Cd2+污染脅迫對多齒圍沙蠶(Perinereis nuntia)的毒性效應.pdf

1、鎘(Cd)是生物毒性很強的重金屬之一，且廣泛分布于環(huán)境中。鎘可在生物體內富集，當濃度達到一定程度時，則發(fā)生鎘中毒。大量的研究表明沙蠶對于重金屬，尤其是Cd2+污染物具有較強的敏感性，日后可以作為污染的指示種，多齒圍沙蠶（Perinereisnuntia）為魚類、蝦類和蟹類的餌料之一，也是垂釣的優(yōu)質餌料，廣泛分布于我國東海、黃海、渤海和南海。但是目前應用沙蠶作為模式生物進行毒理學研究的報道還不多，尤其是對于多齒圍沙蠶的重金屬脅迫尚少有報道

2、。
　　 本研究以多齒圍沙蠶（Perinereisnuntia）為實驗對象，以氯化鎘作為典型污染物，以海水作為對照，對6個不同濃度鎘處理下，10個相同規(guī)格的多齒圍沙蠶進行了4d、14d的暴露實驗，測定了多齒圍沙蠶在4種不同的暫養(yǎng)條件的LC50的差異，鎘對沙蠶抗氧化酶系統(tǒng)和金屬硫蛋白的影響、體內鎘的蓄積量的變化、采用單細胞凝膠電泳法研究鎘對多齒圍沙蠶體腔白細胞DNA損傷情況，采用Real-timePCR對相同規(guī)格不同鎘濃度溶液下多

3、齒圍沙蠶MPⅡ基因mRNA的表達量進行了測定。
　　 本研究結果如下:
　　 1、LC50方面，96h相同規(guī)格4種污染條件分別為:在每個無沙的鎘污染溶液燒杯放5條沙蠶(a)、在無沙的鎘污染溶液燒杯放單條沙蠶(b)、在有沙的鎘污染溶液燒杯中放5條沙蠶(c)和在有沙的鎘污染溶液燒杯放單條沙蠶(d)。結果表明:Cd2+對沙蠶表現(xiàn)出較強的毒性，在a、b、c和d的條件下，96h的LC50分別為6729.0μg/L、7873.1μg

4、/L、10288.0μg/L和17608.0μg/L。
　　 2、抗氧化酶系統(tǒng)方面，多齒圍沙蠶在鎘脅迫下，隨著鎘濃度的增加，CAT和SOD括性與對照組相比均呈現(xiàn)出先上升后下降的趨勢。4d低濃度組兩種酶活性被顯著誘導，6400μg/L組酶活性受到抑制。方差分析結果顯示，4d、14d各濃度組與對照組間均差異極顯著(P＜0.01)。而隨著鎘濃度的增加AchE活性與對照組相比呈下降趨勢，說明AchE活性在鎘脅迫下受到抑制，LSD測驗結果

5、顯示，4d、14d各濃度組與對照組間均差異極顯著(P＜0.01)。與對照組相比，暴露于鎘中多齒圍沙蠶AchE的抑制率呈明顯上升趨勢，其中14d6400μg/L抑制率達到111.14％，說明該濃度對多齒圍沙蠶的損傷達到了中毒甚至死亡的程度。
　　 3、金屬硫蛋白(MT)方面，沙蠶在重金屬鎘的作用下體內MT含量呈現(xiàn)出緩慢上升，在濃度為6400μg/L濃度時MT含量略有下降的趨勢，而仍然高于對照組，說明鎘脅迫下多齒圍沙蠶體內的MT被顯

6、著性誘導。LSD測驗得出，4d、14d各濃度組與對照組間差異極顯著(P＜0.01)。
　　 4，GSH方面，隨著鎘濃度的增加GSH含量呈先上升后下降趨勢，LSD測驗結果顯示，4d各濃度組與對照組間差異極顯著(P＜0.01)，14d差異不顯著(P＞0.05)。
　　 5、DNA損傷方面，相對于海水對照組，多齒圍沙蠶在重金屬鎘暴露下，隨著濃度的增加體腔白細胞損傷數(shù)量明顯增多，“彗星”平均尾長和平均尾矩也明顯增大，其尾DNA含

7、量百分比也呈上升趨勢，說明鎘對多齒圍沙蠶體腔白細胞具有一定的損傷作用。
　　 6、多齒圍沙蠶體內重金屬含量方面，沙蠶體內重金屬含量與鎘呈時間劑量效應，即4d、14d隨著鎘濃度的增加，體內重金屬含量呈上升趨勢，且14d體內重金屬含量大于4d。LSD測驗得出，僅4d400μg/L與對照組間差異不顯著(P＞0.05)，其他各處理組與對照組間均差異極顯著(P＜0.01)。
　　 7、MPⅡ基因mRNA表達量方面，4d低濃度組40

8、0μg/L、800μg/L與對照組比較變化不明顯，而隨著鎘濃度的升高3200μg/L、6400μg/L表達量有所提高分別為對照組表達量的1.9倍和2.4倍。14d400μg/L、800μg/L濃度組變化仍然不明顯，而隨著鎘濃度的增大,1600μg/L、3200μg/L、6400μg/L濃度組MPⅡmRNA表達量顯著升高，分別為對照組的3.5倍、5.1倍、5.5倍。
　　 就不同的抗氧化酶而言，AchE更能夠靈敏、準確的反應出污染

9、物對實驗動物的氧化酶影響。彗星實驗以及MT含量的變化可以準確的反應出污染物對多齒圍沙蠶的毒性效應，經(jīng)實驗證明反應靈敏，得到結果可靠，而相比較彗星實驗的指標而言，彗尾距更加能夠反應出損傷程度。在低濃度鎘暴露下抗氧化酶的變化靈敏度低于彗星實驗和MT含量的變化，所以結合彗星實驗的結果更加全面的反應污染物對生物體的毒性效應。本次實驗，將彗星實驗、Real-timePCR等現(xiàn)代化的分子手段引入到對海洋底棲多毛類的研究中，為污染毒理學的應用拓寬了思