舒肝顆粒毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察舒肝顆粒(ShuganGranule)中藥復(fù)方制劑對(duì)小鼠的急性毒性和對(duì)大鼠的長(zhǎng)期毒性反應(yīng)，以評(píng)價(jià)該藥物的臨床用藥安全性。 方法：急性毒性試驗(yàn)選用20只KM小鼠(雌雄各半)，分兩箱籠養(yǎng)，每箱10只，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室后，讓其自由活動(dòng)，以適應(yīng)環(huán)境，用藥前禁食不禁水12小時(shí)。將舒肝顆粒碾碎，用細(xì)孔網(wǎng)篩篩成粉末，將其配成80％混懸液(每毫升相當(dāng)于原生藥1.52g)。給小鼠每次以最大容積0.4ml/10g，80％舒肝顆粒混懸液灌胃，24

2、小時(shí)內(nèi)每隔8小時(shí)一次，連續(xù)觀察7天。長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)選取Wistar大鼠80只，將其隨機(jī)分為高、中、低劑量組和生理鹽水組四個(gè)組(每組20只，雌雄各半)，分別給予舒肝顆粒24g/kg.d，12g/kg.d和6.0g/kg.d及等容積生理鹽水，分2次灌胃，給藥體積為2ml/100g，連續(xù)給藥12W，觀察大鼠的精神狀態(tài)、活動(dòng)、飲食、排泄，并每周測(cè)體重一次。用藥12W末處死一半大鼠，采用心臟取血，進(jìn)行血液學(xué)檢查如紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、血紅蛋白含量(

3、HGB)，白細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)(WBC)、淋巴細(xì)胞(LY)絕對(duì)計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞(NEU)絕對(duì)計(jì)數(shù)，血小板計(jì)數(shù)(PLT)，凝血酶原時(shí)間(PT)；血液生化學(xué)檢查如血清總蛋白(TB)、血清白蛋白(ALB)、血清球蛋白(GLO)、總膽紅素(TBIL)、血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶(ALT)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、尿素(urea)、肌酐(CRE)、總膽固醇(TC)、血糖(GLU)；重要臟器心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、睪丸、卵巢進(jìn)

4、行稱(chēng)重并計(jì)算臟器系數(shù)，對(duì)心、肝、脾、肺、腎、腎上腺進(jìn)行肉眼形態(tài)學(xué)觀察并做HE常規(guī)病理染色檢查。另一半動(dòng)物停藥14天后再處死，并作上述同樣的指標(biāo)檢測(cè)。 結(jié)果：小鼠用藥最初1-2天內(nèi)小鼠的精神、活動(dòng)狀態(tài)差、喜群集、進(jìn)食進(jìn)水少、大便稀溏(4只小鼠因操作導(dǎo)致窒息死亡)，以后上述現(xiàn)象轉(zhuǎn)為正常，無(wú)一例因藥物中毒而致死亡，無(wú)法測(cè)出LD50。由此測(cè)得該藥物的最大給藥量為96g/kg.d，相當(dāng)于成人用量的224倍。長(zhǎng)期毒性結(jié)果顯示，在整個(gè)用藥過(guò)程

5、中和停藥觀察期間，處理組和對(duì)照組動(dòng)物攝食、皮毛、排泄、行為活動(dòng)等均無(wú)異常改變。處理組動(dòng)物體重均有增長(zhǎng)，與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，三個(gè)劑量組間也無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。處理組心、肝、腎、腎上腺、睪丸、卵巢臟器系數(shù)比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，與對(duì)照組比較亦無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；肺用藥組12W末臟器系數(shù)高于對(duì)照組，有顯著差異(P＜0.05)，但停藥14天后臟器系數(shù)和對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。脾

6、臟用藥12W后與對(duì)照組比較其臟器系數(shù)均高，其中高、中劑量組P＜0.05,低劑量組P＜0.02,表明用藥12W末脾的臟器系數(shù)增高有顯著意義.而停藥14天后其脾臟器系數(shù)也高于對(duì)照組，高、中、低劑量分別為P＜0.005,P＜0.001，＜0.002，用藥12W末與停藥14天后比較無(wú)顯著差異。血液生化學(xué)檢查可見(jiàn)各處理組在停藥14天后測(cè)得AST、ALT數(shù)據(jù)明顯比用藥12W末高(P＜0.05)；其余血清Urea、Crea、TP、ALB、GLO、TB

7、IL、ALP、TC、GLU處理組與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，三個(gè)劑量組間比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。用藥后12W末及停藥14天，血液學(xué)檢查數(shù)據(jù)如RBC、HGB、WBC、LY、NEU、PLT、PT各處理組與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，并且三個(gè)劑量組間比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。用藥12W末和停藥14天后處死大鼠，各劑量組間心、肝、脾、肺、腎、腎上腺重要臟器外觀色澤及質(zhì)地正常，取心、肝、脾、肺、腎、腎上

8、腺做常規(guī)HE染色，其檢查結(jié)果如下：心、肝、腎、腎上腺結(jié)構(gòu)正常，無(wú)細(xì)胞變性水腫。另外各處理組肺內(nèi)巨噬細(xì)胞增多，同時(shí)用藥組脾小體增多，淋巴濾泡生發(fā)中心擴(kuò)大。大多數(shù)肺組織結(jié)構(gòu)正常，僅高劑量組有2例和中劑量組有1例發(fā)現(xiàn)有小葉性肺炎。 結(jié)論：1.舒肝顆粒急性毒性試驗(yàn)未致大鼠死亡，臨床使用量安全系數(shù)較高。 2.舒肝顆粒長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)對(duì)大鼠生長(zhǎng)發(fā)育無(wú)抑制作用。 3.舒肝顆粒長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)對(duì)大鼠血液學(xué)和血液生化學(xué)指標(biāo)無(wú)影響，對(duì)重要臟