胰腺癌中自噬相關蛋白Beclin1、LC3和P62的表達及臨床意義.pdf

1、背景與目的：
　　自噬（autophagy）是近年來研究熱點，指細胞通過各種途徑在自噬溶酶體內自我消化、分解受損傷的細胞器、蛋白質等，是一種亞細胞水平的“自我消化”[1]。基礎水平的自噬對于細胞生長發(fā)育、發(fā)揮其生物學功能是必要的，通過自噬細胞可以維持自我穩(wěn)態(tài)，可以更好的適應各種應激，達到自我更新等；且當細胞受到較大損傷不能通過自身調節(jié)恢復時，可以啟動自噬性死亡，因此又被稱為Ⅱ型程序性死亡[2]。在眾多的人類腫瘤中，均可以發(fā)現(xiàn)自噬水

2、平的變化。細胞自噬是一個復雜的過程，多條信號轉導途徑參與自噬水平的調節(jié)，并且細胞自噬可以在多種條件下被誘導，生長因子、細胞內氨基酸水平、葡萄糖水平、DNA損傷、氧自由基等均可誘導細胞自噬水平的變化[3]。Beclin1、LC3和P62是參與自噬過程的三個主要蛋白，Beclin1在自噬的啟動階段發(fā)揮了重要作用，Beclin1與 P13K(hVPS34)、Atg14形成三聚體，并不斷募集自噬相關蛋白，介導自噬起始[4]；在Atg4作用下，L

3、C3前體被加工成可溶性LC3-Ⅰ，后者在Atg7(E1樣酶)和Atg3(E2樣酶)作用下與磷脂酰乙醇胺(PE)連接成為脂溶性的LC3-Ⅱ-PE，參與自噬溶酶體膜的延伸，直到自噬溶酶體形成[5-6]；定位于細胞質中的P62與經泛素化的蛋白結合，P62蛋白再與 LC3-II蛋白結合形成復合物，并最終會在溶酶體內降解，在自噬的過程中，P62會不斷被消耗[6-7]，這三個蛋白是檢測自噬水平的關鍵指標。
　　胰腺癌是一種高度侵襲性的惡性腫瘤

4、，發(fā)病隱匿，大部分患者診斷時已屬晚期，5年生存率僅有1-4％，預后差[8-9]，深入研究胰腺癌的發(fā)病機制對提高胰腺癌的早期診斷及改善患者預后都非常重要，然而目前關于自噬相關蛋白在胰腺癌的表達及其相關性的研究卻相對較少。
　　目的：
　　通過檢測胰腺癌、癌旁正常組織中自噬相關蛋白Beclin1、LC3和P62的表達，探討在胰腺癌中自噬活性的改變及臨床意義。
　　方法：
　　收集鄭州大學第一附屬醫(yī)院2011年6月至2

5、013年6月經外科手術切除的胰腺癌組織標本64例，并收集對應癌旁正常組織標本64例作為對照，應用免疫組織化學法檢測64例胰腺癌組織及相應癌旁正常組織中自噬相關蛋白Beclin1、LC3和P62的表達情況；分析自噬蛋白表達水平與胰腺癌臨床病理特征的關系。采用SPSS17.0進行統(tǒng)計分析，不同病理特征間蛋白陽性率的比較采用χ2檢驗，不同蛋白水平的相關性采用Spearman相關分析，檢驗水準α=0.05，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

6、r>　　結果：
　　表達陽性率為44.4%(12/27)、III~IV期表達陽性率為16.2%(6/37)，LC3在TNM I~II期表達陽性率為48.1%(13/27)，III~IV期表達陽性率為24.3%(9/37)，各自差異均具有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)。
　　3. Spearman相關分析顯示，Beclin1與LC3在胰腺癌組織中的表達水平呈正相關(r=0.572，P<0.05)。P62蛋白的表達與Beclin1

7、、LC3蛋白的表達均無明顯相關相關(r值分別為0.04、0.11，P值均>0.05)。
　　結論：
　　1.自噬相關蛋白Beclin1、LC3在胰腺癌局部組織中表達下調，P62蛋白在胰腺癌局部組織中表達水平上調，提示胰腺癌局部自噬水平降低。
　　2. Beclin1、LC3蛋白的表達水平與胰腺癌分化程度、TNM分期相關，分化程度越低、TNM分期越晚，Beclin1、LC3的表達水平越低。P62蛋白表達水平僅與胰腺癌TN