式細(xì)胞術(shù)和3HTDR摻入實(shí)驗(yàn)研究了CD40和TNFR信號(hào)對(duì)凋亡腫瘤細(xì)胞負(fù)載的樹突狀細(xì)胞表型的促成熟作用和促T細(xì)胞增殖效應(yīng)，采用胞內(nèi)染色、流式細(xì)胞術(shù)和ELISA探討了CD40配基化的腫瘤特異性樹突狀細(xì)胞對(duì)TH細(xì)胞的極化作用，結(jié)果表明，凋亡腫瘤細(xì)胞負(fù)載的樹突狀細(xì)胞在CD40信號(hào)的作用下能進(jìn)一步成熟，分化成為功能性的腫瘤特異性樹突狀細(xì)胞，其在體外能有效介導(dǎo)TH1效應(yīng)細(xì)胞的分化，并且此極化TH潛能和其表面B7H3分子的高表達(dá)相關(guān)。本研究結(jié)果還提示采用CD40信號(hào)激發(fā)的腫瘤特異性樹突狀細(xì)胞有望成為腫瘤免疫治療的新手段。

簡(jiǎn)介：中文摘要轉(zhuǎn)染IL17基因?qū)π∈笪赴┘?xì)胞生物學(xué)特性影響及其促腫瘤機(jī)制研究摘要目的IL17是一種主要由活化的人記憶CD4T細(xì)胞分泌的促炎細(xì)胞因子，在固有免疫和適應(yīng)性免疫中發(fā)揮作用，參與細(xì)胞的增殖分化、生物因子的轉(zhuǎn)錄與表達(dá)、機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)及腫瘤生長(zhǎng)。本研究采用IL17真核表達(dá)載體PCDNA31一兒，17轉(zhuǎn)染小鼠胃癌細(xì)胞株MFC，過表達(dá)IL17，觀察M，17過表達(dá)后對(duì)MFC細(xì)胞體外生長(zhǎng)及其它生物學(xué)性狀的影響，進(jìn)～步通過建立荷瘤小鼠動(dòng)物模型觀察IL17過表達(dá)后MFC細(xì)胞在小鼠體內(nèi)的成瘤效應(yīng)，并分析其分子改變，以期探討THL7／IL一17在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制。方法L將IL17真核表達(dá)載體PCDNA31一IL一17轉(zhuǎn)染小鼠胃癌細(xì)胞株MFC，同時(shí)將PCDNA31空載體轉(zhuǎn)染MFC細(xì)胞作為對(duì)照組細(xì)胞，經(jīng)G418篩選后獲得穩(wěn)定表達(dá)IL17的陽性細(xì)胞克隆ⅪC／Ⅲ一17。2倒置顯微鏡下觀察MFC、MFC／PCDNA31及MFC／IL一7細(xì)胞的形態(tài)變化，RTPCR檢測(cè)IL一17基因表達(dá)，ELISA法檢測(cè)細(xì)胞分泌IL17的能力。3MTT法測(cè)定轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞的體外增殖反應(yīng)并繪制生長(zhǎng)曲線。流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率的變化。4RTPCR法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞內(nèi)趨化因子CCR6、。CCL20CXCL2和免疫調(diào)節(jié)因子VEGF、MMP，9、IL6的表達(dá)變化。5分別以MFC、MFC／PCDNA31和MFC／IL一17細(xì)胞接種615小鼠，建立荷瘤小鼠動(dòng)物模型，觀察小鼠成瘤及皮下腫瘤生長(zhǎng)情況。6接種腫瘤細(xì)胞3周后處死小鼠，RTPCR法檢測(cè)腫瘤組織內(nèi)IL，17、VEGF和PODOPLANINMRNA表達(dá)。WESTERNBLOT法檢測(cè)腫瘤組織內(nèi)IL17、VEGF和PODOPLANIN的蛋白表達(dá)。免疫組化法檢測(cè)腫瘤組織內(nèi)微血管的形成情況。結(jié)果

