應用加壓毛細管電色譜技術檢測雞蛋中農(nóng)獸藥殘留的研究.pdf

1、目前，全球食品安全形勢不容樂觀，在我國由于農(nóng)藥、獸藥、食品添加劑、生長調(diào)節(jié)劑等農(nóng)用化學品的大量或不合理使用，導致了一些毒性作用廣泛、對健康危害大的食源性化學殘留污染，尤其是以獸藥和農(nóng)藥殘留污染較為嚴重。因此，加強農(nóng)藥殘留監(jiān)測和環(huán)境毒理研究，對于合理開發(fā)和正確使用農(nóng)藥，保護人類健康和生態(tài)環(huán)境，將具有重要的理論和現(xiàn)實意義。在本研究中，以加壓毛細管電色譜技術為檢測平臺，通過使用不同的生物樣品前處理方式、不同類型的色譜固定相（C18柱、整體柱）

2、以及不同檢測器（UV、LIF）建立了加壓毛細管電色譜對氨基甲酸酯類、四環(huán)素、磺胺、雌激素等四類農(nóng)獸藥的新型檢測方法。
　　論文的主要內(nèi)容包括五部分：
　　第一章，綜述了我國目前農(nóng)藥使用以及殘留情況。通過介紹目前我國農(nóng)藥使用情況、農(nóng)藥殘留情況，說明了我國農(nóng)藥殘留檢測的重要性和必要性。同時介紹了目前農(nóng)獸藥殘留檢測的主要技術，比較了這些檢測技術的優(yōu)缺點。并詳細介紹了毛細管電色譜（Capillary electrochromatog

3、raphy, CEC）和加壓毛細管電色譜(Pressurized capillary electrochromatography, pCEC)技術的原理、特點和在農(nóng)藥殘留檢測中的應用前景等。
　　第二章，建立了加壓毛細管電色譜法（pCEC）測定雞蛋中四種氨基甲酸酯類藥品殘留的方法。通過優(yōu)化流動相中有機相的比例、鹽濃度和外加電壓，在最佳試驗條件下，4種氨基甲酸酯藥品在15 min內(nèi)全部基線分離。經(jīng)方法學考察，4種氨基甲酸酯藥品遞滅威

4、4～20μg/mL、速滅威2.5～20μg/mL、呋喃丹2.5～20μg/mL、西維因1～20μg/mL濃度范圍內(nèi)線性關系良好(R2>0.990)，檢出限分為遞滅威4μg/mL、速滅威2.5μg/mL、呋喃丹2.5μg/mL、西維因1μg/mL，回收率為86.95-104.20％，回收率相對標準偏差（RSD）為1.62-9.91%。本研究建立的方法簡單方便，回收率較高，具有良好的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性，能夠?qū)崿F(xiàn)對多種氨基甲酸酯類藥品的同時分離檢

5、測。
　　第三章，首次使用加壓毛細管電色譜技術(pCEC)建立了雞蛋樣品中四環(huán)素類農(nóng)藥多殘留同時檢測的分析方法。對樣品前處理和色譜分析條件進行了優(yōu)化，以甲醇-乙腈-20 mmol/L草酸溶液（pH=2.5）（10：20：70，v/v/v）為流動相，等度洗脫，通過加壓毛細管電色譜法進行快速檢測。經(jīng)方法學考察，4種四環(huán)素類藥品土霉素、4-差向金霉素、鹽酸金霉素、強力霉素在各自標準曲線濃度范圍內(nèi)線性良好，R2均在0.993以上，回收率為

6、80.46%-100.49%，回收率相對標準偏差（RSD）為1.24%-13.81%。通過等度洗脫25 min內(nèi)可以同時測定雞蛋中4種四環(huán)素類農(nóng)藥的殘留，較國標中所使用HPLC法梯度洗脫檢測，對儀器的要求較低，適合廣大實驗室推廣使用。且生物樣品的前處理方法簡單方便，回收率高，準確可靠。
　　第四章，應用新型親水性CEC整體柱，建立了加壓毛細管電色譜（pCEC）技術測定雞蛋中四種磺胺藥品殘留的新方法。以二氯甲烷提取樣品，流動相為乙腈

7、-30 mmol/L甲酸銨緩沖溶液（pH=4.5）（35：65，v/v），電壓為-10 kV時，4種磺胺類藥品在15 min內(nèi)全部得到基線分離。且在各自合適的濃度范圍內(nèi)線性關系良好（R2>0.990)。同時在本研究發(fā)現(xiàn)該親水性強陽離子交換整體柱在流動相中乙腈含量低于50%時，可顯示反相色譜分離機理，但柱效、分離度均比常規(guī)反相柱具有明顯優(yōu)勢。本研究拓展了新型親水性CEC整體柱的使用領域，為磺胺類農(nóng)藥殘留提供了新的方法平臺。
　　第五

8、章，建立了加壓毛細管電色譜（pCEC）技術測定雞蛋中三種雌激素類藥物殘留的方法。生物樣品通過固相萃取后，回收率較高，3種雌激素類藥品在25 min內(nèi)全部得到基線分離。且在各自合適的濃度范圍內(nèi)線性關系良好（R2>0.990)。
　　第六章，建立了加壓毛細管電色譜（pCEC）技術聯(lián)用激光誘導熒光檢測器（LIF）測定雞蛋中四種磺胺藥品殘留的新方法。利用磺胺類藥物結構中的芳伯胺基與熒光素異硫氰酸素（Flourescein iso-thio