脾動脈結扎對肝部分切除術后大鼠肝再生的影響.pdf

1、目的:
　　肝癌是我國常見的惡性腫瘤之一。在治療肝臟惡性腫瘤時，外科醫(yī)生經常面臨著腫瘤根治性切除和保全殘肝功能的兩難境地。這種顧慮往往使外科醫(yī)生放棄了腫瘤的根治性切除。因此如何提高肝臟部分切除術后肝再生能力成為亟待解決的問題。有研究表明脾切除術促進了肝部分切除術后大鼠的肝再生。與脾切除相比較，脾動脈結扎也可以在一定程度上減少門靜脈的血流來源，降低門靜脈壓力，緩解肝大部切除后門脈高灌注狀態(tài)，而且手術操作簡單易行、切口相對較小，相對縮

2、短了手術時間，減少了術中出血，降低了手術風險，同時又保留了脾臟的免疫功能、清除功能等。但脾動脈結扎對肝再生的影響及機制仍不明確。本課題通過建立Sprague-Dawley大鼠70％肝切除模型，觀察脾動脈結扎對部分肝切除大鼠術后肝臟功能恢復及肝臟再生過程中肝細胞生長因子（hepatocyte growth factor, HGF）、轉化生長因子-α(transforming growth factoralpha, TGF-α)和轉化生長因

3、子-β1（transforming growth factor beta1，TGF-β1）表達的影響，探討脾動脈結扎對肝再生的影響。
　　材料與方法:
　　在實驗前期，通過進行預實驗建立穩(wěn)定的大鼠70％肝切除模型。在此基礎上，將72只健康雄性Sprague-Dawley大鼠（河南省實驗動物中心購買），鼠齡6-8周，體重220～250 g，隨機分為3組，假手術組（A組）:開腹后僅行肝左葉、肝中葉分離及距脾門1.5 cm分離脾動

4、靜脈;70％肝切除組（B組）:完整切除大鼠肝左葉及肝中葉;70％肝切除+脾動脈結扎組（C組）:完成肝左葉和肝中葉的切除后，距脾門1.5 cm，結扎脾動脈。每組再分為3個階段:術后24h、術后48 h、術后72 h，稱重，麻醉后開腹留取腹主動脈血及取肝臟標本。記錄麻醉前大鼠重量，測殘肝的濕重，計算大鼠肝體比;所取腹主動脈血，一部分送檢驗科測定肝功能生化指標ALT和AST水平，另一部分靜置后離心取血清，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme-l

5、inked immunosorbent diffusion assay, ELISA）檢測血清中HGF、TGF-α和TGF-β1的水平;所取肝臟組織多聚甲醛固定，采用免疫組織化學方法分別檢測肝組織中TGF-α和TGF-β1的表達。應用SPSS21.0軟件統(tǒng)計分析各組間各個指標的差異，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結果:
　　成功建立了SD大鼠70％肝切模型，在實驗過程中大鼠能正常存活。術后B組、C組肝體比隨時間變化

6、逐漸增加。與B組比較，C組術后24 h肝體比較小(P＜0.05)，術后48h肝體比差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，術后72h肝體比增大(P＜0.05)。與A組比較，B組、C組術后24、48和72 h血清ALT、AST水平均明顯增高(P＜0.05);B組、C組術后血清ALT、AST水平均隨時間的變化逐漸降低，C組術后24、48和72h血清ALT、AST水平均低于術后同時間B組(P＜0.05)。與A組比較，術后24、48和72 h血清TG

7、F-α水平和肝組織中TGF-α的表達水平在B組和C組均明顯升高(P＜0.05）。與B組比較，C組術后24 h血清中TGF-α水平和肝組織中TGF-α的表達水平均增高(P＜0.05），在術后48、72 h血清中TGF-α水平和肝組織中TGF-α的表達水平與C組差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05）。與A組比較，B組和C組大鼠在術后24、48和72 h肝組織中TGF-β1表達量明顯增加(P＜0.05);與B組比較，C組大鼠在術后24、48和72

8、h肝組織中TGF-β1表達量差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。B組大鼠術后24、48和72 h血清中TGF-β1水平均高于C組大鼠(P＜0.05)。B組和C組術后24、48和72 h血清中HGF水平差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　結論:
　　1.脾動脈結扎可以減輕70％肝切除大鼠術后肝組織損傷，提高殘肝質量增加的速度，促進肝臟功能的恢復;
　　2.結扎脾動脈可促進70％肝切除大鼠術后24 h TGF-α的表達，