電針對非酒精性脂肪肝大鼠相關蛋白表達的影響.pdf

1、背景:
　　非酒精性脂肪肝目前已成為僅次于病毒性肝炎的第二大肝病，這與目前飲食結構改變、生活方式變化、壓力增大等密切相關。西醫(yī)認為，非酒精性脂肪肝是一種以無過量飲酒史的肝組織中蓄積大量脂肪（大多是甘油三酯）的代謝綜合征。其病理改變主要是以肝細胞發(fā)生顯著脂肪變性為特點的脂肪代謝障礙疾病，發(fā)病機理至今尚未完全明確。中醫(yī)認為，本病屬于中醫(yī)“肥胖”、“痰飲”、“積聚”等范疇。多因過食肥甘厚膩、感受濕熱毒邪、情志失調等致病，與痰瘀互結、肝脾

2、失調有關。目前，西醫(yī)治療本病尚無特效藥物且效果不佳。因此，從中醫(yī)角度研究非酒精性脂肪肝，運用電針治療本病具有十分重要的臨床價值。
　　目的:
　　本課題旨在研究電針對非酒精性脂肪肝大鼠消痰化瘀，調和肝脾和調節(jié)脂類代謝等方面的影響，并綜合前期實驗研究，為開發(fā)一個安全有效的針刺方案提供實驗依據(jù)，同時也可為本病的治療提供一種新思路。本實驗從基因及蛋白質表達入手進行研究，還可為后期研究細胞信號轉導等提供實驗基礎。
　　方法:<

3、br>　　取SD大鼠44只，雌性，體質量(180±20)g，將大鼠隨機分配為:正常組、模型組、東寶肝泰組、電針組，每組11只。正常組食用標準飼料，其余各組均采用高脂高膽固醇飼料（含2％膽固醇、10％豬油及88％基礎飼料）喂養(yǎng)8周。造模成功后，東寶肝泰組按0.9g/kg灌服，每日給藥1次，共治療28天;電針組采用“肝俞”、“脾俞”、“膈俞”穴治療，頻率為1.5-2Hz，疏密波，電壓9V，電流強度1-3mA，留針20min，1日1次，連續(xù)2

4、8天。用比色法測定肝臟勻漿丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、甘油三酯(TC)、總膽固醇(TG)等的含量;酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清視黃醇結合蛋白4(RBP4)的含量;免疫組化法(SP)肝組織Fas、FasL、細胞角蛋白18(CK18)等蛋白的表達情況;用實時熒光定量法(RT-PCR)測定半胱氨酸蛋白酶8（Caspase-8）蛋白的表達水平并用蛋白免疫印跡法(WB)測定過氧化物酶體增殖激活物受體-α

5、(PPAR-α)、固醇調節(jié)元件結合蛋白-1c（SREBP-1c）、肝X受體-α(LXR-α)等蛋白表達水平。
　　結果:
　　對肝功能的影響:與正常組比較，模型組大鼠體重增加，精神萎靡，活動較少，肝臟顏色發(fā)黃變淡，有油膩感。模型組大鼠肝臟勻漿SOD、GSH含量明顯降低(P＜0.01)，MDA、TC、TG含量明顯增加(P＜0.01);與模型組比較，電針組、東寶肝泰組大鼠肝臟勻漿SOD、GSH含量增加(P＜0.01)，MDA、T

6、C、TG含量明顯降低(P＜0.01);電針組療效優(yōu)于東寶肝泰組(p＜0.01或p＜0.05)。提示電針刺激“肝俞”、“脾俞”、“膈俞”對非酒精性脂肪肝大鼠肝功能有改善作用。
　　對肝臟脂質代謝的影響:與正常組比較，模型組大鼠血清RBP4含量明顯增加(P＜0.01)，肝組織PPARα蛋白表達明顯降低(P＜0.01)，LXR-α和SREBP-1c蛋白表達水平增高(P＜0.01);與模型組比較，電針組、東寶肝泰組大鼠血清RBP4含量降低

7、，肝組織PPARα蛋白表達明顯升高(P＜0.01)，LXR-α和SREBP-1c蛋白表達水平降低(P＜0.01或P＜0.05)，電針組優(yōu)于東寶肝泰組。提示電針、東寶肝泰對改善非酒精性脂肪肝大鼠脂肪酸及膽固醇代謝有促進作用，電針優(yōu)于東寶肝泰。
　　對肝組織損傷的修復作用:與正常組相比，模型組大鼠肝組織Fas、FasL表達量增加(P＜0.05)，caspase-8RNA相對表達量降低(P＜0.05);與模型組相比，電針組、東寶肝泰組大