奈達鉑聯(lián)合放射治療對人鼻咽癌5-8F細胞作用的實驗研究.pdf

1、目的:
　　通過體外實驗研究奈達鉑單獨或聯(lián)合X-射線對人鼻咽癌5-8F細胞的細胞增殖動力學影響以及作用機制，初步探討奈達鉑作為放射增敏藥物的可能性，為臨床上鼻咽癌放射增敏治療提供實驗基礎。
　　方法:
　　本實驗應用MTT法檢測奈達鉑對人鼻咽癌5-8F細胞的細胞增殖動力學影響，并求得IC10為后續(xù)試驗提供適合藥物濃度:利用細胞克隆形成實驗首先得到低劑量奈達鉑對人鼻咽癌5-8F細胞的最佳照射時間(T)，進而根據合適藥物濃

2、度和最佳照射時間再次進行細胞克隆形成實驗，并根據實驗數(shù)據繪制細胞生存曲線，求得放射敏感性相關參數(shù)，觀察奈達鉑的放射敏感性;應用流式細胞術觀察低劑量奈達鉑單獨或聯(lián)合X-射線對人鼻咽癌5-8F細胞周期及細胞凋亡的影響，運用免疫細胞化學法檢測低劑量奈達鉑單獨或聯(lián)合X-射線對人鼻咽癌5-8F細胞凋亡蛋白Fas表達的影響，以探討其作用機制。
　　結果:
　　1.MTT法結果顯示:分別用不同濃度奈達鉑（1、2、4、8、16、32μg/m

3、l）作用人鼻咽癌5-8F細胞24h后，細胞增殖被不同程度的抑制，增值抑制率分別為11.40％、30.63％、38.01％、65.68％、73.43％、81.92％，隨藥物濃度增加及藥物作用時間延長，奈達鉑對人鼻咽癌5-8F細胞增殖抑制作用增強。根據細胞增殖抑制率，應用SPSS17.0軟件求得奈達鉑對人鼻咽癌5-8F細胞的IC50為5.640μg/ml,IC10為1.128μg/ml。
　　2.細胞克隆形成實驗結果顯示:最佳照射時間

4、T為24小時，根據實驗數(shù)據應用Sigmaplot12.0軟件繪制細胞生存曲線，求得放射敏感性相關參數(shù)(D0、Dq、N):單純放療組的參數(shù)分別為:1.453Gy、1.216Gy、2.289;1μg/ml奈達鉑+放療組分別為:D0值為0.947Gy、 Dq值為0.701Gy、N值為2.087，根據公式計算放射增敏比(SER)，1μg/ml奈達鉑+放療組放射增敏比(SER) SERD0、SERDq、 SERSF2分別為1.537、1.690、

5、2.068。
　　3.流式細胞術檢測結果顯示:(1)X-射線(0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy)單純或聯(lián)合奈達鉑作用鼻咽癌5-8F細胞后，其細胞凋亡情況改變應用SPSS17.0進行統(tǒng)計分析，奈達鉑+放療組細胞凋亡率較單純放療組顯著升高(P＜0.05)。(2)X-射線(0Gy、2Gy、4Gy、6Gy)單純或聯(lián)合奈達鉑作用鼻咽癌5-8F細胞后，其細胞周期G2/M期分布改變應用SPSS17.0進行統(tǒng)計分析，奈達鉑+放療組細胞凋亡率

6、較單純放療組顯著升高(P＜0.05)。
　　4.細胞免疫化學染色結果顯示:X-射線(0Gy、2Gy、4Gy、6Gy)單純或聯(lián)合奈達鉑作用鼻咽癌5-8F細胞后，其細胞Fas蛋白表達情況應用SPSS17.0進行統(tǒng)計分析，奈達鉑+放療組細胞Fas蛋白陽性表達率較單純放療組顯著上調(P＜0.05)。
　　結論:
　　1.低劑量奈達鉑可提高人鼻咽癌5-8F細胞的放射敏感性，其機制可能與低劑量奈達鉑可上調細胞內的Fas蛋白表達，從