華蟾素聯(lián)合吉西他濱對人NSCLC細胞的作用研究.pdf

1、目的：本實驗將人非小細胞肺癌(NSCLC)細胞株HCC827進行傳代培養(yǎng)、CCK8藥敏試驗、利用流式細胞法測定其凋亡及細胞周期，檢測華蟾素聯(lián)合吉西他濱對HCC827細胞的抑制率及對其細胞周期的影響，探討華蟾素在人NSCLC個體化治療中的意義，期望為華蟾素作為治療人非小細胞肺癌的輔助藥物提供新的理論依據(jù)。
　　方法：實驗組先利用HCC827細胞株進行體外培養(yǎng)，然后利用CCK8藥敏試驗以及流式細胞法測定其細胞周期，從而檢測華蟾素聯(lián)合吉

2、西他濱對HCC827細胞的抑制率及對其細胞周期的影響。對照組利用人HCC827細胞株進行體外培養(yǎng)，然后利用CCK8藥敏試驗以及流式細胞法測定細胞周期，以此檢測吉西他濱對HCC827細胞的抑制率及對其細胞周期的影響。對照組利用HCC827細胞株進行體外培養(yǎng)，然后利用CCK8藥敏試驗以及流式細胞法測定細胞周期，以此檢測華蟾素對HCC827細胞的抑制率及對其細胞周期的影響。
　　結果：⑴單用吉西他濱對HCC827細胞的抑制率及細胞周期的

3、影響：吉西他濱處理24小時，在0.0025-0.04uM的濃度范圍內(nèi)可以造成10％左右的細胞生存率的降低，0.08-0.32uM濃度范圍內(nèi)可以造成約20％左右細胞生存率降低，這說明在一定程度上，吉西他濱對HCC827細胞具有殺傷及促進細胞死亡的作用，并且隨著其濃度的增加，其殺傷及促進細胞死亡的作用就越明顯，抑制率就越高，細胞的存活率也就越低，從而達到的抗腫瘤效果也越好；使用吉西他濱單獨處理，盡管可以在一定程度上促進細胞的DNA合成及有絲

4、分裂（即在細胞增殖上具有促進作用），但它最終會使總體細胞數(shù)量減少，因為在促進增值的同時，它也會誘導大量的細胞凋亡。⑵單用華蟾素對HCC827細胞的抑制率及細胞周期的影響：華蟾素對HCC827細胞活力具有抑制作用，并且這種抑制作用呈現(xiàn)出一定的劑量依賴性。顯微鏡下觀察到華蟾素處理能呈劑量依賴性地減少細胞數(shù)量，但最終死亡細胞并無明顯的增多；華蟾素單獨處理能促進細胞進入DNA合成期（S期），但最終細胞卻不能完全發(fā)生有絲分裂，因為細胞分裂在G2/

5、M期被阻滯，同時與對照組相對比無明顯細胞凋亡，因此總的效應為細胞數(shù)量的減少。⑶吉西他濱聯(lián)合不同稀釋倍數(shù)的華蟾素對HCC827細胞的抑制率及細胞周期的影響：吉西他濱(0.04 uM)和華蟾素（20、40、80、160倍稀釋）藥物單用均可以降低HCC827細胞活力，而華蟾素聯(lián)合吉西他濱可以進一步降低HCC827細胞活力，提高細胞生存抑制率；華蟾素聯(lián)合吉西他濱對細胞周期的影響比較復雜，聯(lián)合處理能夠對細胞進入DNA合成期（S期）進行抑制，但最終