慢病毒介導bcr-abl基因長期沉默對K562細胞生物學特性與姜黃素抗腫瘤作用影響及其相關機制研究.pdf

1、福建醫(yī)科大學博士學位論文慢病毒介導bcrabl基因長期沉默對K562細胞生物學特性與姜黃素抗腫瘤作用影響及其相關機制研究姓名：吳枝娟申請學位級別：博士專業(yè)：藥理學（腫瘤藥理）指導教師：許建華20090401：、Ber／abl基因長期沉默對K562細胞生物學特性及榴關基因液達的影響ber／abt墓囂怒專翁爿＆發(fā)生、發(fā)震、轉髑整窩褥關煞瘓基篷。bcr／abl基霞長囊拜缺席“，可能導致K562細胞各種生物學特讎及相關信號分子表達的變能。本部分

2、，我們羹bcr／ab|基囂長鬻漂默辯B／AK562鬈熬勢模型，與委鬻黯照蕤K562燕魏及空冀囂對照的EGFPK562細胞進行比較，分析冀主要生物學特性及信號分予的變化。磷究方法；(1≥鬟交簦染慧注襝溺熬魏壤墓篷辦變霓；《2)集薄綹爨法黧察ILNAi對集落形成能力的影響；(3)聯(lián)苯胺染色觀察細胞分化；(4)流式細胞儀分析細胞周麓變純；《耋≥ELISA裝撿測蠹囊c酸激簿活縫；≤≤≥AOEB、Heochst33342染毽麓察纓胞凋亡#(7)比

3、悒法檢測Caspase。3、Caspase9活性；(8)Westernblotting法觀察RNAi黠囊麓增疆灞亡檁關臻母勢子瓣影璃。絡果顯示；(1)bcr／ablRNAi顯著抑制K562綱胞增殖，細胞倍增時間明恩延長；(2≥bcr／ablRNAi攆裁絮臆集薄形成，纂落澎袋簿镅拳遮籍越鞴；《3)ber／abt輪漱i誘導K562細胞廊成熟紅添分化，聯(lián)苯胺染色陽性辮達2483％；(4)bcr／abl烈越使纘麓藺裁避滯在S鬻，密現(xiàn)灝亡的受二贊

4、體蜂；≤5)bcr／abl裝鬻轟i愛懿氮酸激黧活性降低約4188％；(6)bcr／ablRNAi誘鐐K562細胞凋亡，自發(fā)凋亡率達忿667％；(≯≥bcr／abtRNAi簸發(fā)線粒律CytC釋艘，Caspase。3及Caspase。9活襤提嵩，敝線糙體途襁誘導綱胞凋亡；(8)bcr／ablRNAi下調K562細胞Src、PSrc、Raf1、PErku2、PStarl、PStar5、P_P38、Cmyc、Bcl2幫Hsp90含量，上調羚3、

5、PKC及Bax禽爨，對Erkv2、PAkt、NF憋、Hsp70影螭不太。墨、慢瘸棗舟導berlabl基因長期沉默對K562纓腱裰鬣成癀的影嗡及棚關枧制研究幔瘸毒介譬戇RNA干擾，在律外能奧現(xiàn)bcr／abl基巡熊長期沉默，抑制K562細胞增楚，誘導箕向成熟氯系緇魔分化，蓰避細脆褥亡。本幫分我們關注的是：B／AK562纓照在襟鼠體內然孬繼續(xù)保持黠bcr／abl基因靛RNA干擾以殿成癌麓力彝捆美信號分子懿燮純。研巍方法；《1)皮下注射K562