不同濃度異氟醚麻醉對發(fā)育期大鼠海馬P-GSK-3β-β-catenin表達及神經干細胞增殖的影響.pdf

1、研究背景:
　　吸入麻醉藥具有一定的鎮(zhèn)痛作用，并因其可控性好、血流動力學穩(wěn)定等優(yōu)點在兒科手術中得到廣泛應用。而目前所有的吸入麻醉藥物中異氟醚的應用最為廣泛。大量臨床回顧性研究表明，三歲之前的有過異氟醚暴露史的患兒在成年以后更容易發(fā)生學習障礙。神經生物學研究表明，空間學習和記憶過程的形成主要依靠出生后海馬齒狀回部位的正常神經細胞發(fā)生。近年來關于對嚙齒動物的研究顯示，異氟醚對處于發(fā)育期大腦的海馬具有一定的神經毒性作用。這些作用包括能夠

2、抑制神經干細胞的增殖，引起神經元退行性變以及與海馬相關的空間學習和記憶能力損害，但其機制尚不明確。
　　調節(jié)哺乳動物神經系統(tǒng)發(fā)育的重要通路即經典的Wnt信號通路，在維持神經元細胞的正常功能、調控神經干細胞的增殖并且協(xié)調細胞遷移等方面起到了重要作用。Wnt信號通路中的兩個關鍵因子包括磷酸化的糖原合成酶激酶(P-GSK-3β)和β-連環(huán)素(β-catenin)，其表達水平或者活性的變化均會影響Wnt目的基因的表達，進而影響神經干細胞的

3、正常功能。有研究表明P-GSK-3β表達水平的下降與靜脈麻醉藥氯胺酮引起的發(fā)育期神經毒性有關，而P-GSK-3β和β-catenin是否在異氟醚的發(fā)育期神經毒性中發(fā)揮作用尚無明確研究。
　　研究目的:
　　1、探討吸入不同濃度的異氟醚對發(fā)育期SD大鼠海馬細胞中的P-GSK-3β/β-catenin表達的影響。
　　2、探討吸入不同濃度的異氟醚對發(fā)育期SD大鼠海馬齒狀回神經干細胞增殖的影響。
　　研究方法:選取出生

4、后7天、體重15～20g的SD大鼠48只隨機分為4組(n=12):模擬麻醉組（C組）、0.5％異氟醚組（I0.5組）、1％異氟醚組（I1組）、1.5％異氟醚組(I1.5組)。C組吸入30％氧氣4h，I0.5、I1、I1.5組在與C組相同吸氧條件下分別吸入0.5％、1％、1.5％濃度的異氟醚4h。其中，從各實驗組隨機選取6只大鼠于麻醉開始前即刻腹腔注射5-溴脫氧尿苷(BrdU)200mg/kg，用以檢測海馬齒狀回神經干細胞的增殖情況。于麻

5、醉結束后6h處死實驗動物并分離海馬組織，采用免疫組織化學法檢測海馬齒狀回BrdU陽性細胞數(shù)的變化，采用Western blot法檢測海馬β-catenin、P-GSK-3β蛋白表達量的變化。
　　研究結果:
　　1、Western blotting檢測β-catenin、P-GSK-3β表達與C組相比，I0.5組大鼠海馬β-catenin、P-GSK-3β表達差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);I1組、I1.5組大鼠海馬β-c

6、atenin、P-GSK-3β表達下調，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　2、新生大鼠海馬齒狀回神經干細胞增殖情況 SD大鼠海馬的神經干細胞主要集中于齒狀回的門區(qū)和顆粒細胞下區(qū)，對這兩個區(qū)域的BrdU陽性細胞進行計數(shù)。與C組相比，I0.5組大鼠海馬齒狀回BrdU陽性細胞數(shù)的差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，I1組、I1.5組大鼠海馬齒狀回BrdU陽性細胞數(shù)減少，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　結論:我們通過