基于磁分選技術與光譜技術對于腫瘤細胞的分離及檢測.pdf

1、納米材料因具有特殊的的化學性質和物理性質因而廣泛被用于物質檢測及生物應用領域等方面。在物質檢測方面，納米技術具有較高的靈敏度和高效性。循環(huán)腫瘤細胞(CTC)是存在于外周血中少量的惡性腫瘤細胞，這些腫瘤會通過血液轉移至其他器官，而腫瘤的轉移是造成患者死亡的主要原因。在早期診斷階段，循環(huán)腫瘤細胞的診斷可有助于鑒別良性和惡性腫瘤，轉移風險等預測及評估。因此循環(huán)腫瘤細胞的早期診斷及治療，對于患者預后判斷、療效評價及個體化治療都具有十分重要的意義

2、。免疫磁珠分離技術是結合免疫學的高度特異性與磁珠的磁響應性的一項免疫學技術。本論文致力于利用合成的納米材料通過磁分選技術檢測及分離循環(huán)腫瘤細胞。本論文所用的免疫磁珠具有極小粒徑，較好的磁強度以及良好的特異性等特性，以及所制備的拉曼納米粒子具有粒徑小，分散均勻，特異性強，具有將強的拉曼信號等優(yōu)勢，結合熒光技術及表面增強拉曼技術等，建立了性能良好的捕獲及分選檢測循環(huán)腫瘤細胞方法。
　　本論文主要研究工作如下:
　　1.基于磁性免

3、疫磁珠對循環(huán)腫瘤細胞的富集及檢測。本章基于磁分選技術在腫瘤細胞分選方面的發(fā)展和應用，利用特異性抗體與細胞表面特異性抗原相結合，使得循環(huán)腫瘤細胞和特異性的免疫磁珠特異性結合，從而在外界磁場的作用下，使得目的細胞在磁場的作用下從混合細胞中分離出來。分離出的細胞由間接熒光技術在其細胞表面連接結合PE熒光團的特異性抗體，并用DAPI染色細胞核定位細胞位置。通過倒置熒光顯微鏡的觀察，從而實現了對腫瘤細胞的定量檢測。本章所選用的目的細胞為肺癌A54

4、9細胞，對照細胞為MRC-5細胞。依據實驗結果顯示檢測下限可達到每毫升三個A549細胞，具有較好的靈敏度和檢測下限。本實驗是利用磁分選技術及間接免疫熒光技術雙功能檢測及分離肺癌循環(huán)腫瘤細胞。
　　2.基于磁分離技術和表面增強拉曼技術捕獲及檢測Hela細胞。本章基于磁分選作用對腫瘤細胞的特異性的分選及檢測，將目的細胞從混合細胞中分選出來，同時制備了一種可特異性連接到目的細胞表面的納米粒子AuNPs-MBA-BSA-FA，依據實驗表征