利用玉米芯同步糖化發(fā)酵產2,3-丁二醇的研究.pdf

1、2，3-丁二醇是一種重要的平臺化工產品，廣泛應用于化工、食品、燃料等領域。本文選擇了KlebsiellaoxytocaZU-03為菌株，以廉價的植物纖維廢棄物玉米芯為原料，采用同步糖化發(fā)酵(SSF)技術生產2，3-丁二醇，并對2，3-丁二醇的提取工藝進行了探索性研究。
　　為了優(yōu)化SSF工藝，對纖維素酶用量、纖維二糖酶用量、木聚糖酶用量、pH、溫度和底物濃度等對2，3-丁二醇形成的影響進行了研究，試驗結果表明:在SSF工藝中，每克

2、底物（玉米芯）的酶用量為:纖維素酶25FPIU、纖維二糖酶15IU、木聚糖酶300IU;玉米芯SSF的適宜溫度為36℃，pH6.0。當底物濃度為120g/L，同步糖化發(fā)酵36h，2，3-丁二醇的質量濃度可達46.03g/L，產率為1.28g/(Lh)，轉化率為0.424g/g（總糖）。
　　采用分批補料技術，可以提高發(fā)酵液中2，3-丁二醇的濃度，降低提取成本。研究了補料時間、補料量以及玉米芯與玉米漿粉的補加比例等對SSF過程的影響

3、，確立了適宜的分批補料工藝:自接種后12h起，每隔12h補一次料，每次補料量為15g/L，補加玉米芯與玉米漿粉的適宜比例為10:2。按照此工藝底物初始濃度為100g/L，補加到底物總濃度為250g/L時，同步糖化發(fā)酵144h，2，3-丁二醇的濃度可達75.65g/L。與分批SSF工藝相比，每克底物的酶制劑用量減少了60％。
　　發(fā)酵液經FeCl3絮凝處理、固液分離后，采用檸檬酸鈉/乙醇雙水相體系進行分離提取?？疾炝藱幟仕徕c質量分數

4、、乙醇質量分數和溫度對2，3-丁二醇回收率的影響。在單因素試驗的基礎上，采用了響應面分析對雙水相體系分離2，3-丁二醇的條件進行了優(yōu)化，選用檸檬酸鈉質量分數、乙醇質量分數和溫度3個因素進行Box-Benhnken中心組合試驗設計，對試驗結果進行了響應面分析，得出適宜的工藝條件為:檸檬酸鈉質量分數為21％，乙醇質量分數為25％，溫度為38℃。在此條件下，2，3-丁二醇的回收率為91.8％。發(fā)酵液經過絮凝和雙水相萃取之后，蛋白去除率為90.