鐵對銅綠假單胞菌PAO1種群穩(wěn)定影響及機制探究.pdf

1、銅綠假單胞菌是常見的條件致病菌，其致病因子的表達受群體感應所調控。實驗室已有研究顯示，環(huán)境因子銨會影響群體感應穩(wěn)定、造成種群崩潰、防止致病感染。鐵作為重要的環(huán)境因子，與群體感應PQS系統密切相關，但是至今未見鐵對群體感應穩(wěn)定的影響。基于此，本論文以銅綠假單胞菌Pseudomonas aeruginosa PAO1為試驗菌株，研究鐵對其群體感應穩(wěn)定的影響，并對鐵致群體感應穩(wěn)定影響的分子機制進行初探。所得主要結果如下:
　　(1)鐵可

2、以影響銅綠假單胞菌PAO1種群穩(wěn)定。在設定的鐵鹽濃度下，銅綠假單胞菌PAO1的生長沒有顯著性差異;競爭體系中，0-12.5μM鐵濃度下沒有組別發(fā)生崩潰，25-100μM鐵濃度下崩潰組別比例為40％，200μM鐵濃度下崩潰組別比例為60％，鐵濃度越高種群越不穩(wěn)定;長期進化體系中，外加鐵亦可影響銅綠假單胞菌種群穩(wěn)定，在25μM鐵濃度下銅綠假單胞菌崩潰概率為20％，長期進化體系中鐵對種群的干擾要較競爭體系小，其機理值得進一步探究。
　　

3、(2)鐵對銅綠假單胞菌PAO1不同群體感應系統影響存在差異。鐵對群體感應信號分泌lasⅠ和rhlⅠ的影響不大，但對pqsH有抑制作用，相較于不加鐵環(huán)境，加鐵環(huán)境pqsH表達僅為不加鐵環(huán)境的68.01％。鐵不會影響LasR受體活性，但可顯著抑制RhlR和PqsR受體的活性，相較于不加鐵環(huán)境，加鐵環(huán)境rhlR和pqsR表達相近，僅為不加鐵環(huán)境的40％。加鐵可顯著抑制蛋白酶、綠膿素、鼠李糖脂分泌，相較于不加鐵環(huán)境，加鐵環(huán)境中胞外物的分泌依次為

4、不加鐵環(huán)境的66.7-91.7％，89.3-93.8％，58.3-74.3％。三個群體感應系統中，鐵對RhlIR和PQS的影響較大，對LasIR系統影響較小，但是鐵顯著抑制公共物質的分泌可能是鐵致種群不穩(wěn)定的主要因素之一。
　　(3)蛋白酶對群體感應穩(wěn)定的影響較為顯著;鐵元素通過影響mexT和ampR來影響蛋白酶的表達、進而對銅綠假單胞菌種群穩(wěn)定產生重要影響;較之蛋白質酶，鼠李糖脂對種群穩(wěn)定影響較小，鐵元素主要通過影響rhIR對膿