mir-148a抑制肝癌細胞7721侵襲遷移的作用研究.pdf

1、原發(fā)性肝癌是肝細胞或肝內(nèi)膽管上皮發(fā)生的惡性腫瘤。盡管其治療方法有了很大進步，但其復發(fā)和轉移仍十分常見。因此，探索肝癌侵襲轉移機制，尋找新的臨床治療靶點，在肝癌的治療中具有重要作用。
　　microRNA是一些細胞程序的調(diào)節(jié)因子，研究發(fā)現(xiàn)人類肝癌/肝癌伴轉移組織中miRNAs存在差異表達，因而，探索miRNAs與肝癌侵襲轉移等生物學特性的影響很有必要。
　　目的:檢測肝癌/肝癌伴轉移組織中差異表達的miRNAs，觀察miR-1

2、48a與肝癌侵襲轉移的關系，為肝癌的基因治療提供新的實驗依據(jù)。
　　方法:應用miRNA芯片技術檢測肝癌/肝癌伴轉移組織中差異表達的miRNAs，篩選差異表達的miRNAs;
　　利用Transwell小室法和細胞劃痕實驗檢測肝癌細胞侵襲與遷移能力;
　　采用明膠酶譜法及蛋白免疫印記法(Western blot)檢測基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)的表達情況，進而，分析其與肝癌侵襲和轉移的

3、關系。
　　結果:miRNA芯片技術結果顯示miR-148a在肝癌伴轉移組織中顯著下調(diào)，半定量RT-PCR結果顯示，和對照組相比，LV-miR-148a感染組肝癌細胞表達miR-148a明顯增高，Transwell小室法及細胞劃痕實驗結果顯示過表達miR-148a明顯抑制肝癌細胞7721侵襲遷移能力，明膠酶譜法與Western blot結果顯示過表達miR-148a降低肝癌細胞7721中MMP-2和MMP-9蛋白的表達。