左乙拉西坦與替莫唑胺聯(lián)合用藥對腦膠質瘤細胞耐藥的影響.pdf

1、目的:為了尋找有效的治療腦膠質瘤的新方法，在原來的治療方法的基礎上做了進一步的研究。替莫唑胺(TMZ)是已知的治療腦部腫瘤的首選藥，但有耐藥作用。有文獻表明左乙拉西坦(LEV)可能對膠質瘤MGMT基因有抑制作用。本文主要研究左乙拉西坦本身對膠質瘤的生長是否有抑制作用，聯(lián)合給藥后兩種藥物的結合對膠質瘤的治療是否有協(xié)同作用。
　　方法:購買人腦膠質瘤U87細胞，先進行細胞的傳代培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中，先分出一部分細胞，用左乙拉西坦給藥培養(yǎng)，

2、先分為對照組和左乙拉西坦藥物組，分別測定對照組和左乙拉西坦藥物組的細胞增殖曲線圖。繼續(xù)培養(yǎng)膠質瘤細胞，當細胞總量達到所需量時，對培養(yǎng)好的細胞進行分組，對膠質瘤細胞進行給藥培養(yǎng)，并分為左乙拉西坦(LEV)藥物組、替莫唑胺(TMZ)藥物組、替莫唑胺和左乙拉西坦聯(lián)合用藥(LEV+TMZ)藥物組和對照組（未給藥），分別給幾種藥物組內的細胞加入等體積的相應的藥物進行培養(yǎng)，空白組加入等量的生理鹽水，分別在給藥后24h、48h、72h、96h四個時間

3、點觀察各組內膠質瘤細胞的形態(tài)變化和增殖情況;用免疫組織化學法檢測LEV藥物組、TMZ藥物組、LEV+TMZ藥物組和對照組在以上時間點細胞中ki-67、VEGF和MGMT蛋白的表達。
　　結果:細胞的增殖曲線表明，左乙拉西坦給藥后細胞的吸光值相對對照組較低，說明左乙拉西坦組的膠質瘤細胞數量較少，左乙拉西坦對膠質瘤的生長有抑制作用。
　　免疫組織化學檢測結果:用免疫組化的圖片測定光密度，用得出的光密度數值計算出每組圖片的IOD值

4、，三種指標的檢測結果幾乎一致，LEV給藥后，隨著時間的增加，膠質瘤細胞的IOD值逐漸降低，說明膠質瘤細胞的數量逐漸減少，左乙拉西坦對膠質瘤的生長有一定的抑制作用;TMZ給藥組細胞在72h時之前，細胞的IOD值逐漸降低，與對照組差異極顯著，但是在96h時細胞的IOD值開始回升，說明膠質瘤細胞的數量開始增加，說明細胞對替莫唑胺的敏感性降低，開始出現(xiàn)耐藥現(xiàn)象;LEV+TMZ藥物組的細胞，隨著時間的推移，IOD值逐漸降低，且幅度較大，與對照組之

5、間差異極顯著，說明膠質瘤細胞對聯(lián)合用藥組有明顯的敏感性，明顯的減少了膠質瘤細胞的數量，起到了較好的治療作用。
　　結論:通過增殖曲線說明左乙拉西坦對膠質瘤的生長有一定的抑制作用。
　　免疫組化檢測結果表明，替莫唑胺在一定時間內對可以抑制膠質瘤的生長，有較好的治療效果，但是隨著時間的推移，膠質瘤的數量又開始增加，說明替莫唑胺在治療膠質瘤的過程中確實出現(xiàn)了耐藥現(xiàn)象。
　　而替莫唑胺和左乙拉西坦聯(lián)合用藥組的細胞在實驗期間細胞