阿托伐他汀對(duì)同型半胱氨酸作用下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Bcl-2啟動(dòng)子甲基化水平的影響及其抗動(dòng)脈粥樣硬化機(jī)制.pdf

1、目的:探討阿托伐他汀對(duì)同型半胱氨酸（Hcy）作用下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)Bcl-2基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平及其表達(dá)的影響，闡明阿托伐他汀抗動(dòng)脈粥樣硬化(AS)的可能機(jī)制。
　　方法：以HUVEC作為研究對(duì)象，分別用含有0、2、4、8、16和32 mmol·L-1Hcy的RPMI1640培養(yǎng)液對(duì)HUVEC作用48h，行MTT實(shí)驗(yàn)計(jì)算細(xì)胞增殖抑制率及半數(shù)抑制濃度(IC50)，根據(jù)IC50結(jié)果將本實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組(0mmol·L-1

2、Hcy)、Hcy組(9.00mmol·L-1Hcy)、阿托伐他汀組(9.00mmol·L-1Hcy＋1×10-3mmol·L-1阿托伐他汀)。各組細(xì)胞培養(yǎng)48h后，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡水平，熒光定量PCR法檢測(cè)Bcl-2基因的mRNA表達(dá)，Western blotting法檢測(cè)Bcl-2蛋白表達(dá)水平，甲基化特異性PCR(Methylation specific PCR,MSP)聯(lián)合巢式降落式PCR法檢測(cè)Bcl-2啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平。<

3、br>　　結(jié)果：與對(duì)照組比較，Hcy組細(xì)胞凋亡率上升(P＜0.01)， Bcl-2基因的mRNA及蛋白表達(dá)水平下降（P＜0.01），Bcl-2基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平降低（P＜0.01）。與Hcy組比較，阿托伐他汀組內(nèi)皮細(xì)胞凋亡率下降(P＜0.01)，Bcl-2基因mRNA及蛋白表達(dá)水平增加（P＜0.05），Bcl-2基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平升高(P＜0.05)。
　　結(jié)論：阿托伐他汀可通過(guò)調(diào)節(jié)Hcy作用下的HUVEC細(xì)胞Bcl-2基