亞慢性砷暴露對小鼠腦組織RXR表達的影響.pdf

1、研究背景:
　　 砷(Arsenic，As)是一種廣泛分布于土壤、巖石和水環(huán)境中的有毒類金屬元素。As在自然界中主要以化合物的形式存在，對健康具有多方面的危害，可引發(fā)多器官和多系統(tǒng)的形態(tài)學和功能上的異常改變。As對神經系統(tǒng)的影響主要表現為頭痛、嗜睡、煩躁、記憶力減退、定向力障礙，驚厥甚至昏迷等亞臨床的神經損傷。兒童由于正處于生理發(fā)育階段對外源化合物的毒作用較為敏感。大量流行病學調查、動物實驗表明，As暴露兒童的中樞神經系統(tǒng)損傷主

2、要表現為學習記憶能力的損害，已廣泛引起社會的高度關注，但目前，關于砷致學習記憶能力損害的分子作用機制尚不清楚。本課題組的前期研究發(fā)現，砷暴露可顯著抑制腦組織中鈣離子/鈣調蛋白依賴性蛋白激酶Ⅳ(calcium/calmodulindependentproteinkinaseⅣ，Camk4)基因、蛋白的表達及c-Fos、JunB等與學習記憶相關基因、蛋白的表達，破壞腦組織中長時程記憶(LTM)的形成。據文獻報道，腦組織Camk4基因的轉錄和

3、翻譯依賴于兩種核受體即甲狀腺激素受體(TR)和視黃醇X受體(RXR)的存在。我們的前期研究已經發(fā)現，砷暴露小鼠大、小腦組織TR受體亞型之一TRβ在基因、蛋白水平均表達顯著下調，但砷是否也影響RXR基因表達國內外未見相關報道。
　　 目的:
　　 觀察砷對小鼠大、小腦組織中RXR基因和蛋白的表達影響，為闡明砷的神經毒作用機制以及防治砷的神經毒性危害提供靶基因依據。
　　 方法:
　　 SPF級小鼠40只，按

4、體重將小鼠隨機分為飲用水對照組、1ppmAs2O3染毒組、2ppmAs2O3染毒組、4ppmAs2O3染毒組、4ppmAs2O3+150mg/kg?；撬岜Ｗo組。通過自然飲用含不同濃度As2O3蒸餾水的方式使小鼠染砷，保護劑是以灌胃方式給予，連續(xù)染毒60天后取腦組織。用基因芯片技術和PCR技術檢測小鼠腦組織視黃醇X受體(RXR)的差異表達，并進一步用Westernblot和免疫組化的方法證實RXR蛋白水平表達和組織分布的改變。采用SPSS

5、11.5統(tǒng)計軟件，用單因素方差分析(ANOVA)，比較各染砷組與對照組間的統(tǒng)計學差異，兩組間比較用LSD法分析，以P＜0.05表示統(tǒng)計學差異顯著。
　　 結果:
　　 基因芯片結果顯示，與對照組比較，各砷暴露組大腦組織RXR基因表達均顯著上調，尤其4ppm組上調更明顯（P＜0.05），而各組之間，小鼠小腦組織RXR的基因表達差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05）。RealTimePCR定量檢測結果顯示，砷暴露組大腦中RXR基因

6、表達顯著上調，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05），與基因芯片結果一致。同時，Westernblotting檢測結果顯示，砷暴露導致小鼠大腦RXR蛋白表達上調，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），且呈劑量-反應關系。免疫組化顯示RXR在砷染毒小鼠大腦4ppm組高表達。另外，我們發(fā)現，在砷暴露小鼠大腦組織，抗氧化劑牛磺酸對砷致2ppm和4ppm劑量組的RXR基因和蛋白表達上調有拮抗作用（P＜0.05）。
　　 結論:
　　 在亞