不同羥基磷灰石納米顆?；蜉d體性能的比較研究.pdf

1、目的：為尋找更為安全、高效的非病毒型基因載體，對10種新改良的羥基磷灰石(Hydroxyapatite，HAT)納米顆粒的體外基因載體性能進行評估。 方法：用透射電鏡觀察了納米顆粒的形態(tài)，并在室溫下觀察其懸浮穩(wěn)定性；測定了經(jīng)過改良的10種HAT納米顆粒在不同pH值和不同的HAT納米顆粒濃度環(huán)境下的DNA結合和保護能力、體外細胞轉染能力和對Hela細胞的生物相容性；并探討了用于HAT納米載體滅菌的方法。 結果：10種納米載

2、體經(jīng)制備工藝改良后在廣泛的pH值范圍內(nèi)與DNA具有良好的結合能力；經(jīng)過非病毒型基因載體聚乙烯亞胺(Polyethylenimine，PEI)等表面活性劑處理的HAT納米載體與DNA具有更好的結合能力；而未經(jīng)PEI等表面活性劑處理的HAT顆粒的懸浮穩(wěn)定性較差，導致其在低濃度時與DNA的結合能力較弱。細胞克隆集落實驗證實10種改良的HAT納米顆粒在轉染濃度范圍內(nèi)未見明顯的毒性改變；而經(jīng)過PEI表面修飾及分散劑處理的HAT顆粒在濃度高于150

3、0μg/ml時表現(xiàn)出明顯的細胞毒性。第8種HAT納米載體轉染效率最高，在入宮頸癌上皮細胞(簡稱Hela細胞)中的轉染效率約為20％，在人鼻咽癌上皮細胞(簡稱CNE-1細胞)中的轉染效率約為35％。對照組脂質(zhì)體在Hela細胞中轉染效率約70％，在CNE-1細胞中轉染效率約為85％。透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，高溫滅菌法對HAT納米顆粒無粒徑膨脹影響。 結論：10種改良的HAT納米載體在廣泛pH范圍內(nèi)與DNA的結合能力強，在轉染濃度范圍內(nèi)與H