萊菔硫烷通過(guò)Nrf2-ARE通路減輕大鼠移植心臟冷缺血再灌注損傷.pdf

1、目的：觀察 Nrf2-ARE通路對(duì)大鼠心臟移植冷缺血再灌注損傷的影響及萊菔硫烷保護(hù)大鼠移植心臟的相關(guān)機(jī)制。
　　方法：1實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷慕⒑头纸M：健康雄性 Sprague-Dawley（SD）大鼠40只隨機(jī)分成3組：Sham組（假手術(shù)組，n=8），I/R組（缺血再灌注組，n=16），I/R+SFN組（萊菔硫烷預(yù)處理組，n=16）。Sham組：僅行開(kāi)/關(guān)腹手術(shù)，術(shù)前24h經(jīng)鼠尾靜脈注射等量的生理鹽水；I/R組：受體于移植前24h經(jīng)鼠尾靜

2、脈注射等量的生理鹽水；I/R+SFN組：受體于移植前24h經(jīng)尾靜脈注射 SFN2.5 mg/kg；其中I/R組和I/R+SFN組均將冷藏于4℃HTK液9 h的供心移植到受體大鼠腹腔，建立大鼠同種異體異位心臟移植模型，移植后24h兩組均將移植心臟取出；Sham組開(kāi)/關(guān)腹24h后取自體心臟。2檢測(cè)指標(biāo)：心肌酶學(xué)：再灌注后6h、24h分別從受體鼠眼內(nèi)眥靜脈取血，檢測(cè)血清中乳酸脫氫酶（LDH）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、肌鈣蛋白 T（TnT

3、）的水平。采用硫代巴比妥酸法（TBARS）法、黃嘌呤氧化酶法分別檢測(cè)心肌組織中脂質(zhì)過(guò)氧化物（LPO）含量及超氧化物歧化酶（SOD）的活性。用HE染色法觀察各組心臟移植后供心心肌組織學(xué)變化。應(yīng)用免疫組織化學(xué)法（EnVision兩步法）及免疫蛋白印跡法觀察Nrf2、HO-1和NQO1在各組心臟移植后24h供心心肌組織的蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：心肌酶學(xué)：與 Sham組比較，I/R組，I/R+SFN組血清中 LDH、CK-MB、TnT含

4、量明顯升高（P＜0.05）；萊菔硫烷預(yù)處理后，缺血再灌注6h，與 I/R組比較，I/R+SFN組血清中 LDH、CK-MB、TnT含量明顯降低（P＜0.05），再灌注24h，I/R+SFN組TnT含量、CK-MB活性、LDH活性明顯降低（P＜0.05）。心肌組織中LPO含量及SOD的活性：與Sham組相比，I/R組和I/R+SFN組心肌組織SOD活性明顯降低（P＜0.05），而心肌組織 LPO含量明顯升高（P＜0.05）；與I/R組比較

5、，I/R+SFN組心肌組織SOD活性未見(jiàn)明顯變化；而心肌組織LPO含量顯著降低（P＜0.05）。心肌組織學(xué)：Sham組：心肌纖維排列整齊，結(jié)構(gòu)清楚，無(wú)心肌纖維的破壞，組織間隙無(wú)炎細(xì)胞滲出，胞核清晰。I/R組：心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)紊亂、較多心肌纖維斷裂、大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)；I/R+SFN組：心肌結(jié)構(gòu)較清楚，心肌纖維排列較整齊，心肌組織中心肌間質(zhì)散在中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。心肌組織 Nrf2及其下游分子 HO-1和NQO1蛋白表達(dá)：Sham組：心肌組織內(nèi)

6、Nrf2蛋白幾乎不表達(dá)、HO-1蛋白弱表達(dá)、NQO1蛋白也是弱表達(dá)。與Sham組比較，I/R組心肌組織Nrf2核蛋白、Nrf2、HO-1和NQO1蛋白水平顯著升高（P＜0.01）；與 I/R組比較，I/R+SFN組心肌組織 Nrf2核蛋白、Nrf2、HO-1和NQO1蛋白水平顯著升高（P＜0.01），但與 Sham組比較，心肌組織 Nrf2核蛋白、Nrf2、HO-1和NQO1蛋白水平仍高于正常（P＜0.01）。
　　結(jié)論：1心臟移