簡(jiǎn)介：本研究建立了高產(chǎn)細(xì)胞懸浮系是以莪術(shù)黃色、疏松愈傷組織細(xì)小顆粒為實(shí)驗(yàn)材料將其接種于不同種類培養(yǎng)基在不同碳源、氮源、激素種類及濃度、PH值、搖床轉(zhuǎn)速、接種量、繼代周期、光暗培養(yǎng)周期等不同條件下培養(yǎng)一定時(shí)期后離心收獲細(xì)胞利用水蒸汽法測(cè)揮發(fā)油含量苯酚硫酸法測(cè)多糖含量在揮發(fā)油的合成調(diào)控中進(jìn)行了乙酸銨、乙酸鉀、泛酸鈣等前體物質(zhì)及能量物質(zhì)ATPNA添加的調(diào)控研究確立了有利于莪術(shù)細(xì)胞生長(zhǎng)及多糖和揮發(fā)油合成的最佳培養(yǎng)條件結(jié)果表明在最佳培養(yǎng)條件下莪術(shù)細(xì)胞生長(zhǎng)量是未優(yōu)化培養(yǎng)對(duì)照組的182倍懸浮細(xì)胞中多糖和揮發(fā)油含量大大提高了分別可達(dá)4553％和262％其中多糖含量是飲片多糖含量的137倍揮發(fā)油含量是未優(yōu)化培養(yǎng)對(duì)照組的171倍這方面的研究未見報(bào)道本研究為工業(yè)化生產(chǎn)提供有意義的理論依據(jù)在莪術(shù)多糖的生物學(xué)活性研究中采用熱水浸提法從莪術(shù)飲片粉末浸提得粗多糖經(jīng)醇析、濃縮、DEAE52纖維素柱層析經(jīng)蒸餾水、NACL溶液梯度洗脫純化后利用瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行純度檢測(cè)得水洗脫組分用該組分進(jìn)行動(dòng)物活體內(nèi)抗腫瘤、免疫及體內(nèi)外抗氧化研究實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明莪術(shù)飲片多糖含量為3312％莪術(shù)多糖具有體內(nèi)抗H腹水癌的實(shí)體瘤作用劑量為500MGKG1DAY1的抑瘤率高達(dá)5487％并能提高小鼠的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、脾指數(shù)及血液中SOD酶活力體外具有抗羥自由基氧化的能力多糖濃度為100MGML時(shí)對(duì)羥自由基的清除率達(dá)3656％莪術(shù)多糖可能是通過提高小鼠的免疫力及抗氧化能力的途徑來抑制H腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)利用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)確立了從莪術(shù)飲片中同時(shí)提取多糖及揮發(fā)油的最佳工藝結(jié)果表明粉碎程度為200目、水浸提4H、120的浸提比的條件下可以同時(shí)獲得莪術(shù)多糖和揮發(fā)油的最大提取量分別為248％和221％

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多臍血源間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性及其向神經(jīng)樣細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：HMGB1表達(dá)下調(diào)表達(dá)下調(diào)對(duì)胃癌細(xì)胞生物學(xué)功對(duì)胃癌細(xì)胞生物學(xué)功能的影響及能的影響及初步初步分子分子機(jī)制探討機(jī)制探討李人立培養(yǎng)類別全日制學(xué)位類型學(xué)術(shù)學(xué)位一級(jí)學(xué)科專業(yè)類臨床醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科專業(yè)外科學(xué)（普外）研究方向胃癌機(jī)制研究指導(dǎo)教師包國(guó)強(qiáng)副教授（副主任醫(yī)師）培養(yǎng)單位唐都醫(yī)院普外科二O一五年五月分類號(hào)Q28UDC601密級(jí)公開第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄縮略語表1中文摘要3英文摘要5前言8文獻(xiàn)回顧9正文19實(shí)驗(yàn)一HMGB1表達(dá)下調(diào)胃癌細(xì)胞系的建立及鑒定191材料1911細(xì)胞系與質(zhì)粒1912主要試劑和儀器192方法2121HMGB1基因RNAI慢病毒載體的構(gòu)建2122慢病毒小量包裝及其滴度測(cè)定2323胃癌細(xì)胞慢病毒感染2424RTPCR內(nèi)源篩選有效靶點(diǎn)2625WESTERNBLOT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HMGB1蛋白表達(dá)273結(jié)果2731慢病毒干擾載體GV155HMGB1陽性克隆PCR鑒定2732慢病毒干擾載體GV155HMGB1的DNA測(cè)序結(jié)果2833慢病毒包裝與病毒滴度測(cè)定2834RTPCR內(nèi)源篩靶結(jié)果2935WESTERNBLOT驗(yàn)證結(jié)果304討論30實(shí)驗(yàn)二HMGB1表達(dá)下調(diào)對(duì)胃癌細(xì)胞生物學(xué)功能的影響321材料32