強骨顆粒含藥血清對破骨細(xì)胞增殖及活性的影響.pdf

1、目的：本實驗通過體外分離、培養(yǎng)新生大鼠破骨細(xì)胞，研究大鼠的含強骨顆粒藥物血清對體外培養(yǎng)的破骨細(xì)胞增殖及骨吸收活性的影響，從細(xì)胞生物學(xué)角度深入研究中藥強骨顆粒對骨質(zhì)疏松癥的治療作用機理，探討強骨顆粒是否是通過抑制破骨細(xì)胞的增殖、降低破骨細(xì)胞的骨吸收活性來發(fā)揮其抗骨質(zhì)疏松的作用，為強骨顆粒在預(yù)防及治療骨質(zhì)疏松癥提供理論和實驗依據(jù)。
　　 方法：
　　 1.破骨細(xì)胞制備：從剛出生的大鼠骨髓腔內(nèi)進(jìn)行破骨細(xì)胞的分離、純化、鑒定和傳

2、代培養(yǎng)。
　　 2.載藥血清制備：應(yīng)用強骨顆粒高劑量 (H)、中劑量 (M)和低劑量 (L)、尼爾雌醇（E）及普通食物(N)分別喂養(yǎng)五組大鼠，以獲得不同的藥物血清及對照組血清。
　　 3.體外觀察不同稀釋濃度的載藥血清及陰性對照組血清對破骨細(xì)胞增殖的影響（TRAP+計數(shù)法）。
　　 4.體外觀察置于不同稀釋濃度載藥血清及陰性對照組血清里的破骨細(xì)胞對骨片吸收形成吸收陷窩的數(shù)目的影響。
　　 結(jié)果：
　

3、　 1.通過小鼠四肢骨機械分離、純化、傳代培養(yǎng)，經(jīng)抗酒石酸酸性磷酸酶驗證為破骨細(xì)胞，且可獲得較高濃度和一定數(shù)量。
　　 2.強骨顆粒高劑量組、尼爾雌醇組含藥血清培養(yǎng)的破骨細(xì)胞細(xì)胞數(shù)明顯減少，且與中、低劑量組、陰性對照組相比，存在顯著性差異。中、低劑量組與陰性對照組相比，也使破骨細(xì)胞的數(shù)量減少，但不存在顯著性差異。
　　 3.強骨顆粒高劑量組、尼爾雌醇組含藥血清培養(yǎng)的破骨細(xì)胞作用骨片而形成的骨陷窩數(shù)目明顯減少，且與中、低