毛囊真皮鞘細胞在皮膚創(chuàng)傷愈合中作用的研究.pdf

1、[目的]：對毛囊真皮鞘細胞在皮膚創(chuàng)傷愈合中的作用進行了較系統(tǒng)的研究，旨在為皮膚創(chuàng)/燒傷和病理性瘢痕治療研究提供新的思路。 [方法]：利用組織塊法原代培養(yǎng)大鼠觸須毛囊真皮鞘細胞，經免疫細胞化學和免疫熒光染色進行細胞鑒定，MTT檢測和光鏡、電鏡觀察細胞生長特性和超微結構特征；對BrdU細胞標記方法、檢測手段和創(chuàng)面細胞移植時機進行優(yōu)化，建立動物實驗模型；通過超微結構掃描電鏡定性觀察和瘢痕三維重建體積定量建立瘢痕評價體系：大鼠背部創(chuàng)面同

2、種毛囊真皮鞘細胞移植后，通過病理形態(tài)觀察和圖像分析對創(chuàng)面愈合及瘢痕形成進行動態(tài)定性和定量評價；采用RT-PCR、免疫細胞化學、免疫熒光和免疫印跡技術分別從基因或蛋白水平檢測部分愈合相關蛋白在真皮鞘細胞中的表達。 [結果]： (1)毛囊真皮鞘細胞具有的生長特性和結構特征：原代生長遲緩、傳代后增殖旺盛，呈克隆樣叢狀生長；細胞呈紡錘形，胞體豐滿；核/漿比較大，核仁較多，胞膜下存在多量條帶狀致密斑。 (2)建立了大鼠背部

3、創(chuàng)面可示蹤細胞移植模型：以終濃度為10μmol/L的BrdtJ標記細胞，于致傷前移植，術后14 d的愈合組織中仍可見到植入細胞。 (3)建立了皮膚創(chuàng)傷愈合瘢痕評價體系：以瘢痕中膠原纖維和膠原原纖維的排列作為定性指標；瘢痕體積作為定量指標。 (4)毛囊真皮鞘細胞具有促進皮膚創(chuàng)面愈合的作用：術后各時間點細胞移植組創(chuàng)面收縮率均大于對照組(P<0.01)；術后7d移植組新生肉芽組織中見不均勻分布的標記細胞，14d標記細胞減少并出

4、現凋亡；移植組愈合過程中肉芽組織形成、表皮再生、膠原增生、瘢痕形成和組織改建均較對照組提前，所形成的瘢痕量呈減少趨勢。 (5)真皮鞘細胞的促愈機制：細胞中Ⅰ型前膠原蛋白mRNA高表達，bFGF、EGFR和TIMP1在蛋白水平較皮膚成纖維細胞高表達。 [結論]：毛囊真皮鞘細胞為幼稚的間充質細胞，具有潛在增殖能力；在皮膚創(chuàng)傷修復過程中參與肉芽組織的形成和膠原合成，具有一定的加速創(chuàng)面收縮、促進愈合進程和減少瘢痕形成的作用；該作