兒童感染幽門螺桿菌對克拉霉素耐藥性及耐藥機制的研究.pdf

1、浙江大學碩士學位論文兒童感染幽門螺桿菌對克拉霉素耐藥性及耐藥機制的研究姓名：余金丹申請學位級別：碩士專業(yè)：兒科學（消化）指導教師：陳潔20040501⑧浙江大學碩士研究生論文對突變類型與耐藥程度的相關性進行相關關系分析。結果顯示分離的108株Hpylori菌株共檢出16株耐藥菌株，耐藥率為148％(16／108)，其MIC值范圍為l一128pg／ml。同時采用Etest法和瓊脂稀釋法檢測藥敏和耐藥情況，結果顯示兩種方法在藥敏范圍和耐藥性

2、檢測上有較好的一致性。PCR擴增結果及RFLP分析：108株不同MIC的敏感菌株或耐藥菌株經PCR均擴增出包含23SrRNA基因V功能區(qū)的425bp片段，擴增產物在瓊脂糖凝膠電泳中均顯示一條清晰條帶，位置相同。16株耐藥菌株中13株菌株的PCR擴增產物可被BsaI酶切成兩個片段，3株擴增產物可被BbsI酶切，提示13株耐藥菌株在23SrRNA基因v功能區(qū)第2144位有A—G突變，3株耐藥菌株則在第2143位有A—G突變：所有敏感菌株的4

3、25bp擴增產物均未能被BsaI和BbsI酶切。并且發(fā)現所有耐藥菌株均不能被完全酶切，仍存在425bp未被酶切片段。經過Bivariate相關性分析，未發(fā)現突變類型與耐藥程度有明顯相關性(F0035，P005)。選擇測序的8株Hpylori菌株(2株敏感菌株和6抹耐藥菌株，其中5株被BsaI酶切，一株被BbsI酶切)23SrRNA基因PCR擴增產物經核苷酸序列分析，證實耐藥菌株存在A2144G位(Bsal酶切)和A2143G(BbsI酶

4、切)位突變，敏感菌株則無相應位點的突變，同時發(fā)現所有敏感菌株和耐藥菌株均存在2183位T—《突變。與Hpylori26695株及HpyloriJ99株比較，其核苷酸序列同源性為99％。本研究結果表示：兒童感染Hpylori菌株對克拉霉索有較高的耐藥率，23SrRNA突變是導致Hpylori對克拉霉索耐藥的重要原因。存在A2144G和A2143G突變，以前者為主；未發(fā)現A2144G突變菌株和A2143G突變菌株耐藥程度的差別。2183位1