西門木炔酸的分離純化、代謝與功能研究.pdf

1、西門木炔酸（ximenynic acid或santalbic acid）是一種天然的十八碳共軛烯炔酸，最早在檀香科的植物中發(fā)現，迄今已有七十多年。它主要存在于山柚子科、鐵青樹科和檀香科的種子油中，含量從1～95％不等。其特殊的烯炔共軛結構賦予它許多生物活性，如抗細菌、抗真菌、殺蚴蟲及抗炎等活性。本論文以澳洲檀木Santalum spicatum的檀香籽油（含西門木炔酸約35％）和檀香籽油提純產物西門木炔酸為研究對象，研究內容包括西門木炔

2、酸的提取純化、體內與體外代謝、抗癌活性試驗等三個部分。
　　第一部分 西門木炔酸自由脂肪酸和甘油三酯的分離純化
　　西門木炔酸的分離。以檀香籽油為原料，經水解、酸化、結晶等步驟提取西門木炔酸自由脂肪酸純品，摸索西門木炔酸最佳結晶條件。
　　檀香籽油甘油三酯的分離。Santalum spicatum檀香籽油主要含有三種甘油三酯，包括含三個西門木炔酸分子的XXX、含兩個西門木炔酸分子的XXO/XOX以及含一個西門木炔酸分子

3、的OOX/OXO。使用C18反相硅膠粉末填充的層析柱，通過乙腈/異丙醇洗脫液，可以將三種不同的甘油三酯分離。
　　構建HPLC快速分離和鑒定檀香籽油不同形式甘油三酯的方法。具體如下:使用反相硅膠HPLC和UV檢測器鑒定檀香籽油中不同形式的甘油三酯。HPLC洗脫液為乙腈/異丙醇，UV檢測器設定236nm的吸收波長，以2.5mL/min流速進行洗脫。
　　第二部分 檀香籽油或西門木炔酸對脂肪酸代謝的影響
　　體內脂肪酸代謝

4、研究。與橄欖油相比，飼喂檀香籽油后小鼠體重無顯著差異;檀香籽油使血糖顯著上升和并提高低密度脂蛋白水平;顯著降低大腦組織總n-3PUFA含量;顯著降低肝臟n-9單不飽和脂肪酸、顯著提高n-3多不飽和脂肪酸的含量。
　　體外脂肪酸代謝研究。西門木炔酸（從檀香籽油中提取分離獲得）干預HepG2細胞后發(fā)現，n-9單不飽和脂肪酸C18:1n-9、C20:1n-9和C24:1n-9與總n-9單不飽和脂肪酸顯著下降，這種作用可能與西門木炔酸能抑

5、制硬脂酰輔酶A去飽和酶[stearoyl-CoA desaturase(SCD)]基因的表達有關;西門木炔酸顯著降低C22:6n-3(DHA)的含量，并且抑制DHA合成關鍵酶FADS1（△5去飽和酶）和FADS2（△6去飽和酶）的表達。
　　第三部分 西門木炔酸的抗癌活性研究
　　基于西門木炔酸的抗炎活性的報道以及炎癥與癌癥的密切聯系，本實驗以西門木炔酸純品為研究對象，研究西門木炔酸對人癌細胞的細胞周期、增殖、凋亡的影響及潛

6、在機制。實驗結果如下:
　　西門木炔酸顯著阻滯HCT116和HepG2細胞周期G1-S的轉換。具體表現為:G0/G1期細胞數量增多，S期和G2/M期細胞數量顯著下降。同時西門木炔酸抑制HepG2細胞的細胞周期蛋白CCND3和CCNE1的基因表達，抑制GCN5L2的蛋白表達;還抑制CCND3和CCNE1和CDK6基因在HCT116中的表達。
　　通過細胞增殖實驗和細胞凋亡實驗發(fā)現西門木炔酸能顯著抑制HepG2細胞的增殖，并顯著