RECQ1解旋酶在人腦膠質瘤中的表達及意義.pdf

1、目的:
　　 人腦膠質細胞瘤是原發(fā)生神經外胚層的腫瘤。據統(tǒng)計，我國人腦膠質細胞瘤發(fā)病率為3-6/10萬人/年，年死亡人數可達3萬人。其中以星形細胞瘤最為常見，其次為多形性膠質母細胞瘤。膠質瘤的發(fā)生性別以男性多見，特別是多形性膠質母細胞瘤，并且多形性膠質母細胞瘤多見于中年人群。基于諸多醫(yī)學難題及社會問題膠質瘤尤其是多形性膠質母細胞瘤的治療與研究備受各界關注。Ki-67作為一級證據，是判斷腫瘤預后的重要指標，是最廣泛的增殖細胞標記。

2、p53是一種腫瘤抑制基因，已成為判斷膠質瘤級別的二級證據，另有研究顯示，其調控RecQ解旋酶(BLM和WRN)的功能。
　　 RecQ1解旋酶在保持基因組穩(wěn)定性方面具有重要作用，在人類，RecQ1解旋酶與易患腫瘤及早期衰老密切相關。目前證據表明，RecQ1解旋酶缺失能夠導致小鼠腫瘤細胞有絲分裂發(fā)生突變，產生抑制腫瘤生長的功能。本實驗意在觀察人腦膠質細胞瘤和正常腦組織的RecQ1解旋酶在不同級別膠質瘤中表達和在正常對照組織中表達差

3、異，同時觀察RecQ1解旋酶在人腦膠質細胞瘤中的表達與p53、Ki-67的相關性，以此來判斷RecQ1是否可作成為人腦膠質瘤惡性程度及預后指標，并為膠質瘤的基因治療提供可行性理論基礎。
　　 方法:
　　 選擇2012年1月至2013年1月期間，在河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院神經外科住院治療的腦膠質細胞瘤患者64例（以WHO分級為標準，將第1、Ⅱ級膠質瘤歸為低級別組，第Ⅲ、Ⅳ級膠質瘤歸為高級別組），本實驗含低級別膠質瘤23例，高

4、級別膠質瘤含41例，并選擇健康成年人（外傷或其他病因所致腦膨出病人術中所取腦組織），11例作為對照組。術中取瘤，福爾馬林常規(guī)固定并妥善保存。統(tǒng)一采用免疫組化法（均在同一實驗室，同樣的實驗條件下進行），驗查所取腫瘤組織RecQ1解旋酶及p53、Ki-67表達情況，并與健康腦組織組做對比。
　　 數據獲得和統(tǒng)計方法:各染色標本分別在高倍鏡下(×400)取5個視野，數陽性染色細胞數（細胞核著棕黃色），求平均數為該標本所得結果。用SPS

5、S16.0版軟件分析數據，資料用均數±標準差（x±s）記錄，采用Kruskal-Wallis秩和及t檢驗，相關性檢驗應用pearson線性相關性檢驗。
　　 結果:
　　 1、RecQ1與膠質瘤發(fā)生與級別間的關系
　　 本實驗設有11例正常腦組織作為正常對照組，在正常對照組中的RecQ1表達結果為1.73±1.27;腦膠質瘤組(64例)，分別為低級別組(23例)表達結果為26.57±7.99，高級別組(41例)結

6、果為41.61±8.00，三組樣本符合正態(tài)分布，但方差不齊，使用Kruskal-Wallis秩和檢驗:正常對照組平均秩次為6.00;低級別膠質瘤組平均秩次為28.85;高級別膠質瘤組平均秩次為52.84。Chi-square統(tǒng)計量為48.79，P＜0.05。同時使用t檢驗(a=0.05)分析低級別膠質瘤與高級別膠質瘤RecQ1表達結果顯示:統(tǒng)計結果分別為26.57±7.99和41.61±7.99，t=-2.726，P＜0.05。

