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文檔簡介
1、目的:研究鳥頭堿對心肌細胞毒作用機制 方法:本實驗采用均勻設計和MTT方法研究烏頭堿不同濃度和不同時間點對心肌細胞的影響:用H.E染色法、電子顯微鏡觀察烏頭堿最大毒性劑量及臨界作用時間點對心肌細胞形態(tài)學的損傷:用細胞酶學方法、流式細胞儀、比濁法觀察烏頭堿對心肌細胞膜通透性、穩(wěn)定性、細胞內(nèi)環(huán)境、細胞能量代謝和細胞周期的影響;從而揭示烏頭堿對心肌細胞毒性損傷的機制。 結(jié)果:烏頭堿對心肌細胞毒最大毒性劑量是3%,其臨界作用
2、時間點為30s、1m、30m。烏頭堿作用細胞后,細胞連接減少,細胞間空隙增大,細胞膜不完整、膜凸起消失;線粒體腫脹溶解,溶酶體腫脹溶解,肌絲斷裂溶解,胞漿出現(xiàn)大量的空泡;核紅染,細胞核染色質(zhì)濃縮、消失;烏頭堿作用的時間越長,其損傷越嚴重。細胞介質(zhì)中LDH活力增高和MDA含量增高,ACP活力增高;Na<'+>-K<'+>ATP的活力、[K<'+>]和[Mg<'2+>]降低,[Na<'+>]和[ca<'2+>]濃度升高:SDH活力降低,糖原
3、的含量降低; cAMP/cGMP值升高;細胞G<,2>+M、S的比值降低。 結(jié)論:烏頭堿對心肌細胞的細胞核染色質(zhì)、線粒體、溶酶體、肌絲、細胞膜及細胞連接都有直接的損害:烏頭堿導致心肌細胞生物膜功能的損傷、能量代謝障礙、核酸的損傷、細胞增殖抑制;烏頭堿對心肌細胞毒作用機制可能為:烏頭堿抑制心肌細胞Na+·K+ATP活性,導致細胞內(nèi)Na<'+>濃度升高,K<'+>濃度降低,引起細胞的興奮性升高和細胞內(nèi)Ca<'2+>超載,導致細胞形
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