NAMPT抑制劑FK866增加替莫唑胺在膠質(zhì)瘤治療中藥物敏感性的研究.pdf

1、背景：
　　神經(jīng)膠質(zhì)瘤是一種原發(fā)腦瘤，具有高發(fā)病率和預(yù)后差等特點。替莫唑胺(TMZ)是目前術(shù)后治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤患者的一線化療藥物。然而，腫瘤細胞對TMZ的細胞毒性產(chǎn)生抵抗目前被認為是化療失敗的主要原因之一。臨床研究表明，升高修復(fù)蛋白O6-甲基鳥嘌呤-DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(MGMT)表達和較低的MGMT啟動子甲基化與TMZ耐藥性密切有關(guān)。最近，據(jù)報道，F(xiàn)K866作為煙酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶NAMPT(煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)補救合成途徑

2、的限速酶）一個強有力的酶活性抑制劑在幾個癌癥類型的腫瘤的發(fā)生、轉(zhuǎn)移和化療敏感性中扮演了一個重要的角色，但是在神經(jīng)膠質(zhì)瘤中關(guān)于NAMPT的研究尚少，F(xiàn)K866在神經(jīng)膠質(zhì)瘤治療中對化療敏感性的影響尚不清楚。
　　目的：
　　探究NAMPT在神經(jīng)膠質(zhì)瘤中表達及其對患者預(yù)后的影響;NAMPT抑制劑FK866在神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系的作用;FK866與神經(jīng)膠質(zhì)瘤化療一線藥物TMZ合用對化療敏感性的影響。從而為臨床治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤開拓新的視野。

3、
　　方法：
　　首先利用臨床數(shù)據(jù)分析評估NAMPT在神經(jīng)膠質(zhì)瘤中的表達高低及其對預(yù)后的影響，進而在實驗室進行驗證。臨床數(shù)據(jù)分析基于中國神經(jīng)膠質(zhì)瘤基因圖譜(CGGA)及美國的癌癥和腫瘤基因圖譜(TCGA)臨床數(shù)據(jù)進行總結(jié)、歸納;進而在細胞系中采用多種實驗方法進行驗證:通過MTS法檢測藥物合用對細胞活性的影響;細胞劃痕實驗法粗略檢測其對細胞遷移能力的影響;流式細胞學(xué)對其細胞周期及凋亡進行檢測;TUNEL法檢測細胞凋亡;蛋白免疫

4、印跡法(Western blot)對凋亡、增殖等相關(guān)蛋白進行檢測。
　　結(jié)果：
　　1.NAMPT在神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞中高表達，并隨著級別的升高而增加。
　　2.在各個神經(jīng)膠質(zhì)瘤級別(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)中NAMPT低表達預(yù)后好;高表達預(yù)后差。
　　3.在Ⅳ級神經(jīng)膠質(zhì)瘤患者中MGMT高甲基化預(yù)后好，低甲基化預(yù)后差;MGMT高、低甲基化組都提示NAMPT低表達預(yù)后好;高表達預(yù)后差。
　　4.術(shù)后放療和化療組同樣提示NAM

5、PT低表達預(yù)后好;高表達預(yù)后差。
　　5.FK866與TMZ合用能明顯抑制膠質(zhì)瘤細胞的增殖、遷移，促進細胞的凋亡。
　　結(jié)論：
　　1.高級別(Ⅲ、Ⅳ)的神經(jīng)膠質(zhì)瘤NAMPT表達顯著增高。
　　2.NAMPT水平像MGMT甲基化水平一樣可作為預(yù)測患者預(yù)后指標。
　　3.FK866可以顯著增加TMZ誘導(dǎo)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞死亡的作用。
　　4.FK866和TMZ聯(lián)合應(yīng)用在神經(jīng)膠質(zhì)瘤治療中可以通過降低MGMT表