7、　　 2、P53與膠質瘤發(fā)生及級別間的關系
　　 實驗設11例正常腦組織，在該組中的p53表達值為2.09±1.22;設立腦膠質瘤組（64例），分為低級別組23例結果為22.57±8.03，高級別組41例結果為29.07±5.80，三樣本方差不齊，使用Kruskal-Wallis秩和檢驗:正常對照組平均秩次為6.00;低級別膠質瘤組平均秩次為33.70;高級別膠質瘤組平均秩次為49.00。Chi-square統(tǒng)計量為35.20

8、，P＜0.05。同時使用t檢驗(a=0.05)分析低級別膠質瘤與高級別膠質瘤p53表達結果顯示:分別為22.57±8.03和29.07±5.80，t=-3.741，P＜0.05。
　　 3、Ki-67與膠質瘤及級別間的關系
　　 實驗設11例正常腦組織，在該組中的ki-67表達值為3.27±2.53;設立腦膠質瘤組(64例)，分為低級別組23例結果為14.30±6.30，高級別組41例結果為74.24±8.90，三樣本方

9、差不齊，使用Kruskal-Wallis秩和檢驗:正常對照組平均秩次為6.68;低級別膠質瘤組平均秩次為22.67;高級別膠質瘤組平均秩次為55.00。Chi-square統(tǒng)計量為59.08，P＜0.05。同時使用t檢驗（a=0.05）分析低級別膠質瘤與高級別膠質瘤ki-67表達結果顯示:分別為14.30±6.30和74.24±8.90，t=-28.48，P＜0.05。
　　 4、膠質瘤中RecQ1、P53、Ki-67相關性

10、r>　　 實驗設有64例腦膠質瘤組織（低級別組23例，高級別組41例），檢測其各級別中RecQ1表達值分別與標本來源相同的患者的膠質瘤組織p53、ki-67表達值進行相關性檢驗，做散點圖，并采用pearson線性相關性檢驗示他們的變化相關性（a=0.05）。結果顯示:在膠質瘤中，ReeQ1與p53相關系數為0.294，P=0.018，P＜0.05;RecQ1與ki-67相關系數為0.662，P=0.000，P＜0.05。另外，分別檢測

11、各級別膠質瘤組中三者相關性，結果顯示:低級別組膠質瘤組RecQ1與p53相關系數為-0.170，P=0.439，P＞0.05，RecQ1與ki-67相關系數為0.004，P=0.987，P＞0.05;高級別組RecQ1與p53相關系數為0.139，P=0.387，P＞0.05，RecQ1與ki-67相關系數為0.073，P=0.648，P＞0.05。
　　 結論:
　　 1、高級別及低級別腦膠質瘤組與正常對照組腦組織Re

12、cQ1表達之間有明顯統(tǒng)計學差異，腦膠質瘤組明顯高于正常對照組。提示:RecQ1在膠質瘤中存在高表達。
　　 2、腦膠質瘤組內的RecQ1、p53、ki-67表達，高級別組高于低級別組，兩組間均存在差異，且具有統(tǒng)計學意義。提示:RecQ1、p53、ki-67表達情況與膠質瘤惡性程度存在正相關性。
　　 3、在膠質瘤組中RecQ1表達與Ki-67及p53表達相似，都隨著膠質瘤級別增加而呈現表達增高。這表明RecQ1可能成為判

13、斷人腦膠質細胞瘤惡性程度或預后的新指標;但在低級別膠質瘤組或高級別膠質瘤組中三者間沒有線性相關關系。這又表明，ReeQ1區(qū)別于經典的抑癌基因和核增值抗原而相對獨立存在，它可能成為膠質瘤基因治療的新靶點。
　　 RecQ1在各級別膠質瘤中存在不同程度的表達;高級別膠質瘤存在高表達，細胞核著色;膠質瘤中RecQ1表達與Ki-67及p53相似，均隨膠質瘤級別增加而增高。但在低級別膠質瘤組或高級別膠質瘤組中RecQ1表達與Ki-67及p