裸鼠結直腸癌肝轉移動物模型的建立.pdf

1、研究背景及目的:
　　結直腸癌是一種常見的嚴重威脅人類生命健康的惡性腫瘤，位居男性惡性腫瘤第四位，女性惡性腫瘤第三位，每年有超過一百萬人被新診斷為結直腸癌;近年來隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展、生活方式的改變尤其是飲食結構的轉變，結直腸癌的發(fā)病率與死亡率呈逐年上升的趨勢。結直腸癌肝轉移模型的建立，對于探索結直腸癌的發(fā)展、轉移的機制，腫瘤微環(huán)境的形成與發(fā)展以及正確評估各種藥物及治療方案的療效等都具有重要意義。本研究擬建立一種穩(wěn)定的裸鼠大腸癌肝轉

2、移模型，以期在此平臺上創(chuàng)建高轉移細胞系，便于后期進行相關分子機制及藥物療效試驗、腫瘤微環(huán)境等方向的研究，并期待結合臨床，指導治療。
　　方法:
　　1、動物實驗:(1)主要方法:裸鼠盲腸漿膜下腫瘤細胞注射法:將CT26.WT鼠結腸癌細胞懸液0.05ml（1*105/只）注射入BALB/C裸鼠盲腸壁，建立裸鼠盲腸原位腫瘤。
　　(2)輔助方法:裸鼠皮下成瘤法:將CT26.WT鼠結腸癌細胞懸液0.2ml（1*106/只）注

3、射入BALB/C裸鼠皮下，觀察腫瘤的生長及比較各代腫瘤細胞的成瘤效率。
　　2、細胞實驗:(1)轉移瘤組織直接剪碎培養(yǎng)法:此方法一般用于數(shù)量較少且瘤徑相對較大之肝臟轉移瘤的原代培養(yǎng)。
　　(2):鼠肝臟切取消化培養(yǎng)法:此方法適合于較彌漫性分布且瘤徑普遍較小之肝臟轉移瘤的原代培養(yǎng)。
　　結果：
　　(1)成功建立CT26.WT鼠結腸癌細胞盲腸原位結直腸腫瘤模型;
　　(2)成功建立CT26.WT鼠結腸癌細胞盲

4、腸至肝轉移動物模型;
　　(3)成功培養(yǎng)出CT26.WT鼠結腸癌細胞第一代肝轉移細胞系CT26.WT M1;
　　(4)成功培養(yǎng)出CT26.WT鼠結腸癌細胞第二代肝轉移細胞系CT26.WT M2;
　　(5)成功培養(yǎng)出CT26.WT鼠結腸癌細胞第三代肝轉移細胞系CT26.WT M3。
　　(6)成功完成M0、M1、M2、M3四代細胞之間增殖與轉移能力的初步評價。
　　結論:
　　(1)從方法學角度來說