皮質(zhì)酮影響突觸可塑性機(jī)制及白藜蘆醇對(duì)其影響的作用研究.pdf

1、應(yīng)激(stress)是指機(jī)體對(duì)外界環(huán)境或機(jī)體內(nèi)部的任何有害因子的刺激所做出的非特異性應(yīng)答的全身反應(yīng)。機(jī)體在應(yīng)激后會(huì)呈現(xiàn)出頭痛、焦慮、注意力分散、失眠、免疫力降低、記憶能力減退和認(rèn)知功能障礙等癥狀。因此，積極研究應(yīng)激產(chǎn)生的相關(guān)原因和發(fā)病機(jī)制，篩選出具有一定預(yù)防和治療作用的抗應(yīng)激藥物，不僅對(duì)人類(lèi)的身心健康具有重要的意義，而且還具有深遠(yuǎn)的醫(yī)學(xué)和社會(huì)意義。
　　在應(yīng)激的狀態(tài)下，血液中皮質(zhì)酮(corticosterone，cort)的含量會(huì)

2、增加，而皮質(zhì)酮可透過(guò)血腦屏障進(jìn)而影響海馬的突觸信息傳遞的功能，導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶的損傷。作為機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)的一個(gè)主要指標(biāo)，皮質(zhì)酮（醇）不僅可以有效調(diào)節(jié)海馬的學(xué)習(xí)記憶能力，而且還與海馬突觸可塑性緊密相關(guān)，尤其是CA1區(qū)的長(zhǎng)時(shí)程抑制(long-termdrepression，LTD)和長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)(long-term potentiation，LTP)。
　　白藜蘆醇(resveratrol，Res)可通過(guò)減少大腦細(xì)胞氧化應(yīng)激的水平、減少因

3、腦缺血導(dǎo)致自由基的破壞、減少情緒抑郁的發(fā)生和延緩老年癡呆的發(fā)生從而發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。白藜蘆醇所具有的神經(jīng)保護(hù)作用不僅能夠恢復(fù)血液中皮質(zhì)酮的水平，還能夠改善皮質(zhì)酮所致的學(xué)習(xí)記憶的損傷。
　　目的:
　　本研究選用皮質(zhì)酮(cort)模擬動(dòng)物體內(nèi)應(yīng)激狀態(tài)建立體內(nèi)模型，探討皮質(zhì)酮對(duì)小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性的影響及其作用機(jī)制和白藜蘆醇對(duì)此種影響的調(diào)節(jié)作用。
　　方法:
　　1.不同刺激頻率對(duì)小鼠海馬PP-DG通路突

4、觸可塑性的影響:采用電生理基礎(chǔ)傳遞、長(zhǎng)時(shí)程抑制(LTD)和長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)(LTP)方法，考察不同刺激頻率對(duì)小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性的影響。
　　2.皮質(zhì)酮對(duì)小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性的影響:應(yīng)用皮質(zhì)酮模擬動(dòng)物體內(nèi)的應(yīng)激狀態(tài)，采用電生理基礎(chǔ)傳遞、長(zhǎng)時(shí)程抑制(LTD)、長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)(LTP)和雙脈沖易化(paired pulse facilitation，PPF)的方法，考察皮質(zhì)酮對(duì)小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性的影響。

5、r>　　3.皮質(zhì)酮對(duì)小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性影響的機(jī)制研究:應(yīng)用N-甲基-D門(mén)冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid，NMDA)受體拮抗劑與NMDA受體激動(dòng)劑來(lái)探討其作用機(jī)制，通過(guò)電生理長(zhǎng)時(shí)程抑制(LTD)和長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)(LTP)方法，考察皮質(zhì)酮對(duì)小鼠海馬PP-DG通路NMDA受體的作用。
　　4.白藜蘆醇對(duì)皮質(zhì)酮致小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性改變的調(diào)節(jié)作用:應(yīng)用白藜蘆醇，采用電生理長(zhǎng)時(shí)程抑制(LTD)

6、和長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)(LTP)方法，考察白藜蘆醇對(duì)皮質(zhì)酮致小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性改變的調(diào)節(jié)作用。
　　結(jié)果:
　　1.不同頻率的刺激對(duì)小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性具有不同的影響
　　在給予1Hz900次的刺激后，產(chǎn)生了LTD的現(xiàn)象，且有顯著性差異(P＜0.01);在給予100Hz100串的刺激后，產(chǎn)生了LTP的現(xiàn)象，但未見(jiàn)顯著性差異（P＞0.05）;在給予400Hz100串的刺激后，產(chǎn)生了LTP的現(xiàn)象，且有顯著性

7、差異(P＜0.01)。
　　2.皮質(zhì)酮對(duì)小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性具有損傷作用
　　皮質(zhì)酮對(duì)小鼠海馬PP-DG通路基礎(chǔ)傳遞無(wú)明顯影響，且未見(jiàn)顯著性差異(P＞0.05);皮質(zhì)酮對(duì)小鼠海馬PP-DG通路PPF無(wú)明顯影響，且未見(jiàn)顯著性差異（P＞0.05）;皮質(zhì)酮對(duì)小鼠海馬PP-DG通路LTD具有明顯影響，且有顯著性差異(P＜0.01);皮質(zhì)酮對(duì)小鼠海馬PP-DG通路LTP具有明顯影響，且有顯著性差異（P＜0.01）;

8、　　3.皮質(zhì)酮對(duì)小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性的損傷作用與NMDA受體有關(guān)
　　NMDA受體拮抗劑（PEAQX、TCN-201、Ifen和Ro25-6981）對(duì)小鼠海馬PP-DG通路LTD具有明顯影響，且有顯著性差異（P＜0.01）;NMDA受體拮抗劑(D-AP5)對(duì)小鼠海馬PP-DG通路LTD無(wú)明顯影響，且未見(jiàn)顯著性差異（P＞0.05）;NMDA受體拮抗劑(D-AP5、PEAQX、TCN-201和Ro25-6981)對(duì)小鼠海馬

9、PP-DG通路LTP具有明顯影響，且有顯著性差異（P＜0.01）;NMDA受體拮抗劑(Ifen)對(duì)小鼠海馬PP-DG通路LTP無(wú)明顯影響，且未見(jiàn)顯著性差異（P＞0.05）;NMDA受體激動(dòng)劑(D-Serine)能夠改善皮質(zhì)酮致小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性的損傷，且有顯著性差異(P＜0.01)。
　　4.白藜蘆醇能夠改善皮質(zhì)酮過(guò)程中小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性的損傷作用
　　單次灌胃白藜蘆醇未能改善皮質(zhì)酮致小鼠海馬PP

10、-DG通路LTP損傷，且未見(jiàn)顯著性差異(P＞0.05);單次腹腔注射白藜蘆醇未能改善皮質(zhì)酮致小鼠海馬PP-DG通路LTP損傷，且未見(jiàn)顯著性差異(P＞0.05);連續(xù)7天灌胃白藜蘆醇能夠改善皮質(zhì)酮致小鼠海馬PP-DG通路LTP損傷，且有顯著性差異（P＜0.01）;單次側(cè)腦室注射白藜蘆醇能夠改善皮質(zhì)酮致小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性的損傷，且有顯著性差異(P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　1.不同頻率的刺激對(duì)小鼠海馬PP-DG