DcR3與甲狀腺乳頭狀癌相關(guān)性的研究.pdf

1、目的:采用RT-PCR、Western blot、免疫組化法分別檢測甲狀腺乳頭狀癌組織與癌旁正常甲狀腺組織標(biāo)本中DcR3 mRNA及蛋白的表達(dá)情況，探討DcR3在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達(dá)及臨床意義，揭示DcR3與甲狀腺乳頭狀癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。
　　材料與方法:
　　1.材料:收集臺州學(xué)院附屬市立醫(yī)院腫瘤外科2012年2月至2013年1月間手術(shù)切除的甲狀腺乳頭狀癌組織及癌旁正常甲狀腺組織標(biāo)本各50例，其中，甲狀腺乳頭狀癌組男

2、性12例，女性38例，年齡25～60歲，中位年齡41.5歲;癌旁正常甲狀腺組男性19例，女性31例，年齡28～61歲，中位年齡43歲。組織標(biāo)本大小為0.5cm-1.0cm不等，一半于30 min內(nèi)置于80℃冰箱保存，一半浸泡于10％的福爾馬林溶液中。所有組織標(biāo)本均經(jīng)醫(yī)院病理證實，患者術(shù)前均未行放化療。
　　2.方法:
　　2.1甲狀腺乳頭狀癌中DcR3 mRNA的檢測:QRT-PCR(Quantitative realtim

3、e polymerase chain reaction，QRT-PCR)法對比分析DcR3的mRNA在甲狀腺乳頭狀癌組織、甲狀腺乳頭狀癌旁正常甲狀腺組織中的表達(dá)情況，表達(dá)的差異采用獨立樣本t檢驗分析，P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　2.2甲狀腺乳頭狀癌中DcR3蛋白的檢測:
　　2.2.1免疫組織化學(xué)法(IHC)檢測甲狀腺乳頭狀癌組織、甲狀腺乳頭狀癌旁正常甲狀腺組織中的DcR3蛋白表達(dá)情況，表達(dá)的差異采用獨立樣本t檢驗，P＜

4、0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　2.2.2 Western blot法檢測甲狀腺乳頭狀癌組織、癌旁正常甲狀腺組織蛋白表達(dá)高低情況，數(shù)據(jù)比較采用獨立樣本t檢驗，P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:1.RT-PCR法檢測DcR3在甲狀腺乳頭狀癌組織中的mRNA表達(dá)量為2.0583±0.1215，與甲狀腺乳頭狀癌旁正常甲狀腺組相比，其在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達(dá)明顯增高，經(jīng)獨立樣本t檢驗分析，P＜0.05，有統(tǒng)計學(xué)差異。2.免疫組織

5、化學(xué)法檢測示DcR3蛋白在甲狀腺乳頭狀癌組織中陽性率為48％，甲狀腺乳頭狀癌旁正常甲狀腺組織陽性率為22％，甲狀腺乳頭狀癌組織中DcR3蛋白表達(dá)的陽性率高于癌旁正常甲狀腺組織，經(jīng)x2檢驗分析，P＜0.05，有統(tǒng)計學(xué)意義，但DcR3蛋白的表達(dá)水平與患者性別、年齡、腫瘤大小、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及病理分期均無相關(guān)性，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。3.Western blot法檢測DcR3蛋白在甲狀腺乳頭狀癌中蛋白質(zhì)表達(dá)水平為1.5527±0.

6、2102，其在癌旁正常甲狀腺組織中的蛋白質(zhì)水平的表達(dá)為0.5431±0.1074，甲狀腺乳頭狀癌組織中DcR3的表達(dá)量明顯高于癌旁正常甲狀腺組織，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析， P＜0.05，有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論: DcR3在甲狀腺乳頭狀癌及癌旁正常甲狀腺組織中均有表達(dá)，與癌旁正常甲狀腺組織相比，甲狀腺乳頭狀癌組織標(biāo)本中DcR3在基因轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)表達(dá)水平上均表現(xiàn)為明顯增高，提示DcR3高表達(dá)可能是甲狀腺乳頭狀癌發(fā)生發(fā)展過程中一分子事件，可能起