犬H5N2亞型流感病毒的致病和傳播特性實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、一直以來(lái)人們并不認(rèn)為流感病毒可以感染犬和貓。然而，這種結(jié)論很快被推翻。人們先后分離到犬流感病毒H3N8，H3N2，H5N1以及H1N1。并且大多數(shù)的H5N2亞型流感病毒都是從禽類(lèi)中分離到的，很少?gòu)牟溉閯?dòng)物中分離到。
　　 2009年我實(shí)驗(yàn)室分離到一株A/canine/Shandong/JT01/2009(H5N2)毒株簡(jiǎn)稱(chēng)CA/SD/JT01/09(H5N2)，但是對(duì)于其致病性和傳播性尚不清楚。因此我們通過(guò)以犬、小白鼠和雞作為實(shí)

2、驗(yàn)動(dòng)物模型，進(jìn)行其致病性和傳播性研究。
　　 在致病性實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)Dp1組接種犬中有5只在接種后3-6天表現(xiàn)出了類(lèi)似流感樣臨床癥狀;6只在接種后2-3天體溫升高，之后體溫恢復(fù)正常。7、14、21天犬血清檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，Dp1組接種犬的血清全部呈陽(yáng)性。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的直腸拭子中未出現(xiàn)排毒情況，而Dp1組接種犬的鼻拭子洗脫液在1-5天呈陽(yáng)性。之后采取RT-PCR的方法對(duì)血凝陽(yáng)性的鼻拭子樣品進(jìn)行病毒檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)檢測(cè)到的病毒與原病毒一致。另外

3、，我們對(duì)1只接種犬和1只對(duì)照犬進(jìn)行剖檢取樣，用RT-PCR的方法從接種犬的鼻、氣管和肺臟組織中分離到流感病毒，而且該流感病毒與原病毒一致，而對(duì)照犬中卻沒(méi)有分離到病毒。
　　 與犬不同的是，Mp1組接種的小白鼠沒(méi)有表現(xiàn)出臨床癥狀，但是14天時(shí)抗體呈陽(yáng)性，21天抗體消失。Mp2組對(duì)照組未表現(xiàn)任何臨床癥狀，抗體為陰性。
　　 在雞的動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)中，Cp1組接種雞表現(xiàn)出了較明顯的流感樣臨床癥狀，對(duì)發(fā)病雞進(jìn)行剖檢時(shí)，發(fā)現(xiàn)部分雞出現(xiàn)

4、了明顯的流感病毒剖檢變化。Cp2組對(duì)照組雞無(wú)臨床癥狀。病理組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)，在雞的十二指腸、脾臟、肺、法氏囊、肝臟、腎臟、胰腺、心臟等器官內(nèi)都產(chǎn)生了病變等。通過(guò)RT-PCR的方法對(duì)上述器官進(jìn)行病毒分離鑒定，結(jié)果顯示都檢測(cè)到了病毒，且與原病毒一致。
　　 在傳播性實(shí)驗(yàn)中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Dt1組哨兵犬中有4只在與Ds1組接種犬同居5-7天后，表現(xiàn)出了流感樣臨床癥狀，5只犬在4-5天時(shí)體溫升高，接著很快恢復(fù)正常，另外在14天與21天時(shí)從所有哨

5、兵犬體內(nèi)檢測(cè)到了流感抗體。通過(guò)RT-PCR的方法在同居后3-6天從6只哨兵犬的鼻拭子中分離到該病毒，并且發(fā)現(xiàn)該流感病毒與原病毒一致。在同居后4天，我們通過(guò)RT-PCR的方法，從1只哨兵犬的鼻、氣管和肺臟中成功分離到并確定了該病毒與原病毒一致。
　　 與致病性實(shí)驗(yàn)一樣，5只哨兵鼠并沒(méi)有表現(xiàn)出任何臨床癥狀，但是14天時(shí)抗體陽(yáng)性，而到21天時(shí)血清抗體呈陰性。
　　 通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，哨兵雞的臨床癥狀與病理組織學(xué)檢查與致病性實(shí)驗(yàn)中接