RGD三肽的合成與縮合劑的回收.pdf

1、本文的目的是對(duì)RGD三肽的合成工藝和路線(xiàn)進(jìn)行了探討,研究了液相化學(xué)法(DCC法、混合酸酐法等)合成GD二肽、RGD三肽的工藝,從而為RGD三肽的規(guī)?；苽涮峁├碚摶A(chǔ)和必要的技術(shù)數(shù)據(jù).同時(shí)首次開(kāi)展了循環(huán)使用多肽縮和劑的研究,以期降低多肽合成的成本.本文以DCC法、混合酸酐法分別合成了RGD三肽前體二肽和全保護(hù)三肽,最后脫去保護(hù)基得到RGD.研究了多種因素包括反應(yīng)時(shí)間、溶劑種類(lèi)、底物配比等對(duì)化學(xué)合成RGD序列肽的影響.本文對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行了

2、理論分析,并做出了相對(duì)合理的解釋,最終得到了如下結(jié)論:(1)四氫呋喃(THF)和N,N-二甲基甲酰胺(DMF)為化學(xué)法合成RGD前體二肽及全保護(hù)三肽的最佳溶劑.(2)DCC法和混合酸酐法都得到了Boc-Gly-Asp-(oBzl)<,2>中間體,為了進(jìn)一步合成三肽,必須先脫去Boc基,用無(wú)水HCl/EtoAc溶液和TFA兩種方法,都能很好地脫去Boc基,但用HCl/EtoAc溶液可以得到HClGly-Asp-(oBzl)<,2>晶體,便

3、于重結(jié)晶純化,而用TFA得不到晶體,所以我們選擇HCl/EtoAc溶液作為脫Boc試劑.(3)以四氫呋喃(THF)、二甲基甲酰胺(DMF)為溶劑,DCC法合成全保護(hù)三肽Boc-Arg(NO<,2>)-Gly-Asp-(oBzl)<,2>,,得率76.1﹪.,為避免損失,直接由該三肽油狀物脫N端保護(hù)基,采用TFA為切割劑,室溫切割3h,最大得率70.1﹪(以Boc-Arg(NO<,2>)-OH計(jì)算).(4)以脫除N端保護(hù)的三肽為前體,采用

4、Pd/C催化加氫脫除所有側(cè)鏈保護(hù)基團(tuán),得到RGD粗品,得率97.4﹪.(5)首次對(duì)常用的多肽縮合劑DCC/HOBt進(jìn)行回收循環(huán)使用的研究,對(duì)后處理液加以酸化處理,回收得到HOBt,回收率75.4﹪;對(duì)反應(yīng)中生成的DCU加以脫水處理,采用三氯氧磷作為脫水劑,得到DCC,得率64﹪.(6)對(duì)RGD的合成進(jìn)行了成本核算,按照生產(chǎn)1kgRGD計(jì)算,通過(guò)回收縮合劑及合成部分保護(hù)氨基酸,大大降低了RGD的生產(chǎn)成本,從35559.65元/kg降為14