靶向c-mvc基因小RNA干擾對膽囊癌細胞侵襲運動的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:通過觀察c-myc對膽囊癌細胞運動和侵襲能力的影響,以論證c-myc在腫瘤侵襲和轉移中的作用,為膽囊癌侵襲和轉移干預提供分子靶點。
　　 方法:采用實時定量PCR和westernblot檢測親代和高轉移膽囊癌細胞系中c-myc基因表達,設計靶向c-myc的小RNA[smallinterferenceRNA,siRNA]轉染高轉移的膽囊癌細胞,通過體外侵襲實驗研究c-mycsiRNA對膽囊癌高轉移細胞遷移和侵襲能力的影響。此

2、外,通過westernblot方法檢測轉染c-mycsiRNA后c-myc下游部分信號通路的變化,進一步研究c-mycsiRNA抑制膽囊癌細胞轉移的機制。
　　 結果:通過實時定量PCR檢測發(fā)現,c-myc的RNA水平在GBC-SD/M3細胞中是其在GBC-SD細胞中的2.18倍(p=0.0019);在蛋白水平上,c-myc在GBC-SD/M3中的表達也高于其在GBC-SD中的表達。靶向c-myc的siRNA轉染GBC-SD/M

3、3細胞后,與對照相比,c=mycsiRNA能夠有效地抑制c-myc蛋白在GBC-SD/M3細胞中的表達。與對照相比,c-mycsiRNA可以有效的抑制GBC-SD/M3細胞的遷移(p=0.0168)。對GBC-SD/M3細胞的侵襲能力檢測后發(fā)現,c-mycsiRNA同樣也能夠有效的抑制GBC-SD/M3細胞的侵襲(p=0.0005)。進一步檢測c-mycsiRNA對LIN28蛋白水平的影響,表明c-mycsiRNA轉染后,LIN28的蛋

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