不同劑量大豆苷元對去勢大鼠血脂和肝臟LDLR表達的影響及其與雌激素受體的關系.pdf

1、研究背景：
　　 隨著植物雌激素在圍絕經(jīng)期婦女中的廣泛應用,有關它的研究也越來越多。關于植物雌激素,特別是大豆異黃酮類對血脂的作用引人注目。但關于不同劑量大豆苷元對血脂的影響及其與雌激素受體的關系方面還有待研究。
　　 第一部分不同劑量大豆苷元對去勢大鼠血脂和肝臟Ers和LDLR表達的影響
　　 目的：
　　 研究不同劑量大豆苷元對去勢大鼠血脂指標和肝臟雌激素受體、LDLRmRNA表達的影響,探討大豆苷元

2、對去勢大鼠血脂的作用及其可能的機制。
　　 方法：
　　 取4月齡SD雌性大鼠(由復旦大學實驗動物部提供),隨機分為6組:去勢組(行雙側(cè)卵巢切除ovariectomy,OVX)、假手術組(Sham)、去勢+戊酸雌二醇組(E2,戊酸雌二醇800μg/kg·d)、去勢+高劑量大豆苷元組(H-Dai,大豆苷元200mg/kg·d)、去勢+中劑量大豆苷元組(M-Dai,大豆苷元50 mg/kg·d)和去勢+低劑量大豆苷元組(L-

3、Dai,大豆苷元10 mg/kg·d)。去勢組于術后1周起行陰道脫落細胞涂片,連續(xù)5天均未出現(xiàn)角化細胞為手術成功。假手術大鼠即將4月齡SD大鼠雙側(cè)腹下區(qū)進腹取少量脂肪組織后關腹。術后4周開始以相應的藥物灌胃,3個月后處死大鼠。取血清檢測甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-c)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-c),取同一部位肝臟組織檢測雌激素受體和低密度脂蛋白受體(LDLR)的表達。
　　 結果：
　　 1、血清L

4、DL-c:OVX組血清LDL-c濃度明顯升高,與Sham組比較差異顯著,E2組、M-Dai組和H-Dai組LDL-c下降,與OVX組相比有顯著統(tǒng)計學意義,L-Dai、M-Dai和H-Dai組LDL-c隨劑量增加呈下降趨勢,各組之間的差別有明顯統(tǒng)計學意義。
　　 2、血清TG:E2組血清TG升高,與Sham組和OVX組相比有顯著差別,H-Dai組TG降低,與Sham組和OVX組相比差異有顯著性,H-Dai組TG低于M-Dai組和L

5、-Dai組,且有顯著性差異。
　　 3、血清HDL-c:OVX組血清HDL-c明顯低于Sham組和E2組,Sham組與E2組相比無明顯差異,各大豆苷元組與OVX組無明顯差異,卻顯著低于Sham組。
　　 4、Erα和ERβRNA水平:OVX組肝臟Erα mRNA表達下降,與Sham組和E2組相比差異顯著,M-Dai組、H-Dai組Erα mRNA表達增加,與OVX組相比有明顯統(tǒng)計學差異,L-Dai組、M-Dai組和H-D

6、ai組Erα mRNA表達量呈增加趨勢,L-Dai組、M-Dai組與H-Dai組差異顯著。
　　 5、LDLR mRNA水平:OVX組肝臟LDLR mRNA表達下降,與Sham組和E2組相比有顯著統(tǒng)計學意義,L-Dai組、M-Dai組和H-Dai組LDLR mRNA表達逐漸增加,L-Dai組、M-Dai組與H-Dai組差異顯著,且M-Dai組、H-Dai組與OVX組相比表達增加,有明顯統(tǒng)計學差異。
　　 結論：
　

7、　 1、大豆苷元對去勢大鼠血脂有一定的有益作用,且大豆苷元對LDL-c的影響具有劑量依賴性,劑量越高,作用越強。大豆苷元組對血清HDL-c無明顯影響。
　　 2、各組均未檢測到Erβ的表達。中、高劑量大豆苷元可升高去勢大鼠肝臟Erα和LDLR mRNA的表達。
　　 3、大豆苷元對去勢大鼠血清LDL-c的降低作用和對肝臟Erα、LDLR表達增加的影響是一致的,都是隨著劑量的增加其作用更明顯,推測大豆苷元降低去勢大鼠血清

8、LDL-c的作用可能主要是通過Erα途徑增加肝臟LDLR的表達而實現(xiàn)的
　　 第二部分大豆苷元對HepG2細胞LDLR表達的影響及與ER的關系
　　 目的：
　　 研究一定濃度大豆苷元對HepG2細胞LDLR表達的影響與ER的關系。
　　 方法：
　　 本實驗選用HepG2細胞,用MTT法確定大豆苷元半數(shù)抑制濃度,用此濃度范圍內(nèi)的不同濃度作用于細胞,用western-blot檢測LDLR表達的變化

9、,然后在用IC1182780和MPP分別阻斷雌激素受體和雌激素受體α后再次用western-blot檢測LDLR表達的變化。
　　 結果：
　　 1、分別與對照組和10-9大豆苷元組相比,10-7大豆苷元組和10-5大豆苷元組Erα和LDLR表達增加,且10-5大豆苷元組Erα和LDLR表達高于10-7大豆苷元組,有統(tǒng)計學差異。
　　 2、與10-5大豆苷元組相比,大豆苷元+ICI182780組和大豆苷元+MPP