酶催化交聯(lián)的透明質酸水凝膠的合成及其藥物控釋應用.pdf

1、近年來，酶催化交聯(lián)制備水凝膠受到人們廣泛關注。酶作為生物催化劑催化交聯(lián)制備水凝膠具有以下優(yōu)勢：反應條件溫和、酶具有獨特的化學選擇性、可避免有毒交聯(lián)劑的使用。辣根過氧化酶（HRP）經雙氧水（H2O2）活化后能夠高效催化苯酚和苯胺類衍生物自由基耦合，以HRP為酶介導的催化體系已成功應用于高效制備水凝膠，然而直接添加H2O2可能會導致HRP催化活性降低或影響封裝藥物的生理活性。本論文以巰基接枝改性的透明質酸（HA-SH）為原料，利用HRP為酶

2、介導的催化體系，以酪胺作為酶催化底物，在無需添加H2O2的條件下，酶催化交聯(lián)巰基，分別制備了具有還原響應性的二硫鍵交聯(lián)的HA水凝膠和微凝膠，并將微凝膠包埋在HA水凝膠內部制備了復合凝膠，并系統(tǒng)研究了HA水凝膠、微凝膠和復合凝膠的藥物控釋性能。
　　本論文第一部分分別用 HRP/酪胺酶催化體系和 HRP/H2O2酶催化體系制備了HA-SH和HA-Tyr水凝膠，并研究了這兩種催化體系的酶催化效率。實驗結果表明可以通過單獨改變HRP和酪

3、胺的濃度來調控凝膠化速率，并且在20 min左右能夠快速凝膠化，體系在不外加H2O2的條件下，幾乎和HRP/H2O2催化體系的催化效率相當。水凝膠降解實驗結果表明，這種二硫鍵交聯(lián)的水凝膠在還原性介質下能夠快速降解，并能通過改變還原性介質濃度（L-半胱氨酸）來控制降解速率。水凝膠溶脹實驗結果表明，隨著HA-SH濃度的增大，水凝膠的平衡溶脹率越小，并且溶脹性能不隨HRP和酪胺濃度的改變而發(fā)生變化。流變學分析表明，HA-SH水凝膠具有很好的穩(wěn)

4、定性以及具有完善的彈性網絡結構，隨著HA-SH濃度從1％增加至3%，水凝膠的儲能模量（G′）從64 Pa增大至220 Pa。以熒光標記的葡聚糖（FITC-Dextran）為模型藥物進行藥物釋放實驗，結果表明：HA-SH濃度和藥物分子量的增大都能夠有效減弱藥物釋放的突釋效應，并延長藥物釋放時間。綜上所述，這種凝膠化可控以及降解可控的水凝膠是一種很有應用前景的藥物緩釋材料。
　　本論文第二部分通過反相乳液法以 HRP/酪胺催化體系催化

5、 HA-SH交聯(lián)制備了HA-SH微凝膠，并將HA-SH微凝膠分別包埋在HA-SH、HA-Tyr宏觀水凝膠網絡結構中，制備了雙重載藥復合凝膠。并通過粒度分析（LSPSA）以及掃描電鏡（SEM）可以看出此反相乳液酶催化法制備的微凝膠大小分布均勻，尺寸約為10μm，并均勻分散在宏觀水凝膠的網絡結構中。流變學分析表明，復合凝膠具有更高的儲能模量，當HA-SH和HA-Tyr水凝膠內部填充0.2%（g/mL）的微凝膠后，儲能模量分別從63 Pa、3