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文檔簡介
1、同體或異體角膜移植、同體或異體角膜緣上皮細胞移植,都存在材料來源有限和免疫排斥等缺陷。利用表皮干細胞橫向分化產生角膜上皮細胞,為構建組織工程角膜提供種子細胞,在技術層面上已有一定的積累,但是關于橫向分化的分子機制依然不清楚。目前國內外關于人表皮細胞與人角膜上皮細胞蛋白質組學研究未見報道。本文應用蛋白質組技術比較表皮細胞與角膜上皮細胞之間的蛋白質表達差異,旨在揭示成體干細胞橫向分化的分子機制以及為篩選表皮細胞與角膜上皮細胞的差異分子標簽提
2、供參考。 本論文首先分離和培養(yǎng)了人表皮細胞與角膜上皮細胞,然后,應用蛋白質雙向凝膠電泳分別對人表皮細胞與角膜上皮細胞總蛋白進行蛋白質組學分析,用基質輔助激光解吸附/電離飛行時間串級質譜法(MALDI-TOF-MS/MS)鑒定差異蛋白,獲得人表皮細胞與角膜上皮細胞蛋白質600余個清晰的蛋白質斑點。結果表明人表皮細胞與角膜上皮細胞在蛋白質表達上有較高的相似性以及較好的可比性;在比較分析出的26個差異點中,初步鑒定出四個差異表達蛋白
3、,分別是Chlorideintracellular channel 1 (細胞內氯離子通道1)、Psoriasin、Chain D,HumanB Lactate Dehydrogenase (乳酸脫氫酶B) 和 serine (or cysteine) proteinaseinhibitor (絲氨酸蛋白酶抑制因子);對四個蛋白的可能功能進行了初步分析。本實驗為探索表皮細胞橫向分化成角膜上皮細胞的分子機制做出了有益的嘗試,并提供了具有一
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