直接發(fā)酵法生產(chǎn)L-色氨酸的研究.pdf

1、本文以谷氨酸棒桿菌FC22為出發(fā)菌株，對(duì)直接發(fā)酵法生產(chǎn)L-色氨酸進(jìn)行了研究。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下： 1.采用對(duì)二甲氨基苯甲醛比色法對(duì)發(fā)酵液中的L.色氨酸含量進(jìn)行了定量分析。對(duì)比色法中影響L-色氨酸含量測(cè)定的因素進(jìn)行了研究，并用單因素試驗(yàn)優(yōu)化了實(shí)驗(yàn)條件，得出了對(duì)二甲氨基苯甲醛比色法測(cè)定L-色氨酸含量的最佳檢測(cè)條件，從而建立了快速測(cè)定發(fā)酵液中L-色氨酸含量的方法。在最佳檢測(cè)條件下，L-色氨酸含量在0～150 mg/L濃度范圍內(nèi)線性

2、關(guān)系良好，回歸方程為A593nm=0.0053C-0.0007，相關(guān)系數(shù)為R2=0.9975，回收率為98.5％-99.0％。 2.對(duì)出發(fā)菌株谷氨酸棒狀桿菌(Corynebacterium glutamicum)FC22的形態(tài)特征和生理特性進(jìn)行初步鑒定和分析，對(duì)該菌株的發(fā)酵培養(yǎng)基配方及發(fā)酵條件進(jìn)行研究，確定了發(fā)酵過(guò)程中影響L-色氨酸積累的主要因素，從而為誘變育種的篩選工作做了準(zhǔn)備。 3.以谷氨酸棒狀桿菌FC22(Phe-

3、+Tyr'+5MTR)為出發(fā)菌株，經(jīng)紫外線(UV)、硫酸二乙酯(DES)逐級(jí)誘變處理，并采用磺胺胍(SG)、肉桂酸(CIN)作為抗性藥物，通過(guò)搖瓶初篩和復(fù)篩、單菌落分純以及連續(xù)傳代試驗(yàn)測(cè)定，定向選育出一株遺傳性狀穩(wěn)定的L-色氨酸高產(chǎn)菌株FC1013(Phe-+Tyr+5MTR+SGR+CINR)，在未經(jīng)優(yōu)化的發(fā)酵條件下?lián)u瓶培養(yǎng)3天，平均可積累L-色氨酸8.91 g/L，比出發(fā)菌株FC22產(chǎn)量提高了120％。 4.研究了菌株FC1