初診鼻咽癌中醫(yī)辨證分型與VEGF及EBV-DNA相關性研究.pdf

1、研究背景與目的： 鼻咽癌(NPC)患者容易發(fā)生復發(fā)及轉移?，F代醫(yī)學認為，EB病毒與NPC的發(fā)生發(fā)展有密切關系，通過檢測鼻咽癌血漿中EBV—DNA的表達水平，能夠早期檢測病灶殘留、復發(fā)及遠處轉移，準確評價放化療敏感性及判斷預后。微血管形成與腫瘤的生長、浸潤及轉移密切相關，血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是調節(jié)血管生成的最重要的因子之一，VEGF及其受體存在于多種腫瘤

2、中，在多種腫瘤中存在不同程度的表達，在病理性腫瘤血管新生中起著重要的作用。 本課題將現代醫(yī)學最新檢測手段及腫瘤血管生成理論與中醫(yī)的辨證分型相結合，通過熒光定量PCR方法檢測鼻咽癌患者血漿EBV—DNA濃度，通過酶聯免疫法(enzyme—linked immunosorbent assay，ELISA)、免疫組化法分別檢測了VEGF在鼻咽癌患者血清、腫瘤組織的表達情況，觀察EBV—DNA濃度及VEGF與中醫(yī)證型的關系，從而探討三者

3、與預后的相關性，為NPC初診辨證分型判斷預后、篩選高危復發(fā)轉移病人，指導前期預防治療提供理論依據。 研究材料和方法： 1.選擇初診且無遠處轉移共94例NPC患者進入本研究，按照標準進行中醫(yī)辨證分型：①肺熱型；②痰凝型；③血瘀型；④血瘀痰凝型；⑤氣血兩虛型。分析T分期、N分期及TNM分期與中醫(yī)辨證分型的相關性。 2.收集上述患者的血清標本，其中包括治療前94份，治療后22份；另抽取30例體檢健康成人的血清標本作為對

4、照。應用ELISA法檢測患者及健康者的血清VEGF濃度(sVEGF)。分析治療前血清VEGF濃度與中醫(yī)辨證分型及臨床特征的相關性，并比較治療前后血清VEGF濃度的變化。 3.收集上述患者的鼻咽腫瘤組織標本94例，應用免疫組化法檢測了VEGF在腫瘤組織中的表達情況。分析NPC腫瘤組織VEGF表達與中醫(yī)辨證分型、臨床特征及血清VEGF濃度的相關性。 4.入組的94名患者中有91例抽取到治療前血標本，48例抽取到治療后血標本。

5、應用熒光定量PCR方法檢測鼻咽癌患者血漿EBV—DNA濃度。分析治療前血漿EBV—DNA濃度與中醫(yī)辨證分型、臨床特征、血清VEGF濃度及腫瘤組織VEGF表達的相關性，并比較治療前后血漿EBV—DNA濃度的變化。 5.用SPSS13.0統計軟件包進行數據統計。 結果： 1.初診鼻咽癌中醫(yī)辨證分型與TNM分期的相關性 94例患者按照標準進行中醫(yī)辨證分型，其中最多為痰凝型(45例)，其次為肺熱型(23例)，血瘀

6、型及血瘀痰凝型相對少見(分別為15例及11例)，未收集到氣血兩虛型患者。痰凝型、瘀血型Ⅲ期、Ⅳ期所占比率較多，分別為91.1％、93.3％，兩者比較無顯著差異(P=1.0)；血瘀痰凝型全為Ⅲ期、Ⅳ期(100％)，肺熱型Ⅲ期、Ⅳ期所占比率較少，與非肺熱型比較有顯著差異(P<0.001)。肺熱型、痰凝型T3、T4期所占比率較少，兩者無顯著差異(X2=2.859，P=0.091)，而瘀血型、血瘀痰凝型T3、T4期較多，兩者無顯著差異；肺熱型+

7、痰凝型組與血瘀型+痰凝血瘀型組T3、T4期比較，兩者有顯著差異(X2=8.389，P=0.004)。痰凝型、血瘀型、痰凝血瘀型N2、N3期所占比率較多，三者比較無顯著差異(X2=1.816，P=0.403)，肺熱型23例全部集中在N0、N1期。 2.初診鼻咽癌血清VEGF濃度及與中醫(yī)辨證分型的關系 94例NPC患者治療前sVEGF為428.36±615.87pg/ml，高于健康對照組(226.04±167.78pg/ml

8、)(P<0.05)，22例患者治療后 sVEGF(171.75±122.64pg/ml)低于治療前水平(485.13±637.56 pg/ml)(P<0.05)，而與相應正常對照值相比則無統計學差異(P=0.205)。不同中醫(yī)辨證分型之間sVEGF濃度比較，痰凝型最高(530.10±812.26 pg/ml)，肺熱型最低(261.27±126.56pg/ml)，采用單向方差分析(One—way ANOVA)，四種中醫(yī)辨證分型之間sVEG

9、F濃度無顯著差異(P=0.112，0.167)。治療前sVEGF濃度與性別、年齡、T分期、N分期、TNM分期無相關性(P>0.05)。 3.初診鼻咽癌腫瘤組織VEGF表達及與中醫(yī)辨證分型的關系 NPC患者腫瘤組織VEGF的表達與患者的年齡、性別、T分期、N分期、TNM分期及中醫(yī)辨證分型均無相關性(P>0.05)；VEGF表達陰性與陽性組之間患者的sVEGF相比較，無顯著差異(P=0.416)；VEGF低表達與高表達組患

10、者的sVEGF亦無顯著差異(P=0.121)。 4.初診鼻咽癌EBV—DNA濃度及與中醫(yī)辨證分型的關系 T分期、N分期、TNM分期高者EBV—DNA濃度也較高(P值分別為0.04、0.008、<0.001)，不同性別、年齡組間EBV—DNA濃度無顯著差異；不同辨證類型間EBV—DNA濃度有顯著差異(X2=15.653，P=0.001)，痰凝型EBV—DNA濃度最高，肺熱型最低；sVEGF低表達與高表達組患者的EBV—D

11、NA濃度無顯著差異(p=0.773)；組織VEGF表達陰性與陽性組之間EBV—DNA濃度無顯著差異(P=0.662)，組織VEGF弱表達較高表達者EBV—DNA濃度高(P<0.05)；治療后EBV—DNA濃度較治療前顯著下降(P<0.001)。 結論： 1.鼻咽癌中醫(yī)辨證分型以痰凝型最為常見，其次為肺熱型，氣血虧虛型最少見。 2.中醫(yī)辨證分型與臨床TNM分期的關系密切，隨著其TNM分期的分級增加，其證型亦呈現“肺

12、熱型→痰凝型或血瘀型→血瘀痰凝型”總的演變趨勢；血瘀型及痰凝血瘀型具有較高T分期，痰凝型及血瘀痰凝型較多見頸部淋巴結腫大。 3.NPC患者治療前sVEGF濃度高于正常人群，通過有效治療，sVEGF濃度可顯著降低至正?；蚪咏Ｋ?。 4.sVEGF濃度及腫瘤組織VEGF的表達與T分期、N分期、TNM分期及中醫(yī)辨證分型均無相關。 5.NPC患者治療前EBV—DNA濃度與血清及組織VEGF表達均無相關。 6.