復方雙苓止瀉散對潰瘍性結腸炎的療效及熱休克蛋白70表達的影響.pdf

1、目的：用復方雙苓止瀉散灌胃治療葡聚糖硫酸鈉(DSS)誘導的大鼠潰瘍性結腸炎(UC)，并檢測結腸組織中熱休克蛋白70表達的變化，探討該藥對UC的治療作用及機制。
　　方法：取90只清潔級SD大鼠，從中隨機取10只作為正常對照組(NC)，其余80只采用右旋葡聚糖硫酸鈉(Dextran sulfate sodium，DSS)建立大鼠潰瘍性結腸炎模型，通過觀察大鼠的一般情況變化及血便等癥狀來判斷大鼠潰瘍性結腸炎模型建立是否成功。模型建立后

2、，把80只SD大鼠隨機分為8組，每組10只，分別為：DSS模型3天組(Dextran sulfatesodium model Three days group，DT group)、DSS模型6天組(Dextransulfate sodium model Six days group，DS group)、DSS模型生理鹽水3天組(Salin model Three days group，ST group)、DSS模型生理鹽水6天組(Sal

3、inmodel Six days group，SS group)、復方雙苓止瀉散3天組(compoundshuang-ling antidiarrhea powder Three days treatment group，CT group)、復方雙苓止瀉散6天組(compound shuang-ling antidiarrhea powder Six daystreatment group，CS group)、萬鑫母仔快康3天組(Wan

4、-xin-mu-zai-kuai-kang Three days group，WT group)和萬鑫母仔快康6天組(Wan-xin-mu-zai-kuai-kang Six days group，WS group)。實驗治療過程中每日觀察大鼠的活動、進食等一般情況以及體重、稀便、糞便隱血情況，計算各組大鼠疾病活動指數(DAI)評分[1]。然后分別于3天、6天取時間相對應組大鼠的結腸組織標本，各組標本行HE染色，鏡下觀察各組大鼠結腸組織

5、的病理變化，評估組織學損傷情況，并應用免疫組化染色、Western-blot、RT-PCR等實驗方法檢測各組大鼠結腸組織中HSP70的表達水平。
　　結果：
　　1、大鼠的一般狀況
　　正常對照組大鼠體重增加、大便正常、飲食活動正常；DSS模型組和生理鹽水組大鼠體重減輕、肉眼血便、少食懶動；CS組與WS組的大鼠體重開始增加、大便無肉眼血便、飲食活動正常。根據疾病活動指數評分，第三天時：其它各組和正常對照組比較均有統(tǒng)計學

6、意義(P<0.05)，模型對照組與模型生理鹽水組比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，模型對照組分別與復方雙苓止瀉散組及萬鑫母仔快康組比較均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，模型生理鹽水組分別與復方雙苓止瀉散組及萬鑫母仔快康組比較均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，復方雙苓止瀉散組與萬鑫母仔快康組比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；第六天時各組之間比較結果與第三天時各組之間比較結果相同；DT組與DS組比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，ST組與SS組比

7、較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，CT組與SS組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，WT組與WS組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　2、大鼠腸管HE染色及病理損傷結果
　　正常對照組大鼠結腸黏膜結構完整，單層柱狀上皮細胞排列整齊，腺體結構排列規(guī)則；DSS模型組和DSS生理鹽水組大鼠結腸黏膜充血、水腫、甚至缺失，腺體增生，排列紊亂，腸柱狀上皮細胞壞死脫落，細胞之間界限不清，黏膜下有大量淋巴細胞及中性粒細胞侵潤，呈典型的炎癥改

8、變；CT組與WT組大鼠結腸黏膜充血水腫減輕，黏膜下淋巴細胞及中性粒細胞減少；CS組與WS組的大鼠，結腸黏膜受損結構明顯恢復，腸柱狀上皮細胞排列整齊，黏膜下只有少量淋巴細胞及中性粒細胞。根據組織學損傷評分標準，統(tǒng)計學結果顯示，第三天時：其它各組和正常對照組比較均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，模型對照組與模型生理鹽水組比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，模型對照組分別與復方雙苓止瀉散組及萬鑫母仔快康組比較均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，模型生

9、理鹽水組分別與復方雙苓止瀉散組及萬鑫母仔快康組比較均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，復方雙苓止瀉散組與萬鑫母仔快康組比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；第六天時各組之間比較結果與第三天時各組之間比較結果相同；DT組與DS組比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，ST組與SS組比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，CT組與CS組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，WT組與WS組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　3、大鼠結腸黏膜HSP70的表達

10、
　　正常對照組中大鼠結腸黏膜HSP70表達最高，DSS模型組和DSS模型生理鹽水組大鼠腸黏膜HSP70的表達明顯低于正常對照組；CS組和WS組大鼠結腸黏膜HSP70的表達比DSS模型組明顯增強，但表達量仍低于正常對照組。統(tǒng)計學結果顯示，第三天時：其它各組和正常對照組比較均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，模型對照組與模型生理鹽水組比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，模型對照組分別與復方雙苓止瀉散組及萬鑫母仔快康組比較均有統(tǒng)計學意義(P

11、<0.05)，模型生理鹽水組分別與復方雙苓止瀉散組及萬鑫母仔快康組比較均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，復方雙苓止瀉散組與萬鑫母仔快康組比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；第六天時各組之間比較結果與第三天時各組之間比較結果相同；DT組與DS組比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，ST組與SS組比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，CT組與CS組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，WT組與WS組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　結論：復方雙