亞硒酸鈉脅迫下斑點叉尾鮰服組織差異蛋白質(zhì)組研究.pdf

1、本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得直昌太堂或其他教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名( 手寫) ： 簽字日期：c 沁1 1 年‘月／歹日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解直昌太堂有關(guān)保留、使

2、用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)直昌太堂可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所和中國學(xué)術(shù)期刊( 光盤版) 電子雜志社將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》和《中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》中全文發(fā)表，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。( 保密的學(xué)位論文在解密

3、后適用本授權(quán)書)學(xué)位敝儲簽名c 手瓢辮繹簽字日期穢叭年6 月《日??吵孝簽字日期：弘w 年‘月哆日激、加強機體免疫力、開展亞硒酸鈉對斑點察的基礎(chǔ)實驗上開展腦組織差異蛋白質(zhì)組的初步研究。第一部分開展亞硒酸鈉對斑點叉尾鲴幼魚的急性毒性試驗，結(jié)果表明：試驗組斑點叉尾鲴易受驚擾，身體失去平衡，或是側(cè)游、或是仰游、或是翻滾。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析得到亞硒酸鈉對鲴魚9 6 h 半致死濃度為3 5 ．5 9 m e , ／L 。第二部分依據(jù)急性毒性試驗分析結(jié)果

4、，取經(jīng)過半致死濃度3 5 ．5 9 m g ／L 浸泡9 6 h 后還存活的魚小腦進行石蠟組織切片和電鏡觀察。組織切片結(jié)果表明：對照組小腦皮質(zhì)顆粒層細胞排列均勻，顆粒層結(jié)構(gòu)完整，呈正常的圓形；實驗組小腦皮質(zhì)顆粒層區(qū)域疏松、水腫，呈現(xiàn)空網(wǎng)狀，顆粒細胞崩解消失，部分細胞失去正常的圓形，出現(xiàn)菱角，呈三角形或者不規(guī)則形狀。電鏡結(jié)果表明：對照組小腦皮質(zhì)細胞內(nèi)有豐富的細胞器，線粒體豐富，嵴板排列規(guī)整，髓鞘結(jié)構(gòu)完整；實驗組小腦皮質(zhì)細胞質(zhì)水腫，細胞質(zhì)內(nèi)

5、細胞器明顯減少，線粒體水腫，雙層膜結(jié)構(gòu)坍塌，嵴溶解消失，有的線粒體呈空泡狀，僅見線粒體的輪廓。病理觀察表明亞硒酸鈉對斑點叉尾鲴腦組織有一定的毒性損傷。第三部分同樣取經(jīng)過半致死濃度3 5 ．5 9 m e C L 浸泡9 6 h 后還存活的魚腦組織進行蛋白質(zhì)組學(xué)研究。首先通過優(yōu)化雙向凝膠電泳各方面條件后建立一套適合于斑點叉尾鲴腦組織雙向電泳體系，分析雙向電泳圖譜找出差異蛋白點。結(jié)果表明：對照組分離出蛋白質(zhì)點1 0 2 4 ±2

6、5 個，實驗組為9 9 8 ±2 0 個，對照組與實驗組共有9 個差異表達的蛋白質(zhì)點。將差異蛋白質(zhì)點進行生物質(zhì)譜分析鑒定，并通過對N C B I n r 和E S T 數(shù)據(jù)庫檢索得到9 種蛋白質(zhì)，其中3 種蛋白質(zhì)為p e r o x i r e d o x i n - 2 、a l d o s e r e d u c t a s e 和c a r b o n i ca n h y d r a s c ，有望作為研究斑點叉尾鲴腦