L-精氨酸對大鼠單側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)復位后對側(cè)睪丸早期損傷的保護機制的研究.pdf

1、背景和目的： 睪丸扭轉(zhuǎn)是小兒泌尿外科常見急癥，可引發(fā)精索內(nèi)營養(yǎng)血管箝閉，引起同側(cè)睪丸急性缺血損傷，即使及時行復位術(shù)保留睪丸，仍有致對側(cè)睪丸不同程度的繼發(fā)性損傷可能。盡管當前對于單側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)復位后對側(cè)睪丸早期是否存在損傷尚有爭論，但絕大多數(shù)學者認為損傷存在，且應在單側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)復位前予注射一氧化氮合酶(NOS)抑制劑來減少對側(cè)睪丸的損傷。本研究擬通過動物實驗證明單側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)復位后對側(cè)睪丸早期即可出現(xiàn)損傷，并試圖闡明作為一氧化氮(NO

2、)體外供體的左旋精氨酸(L-精氨酸L-arg)在對側(cè)睪丸組織中所起的保護作用及其機制，以及早期使用小劑量L-arg代替NOS抑制劑是否可行。 方法： 將140只青春期前SD大鼠隨機平均分為5組，每組28只。第1組為假手術(shù)組，第2組為安慰劑組(生理鹽水組)，第三組為小劑量L-arg組，第四組為大劑量L-arg組，第五組為NOS抑制劑(L-NMMA)組。其中，假手術(shù)組將左側(cè)陰囊打開分離暴露睪丸后，不予扭轉(zhuǎn)，即將睪丸再固定于陰

3、囊壁上，待4小時后再縫合陰囊。其余二三四五各組則依Turner法建立左側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)模型，于扭轉(zhuǎn)4小時后復位，并在復位前半小時內(nèi)按組別于右側(cè)股靜脈處微泵注入同等劑量的相應藥物。五組分別于復位后1h、4h、24h、1周等四個時段內(nèi)每組各處死大鼠7只，取右側(cè)睪丸行一氧化氮合酶(NOS)活性、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、白介素-6(IL-6)、病理評分、生精細胞層計數(shù)、精細小管直徑測量及TUNEL凋亡檢測。 結(jié)果： 1.組

4、織MDA濃度術(shù)后1小時，除大劑量L-arg組升高明顯外，其余各組無顯著性差異。自術(shù)后4小時起至1周，除假手術(shù)組以外的其余4組均有升高，其中小劑量L-arg組與L-NMMA組升高幅度較小，且2組間無明顯差異。 2.組織NO濃度自術(shù)后1小時起至1周時，相較于假用術(shù)組，其余4組NO值有不同程度升高，其中L-NMMA組升高幅度最小。而小劑量L-arg組與安慰劑組相比，雖然小劑量L-arg組1小時段NO值較高，但此后增幅并不明顯，術(shù)后1天

5、及1周時段反而是安慰劑組NO值較高。 3.組織NOS活性值除假手術(shù)組外，其余4組中以L-NMMA組NOS活性值最低。術(shù)后1小時段起即可見安慰劑組NOS值明顯增加，而小劑量L-arg組在1小時段與假手術(shù)比無顯著性差異，在4小時段始有升高，但較同期的安慰劑組為低。 4.組織組織IL-6值本實驗中IL-6數(shù)據(jù)為比值。結(jié)果描述同1。 5.組織病理評分：結(jié)果描述同1。 6.組織生精上皮層數(shù)和精細小管直徑相較于假手術(shù)

6、組，其余4組一周時生精上皮層數(shù)和精細小管直徑有不同程度下降，示睪丸生精功能預后不良；在除假手術(shù)組以外的剩余4組的比較中，可見小劑量L-arg組和L-NMMA組的生化指標和病理評分低于其余2組，一周時該2組生精上皮層數(shù)和精細小管直徑則高于其余2組，提示小劑量L-arg組和L-NMMA組的損傷程度和預后情況均優(yōu)于另外2組，但小劑量L-arg組和L-NMMA組間則無明顯統(tǒng)計學差異。 7.另予行小劑量L-arg組及L-NMMA組Tune

7、l染色，后計算凋亡指數(shù)示小劑量L-arg組為13.6，L-NMMA組為16.2，提示小劑量L-arg組病理性凋亡程度較L-NMMA組為低。 結(jié)論： 1.單側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)后對側(cè)睪丸早期即可出現(xiàn)繼發(fā)性損傷。 2.NOS抑制劑或小劑量的L-arg在單側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)后對側(cè)睪丸損傷的早期有明顯的保護對側(cè)睪丸組織的作用；而相比于NOS抑制劑，小劑量的L-arg抑制對側(cè)睪丸的病理性凋亡也有一定的效果，且價格低廉，故認為早期使用小劑量L