骨髓間充質干細胞移植后在mdx鼠體內的分布、定向分化及其機制研究.pdf

1、本實驗擬在體外培養(yǎng)SD大鼠MSCs，應用3H-TdR標記后移植入DMD的模型鼠mdx鼠進行移植，觀察MSCs移植后在體內的分布情況；應用BrdU標記MSCs檢測Dystrophin和Utrophin在體內的表達量和表達時間規(guī)律，以及其表達對mdx鼠的肌酸激酶(CK)、核中心移位的影響；并檢測MyoD和myogenin及骨骼肌的特異性標志物胚胎型肌凝蛋白重鏈(devMHC)在體內的表達量和表達時間規(guī)律，探討MSCs移植后在體內分化為骨骼肌

2、的可能機制，為最終應用于臨床實驗提供理論基礎。結論:應用3H-TdR標記法可以有效地標記MSCs進行移植后的體內分布研究，并且長達4個月的追蹤，早期MSCs主要分布于血流豐富的器官，以后隨時間延長MSCs具有明顯的歸巢現(xiàn)象，并可受病損肌肉的微環(huán)境影響向肌肉趨化，隨時間延長MSCs在肌肉中分布逐漸增加。采用差速貼壁法將MSCs有效分離后，應用BrdU標記，標記率可達98％以上，可以追蹤尾靜脈移植后MSCs在體內的分化過程。應用3H-TdR

3、標記或者BrdU標記MSCs并追蹤其在mdx鼠體內變化，各組織器官均未發(fā)現(xiàn)腫瘤發(fā)生，因而MSCs移植是安全可靠的。MSCs移植后mdx鼠有DYS表達，并且隨時間延長增加，應用激光共聚焦技術表明DYS陽性肌纖維來自于移植的MSCs。Utrophin在mdx鼠肌膜表達上調，在DMD疾病中對DYS有一定的功能替代作用。MSCs移植后DYS的表達對Utrophin有抑制作用，二者存在互補關系，但Utrophin的mRNA水平卻無改變。MSCs移