ARP家族對(duì)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和DNA損傷修復(fù)的機(jī)制研究.pdf

1、染色質(zhì)是遺傳物質(zhì)的載體，其結(jié)構(gòu)對(duì)真核基因的轉(zhuǎn)錄活性具有重要影響。作為染色質(zhì)結(jié)構(gòu)基本組成單位的核小體，通過(guò)組裝和排列影響染色質(zhì)構(gòu)型進(jìn)而對(duì)基因表達(dá)進(jìn)行調(diào)控，因此對(duì)影響核小體組裝排列機(jī)制的研究有助于我們揭開(kāi)一系列與基因轉(zhuǎn)錄相關(guān)生命活動(dòng)的神秘面紗。此外，DNA損傷修復(fù)應(yīng)答機(jī)制的研究也具有重要意義，作為遺傳信息載體的DNA對(duì)生物體的重要性不言而喻。DNA的損傷會(huì)破壞基因組的穩(wěn)定性和完整性，進(jìn)而影響細(xì)胞的正常生命活動(dòng)，從而導(dǎo)致嚴(yán)重疾病的發(fā)生，所以對(duì)

2、DNA損傷修復(fù)機(jī)制的研究意義重大并刻不容緩。
　　本課題選取釀酒酵母作為研究模式生物，對(duì)細(xì)胞核內(nèi)肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白(ARP)家族參與染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和DNA損傷修復(fù)的過(guò)程進(jìn)行了初步的研究。我們首先成功構(gòu)建了一系列實(shí)驗(yàn)所需突變體菌株，接著進(jìn)行HU和MMS條件下細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)分析，發(fā)現(xiàn)核內(nèi)ARP蛋白家族參與了DNA合成與DNA損傷修復(fù)應(yīng)答。之后我們分別制備了核內(nèi)ARP蛋白家族的ChIP DNA、RNA和單核小體樣品并進(jìn)行高通量測(cè)序。對(duì)核小體數(shù)據(jù)

3、的初期分析結(jié)果與表型一致表明核內(nèi)ARP家族參與影響了染色質(zhì)結(jié)構(gòu)。
　　研究表明Arp6，Arp8等與H2A.Z相互作用參與了染色質(zhì)結(jié)構(gòu)改變、基因表達(dá)調(diào)控和DNA損傷修復(fù)應(yīng)答，而其具體分子機(jī)制還有待揭示。我們擬通過(guò)對(duì)Htz1參與脂肪酸脅迫應(yīng)答進(jìn)行研究進(jìn)一步解析Htz1的功能。結(jié)果表明在脂肪酸脅迫條件下三羧酸循環(huán)相關(guān)基因表達(dá)被激活而核糖體相關(guān)基因表達(dá)被抑制。更重要的是我們發(fā)現(xiàn)Htz1可作為脂肪酸脅迫的感應(yīng)器。在遭受脂肪酸脅迫時(shí)Htz1