900MHz微波輻射對雄性大鼠血漿激素水平和睪丸組織的時間毒性.pdf

1、目的：以具有晝夜節(jié)律的大鼠為生物模型，研究不同時點900MHz微波輻射對大鼠生殖系統(tǒng)的影響，包括：（1）不同時點900MHz微波輻射對血漿激素水平晝夜節(jié)律變化的影響；（2）不同時點900MHz微波輻射對睪丸組織活性氧水平、抗氧化酶活性和組織形態(tài)的影響。通過分析不同時點微波輻射對血漿激素晝夜節(jié)律及睪丸組織形態(tài)和功能的不同影響，研究機體對微波輻射的敏感時間窗，初步探討其可能的機理，為進一步了解移動通訊微波輻射的生物效應和健康影響提供實驗資料

2、。
　　方法：（1）動物的篩選和分組：清潔級SD雄性大鼠，在光暗周期為12h:12h的光制（光照時間為9AM到9PM）下飼養(yǎng)30d培養(yǎng)晝夜節(jié)律，光照強度為250~350Lux，隨后利用自發(fā)活動視頻分析系統(tǒng)對動物進行24h自發(fā)活動觀測，以平均速度為觀測指標。數(shù)據(jù)經余弦分析軟件獲取節(jié)律性參數(shù)并擬合為相位響應曲線（phase response curves, PRCs)，對振幅作F檢驗，確定是否存在晝夜節(jié)律性。再將有自發(fā)活動晝夜節(jié)律的大

3、鼠每隔4h采血一次，共6次。ELISA法測血漿褪黑素水平，利用單余弦分析軟件對褪黑素水平進行余弦擬合，篩選血漿褪黑素水平具有明顯晝夜節(jié)律的大鼠，按完全隨機設計將動物分為對照組和輻照組2個大組，每個大組又分為2:00AM、6:00AM、10:00AM、2:00PM、6:00PM和10:00PM共6個時點組。
　　（2）微波輻照：輻照各組在相應時點（2:00AM、6:00AM、10:00AM、2:00PM、6:00PM和10:00PM

4、）接受2000μw/cm2900MHz微波輻射，1h/d，連續(xù)30d。對照組各組在相應時點（2:00AM、6:00AM、10:00AM、2:00PM、6:00PM和10:00PM）放入GTEM室，但不接受輻射，1h/d，連續(xù)30d，即為假暴露。
　?。?）節(jié)律參數(shù)獲?。狠椪涨安杉园l(fā)活動的平均速度；輻照后每只大鼠每隔4h尾靜脈取血，ELISA法測定血漿褪黑素、睪酮和雌二醇水平；利用余弦節(jié)律軟件，根據(jù)方程式 F(t)=M+Acos(

5、ωt+Φ)將各指標數(shù)據(jù)擬合為相位響應曲線，得出中值（Mesor, M）、振幅（Amplitude, A）以及峰相位時相（period,Φ）三個余弦參數(shù)，分析余弦參數(shù)的變化。
　?。?）酶活性檢測和組織形態(tài)觀察：輻照后每只大鼠取一側睪丸均漿，利用試劑盒檢測ROS水平和SOD、CAT、GSH-Px酶活性；收集另一側睪丸組織，切片，進行病理觀察。
　　結果：1.血漿激素水平晝夜節(jié)律性變化：（1）對照組、輻照組血漿褪黑素和睪酮水平在

6、微波輻照前后均顯示出明顯的晝夜節(jié)律（節(jié)律參數(shù)振幅A經F檢驗， P<0.05）。（2）與對照組相比，不同時點輻照組血漿褪黑素和睪酮水平晝夜節(jié)律發(fā)生了改變，但各輻照組依然具有晝夜節(jié)律（A作F檢驗均有P<0.05）。（3）與對照組相比，2:00AM微波輻照組褪黑素水平晝夜節(jié)律峰值時點延遲9.37h，與其它5個暴露時點相比，其峰值時點變化最大；2:00PM微波輻照組褪黑素水平晝夜節(jié)律峰值時點延遲0.93h，與其它5個暴露時點相比，變化最小。（4

7、）與對照組相比，6:00PM輻照組睪酮水平晝夜節(jié)律峰值時點延遲11.98h，與其它5個暴露時點相比，變化最大；10:00AM微波輻照組睪酮水平晝夜節(jié)律峰值時點延遲3.01h，與其它5個暴露時點相比，變化最小。
　　2.微波輻照對睪丸組織酶活力和組織形態(tài)的影響:（1）與對照組相比，2:00PM微波輻射后ROS水平差異無統(tǒng)計學意義，10:00AM、6:00PM和10:00PM微波輻照后ROS水平升高（P<0.01）；（2）與對照組相比

8、，各時點輻照后SOD活性均明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.001）。（3）與對照組相比，各時點輻照后 CAT活性均降低，且在6:00AM、10:00 AM、6:00 PM和10:00 PM降低較為明顯（P<0.001）。（4）不同時點微波輻射引起睪丸組織結構改變不同，10:00AM組和6:00AM組改變明顯，出現(xiàn)細胞排列紊亂、部分細胞退化現(xiàn)象，2:00PM組改變最小。
　　結論：(1)2000μw/cm2900MHz微波輻射對