基于膠體金、量子點的β-興奮劑多殘留免疫層析試紙條研制.pdf

1、β-興奮劑（β-agonist）是一類化學結構和生理功能類似于去腎上腺素和腎上腺素的苯乙胺類藥物。β-興奮劑在臨床上常用于防治人、畜的支氣管痙攣和哮喘等病癥。大劑量的β-興奮劑能影響營養(yǎng)物質在動物體內的重新分配，顯著提高瘦肉率。因此，β-興奮劑曾被作為飼料添加劑廣泛用于畜牧生產中。β-興奮劑在動物內臟蓄積嚴重，能通過食物鏈進入人體，使人出現心悸、頭暈、心律失常等癥狀，嚴重時甚至會導致死亡。因此，β-興奮劑的檢測一直是食品安全的重點問題。

2、
　　目前，針對β-興奮劑多殘留檢測主要是GC/MS、HPLC-MS等儀器方法和ELISA免疫分析方法，還未有β-興奮劑多殘留免疫層析技術的研究報道。本文以β-興奮劑為研究對象，結合納米材料技術，應用于免疫層析技術中，建立了β-興奮劑多殘留免疫層析試紙條定量檢測方法，并對建立的檢測方法的性能指標進行評價。主要的研究內容及結果如下：
　?。?）采用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金溶液，并與β-興奮劑單克隆抗體進行偶聯，形成金標抗體復

3、合物，建立了β-興奮劑多殘留的GICA檢測技術，本方法對克倫特羅（CL）檢測線性范圍（IC20-IC80）為0.26~5.70μg/L，IC50為1.23μg/L，檢出限（LOD，IC10）為0.11μg/L，單個樣品檢測時間只需8 min；沙丁胺醇、馬布特羅、溴布特羅、氯丙那林、西馬特羅對克倫特羅都有交叉率，能實現β-興奮劑的多殘留檢測。對陰性豬尿的加標回收實驗中，試紙條檢測回收率在83.6％~102.19%之間，對陰性豬肉的加標回收

4、實驗中，試紙條檢測回收率在64.27%~87.98%之間，且批內批間的相對標準偏差均在15%以內，與ELISA、HPLC-MS法的對比試驗表明，該試紙條能應用于實際樣品中β-興奮劑多殘留的定量檢測。
　?。?）以CdTe/ZnS量子點為標記材料，采用EDC/NHS法將羧基化量子點與β-興奮劑單克隆抗體進行偶聯，形成QDs-mAbs熒光復合物。通過棋盤滴定法和單因素實驗確定最佳的實驗參數，建立了β-興奮劑多殘留的FICA檢測技術。結

5、果表明，本方法對克倫特羅（CL）檢測線性范圍（IC20-IC80）為0.14~2.28μg/L，IC50為0.56μg/L，檢出限（LOD，IC10）為0.06μg/L，單個樣品檢測時間只需10 min；沙丁胺醇、馬布特羅、溴布特羅、氯丙那林、西馬特羅對克倫特羅都有交叉率，能實現β-興奮劑的多殘留檢測。對陰性豬尿的加標回收實驗中，試紙條檢測回收率在80.4%~103.7%之間；對陰性豬肉的加標回收實驗中，試紙條檢測回收率在68.67%~