合成短肽S247對呼吸機相關性肺損傷治療作用的實驗研究.pdf

1、機械通氣作為患有急性呼吸衰竭和其它嚴重肺部疾病的病人的一種最基本的生命支持手段已被廣泛使用在重癥監(jiān)護病房。臨床和實驗關于呼吸機相關性肺損傷(ventilator-inducedlunginjury，VILI)的研究最近越來越被人所關注，研究證明，大潮氣量通氣和/或高水平呼吸末正壓通氣均可導致這種以通透性肺水腫伴相關細胞因子釋放為特征的肺損傷，其中，代表性的細胞因子有IL-1β、IL-6、MIP-2、TNF-α。造成呼吸機相關性肺損傷的原

2、因涉及多個方面，生物傷是其中一個重要的原因和組成部分，它已經成為目前研究VILI的熱點之一，其發(fā)生涉及到多種細胞內機制。機械牽拉所產生的力學信號通過跨細胞膜表達的整合素向細胞內部傳導，轉化為生物化學信號，是導致生物傷的一個重要機制。肺上皮細胞和血管內皮細胞對于機械牽拉的反應的諸多研究證實，肺上皮細胞整合素在VILI發(fā)生過程中起重要作用，它是連接粘著斑激酶(FAK)和細胞外基質(ECM)以及細胞骨架的橋梁，力學信號作用于細胞外基質后，整合

3、素被激活，下游蛋白如粘著斑激酶等隨之一一激活，引起相關細胞因子的翻譯和轉錄，從而導致肺內炎癥因子釋放增加。S247是一種人工合成的三肽化合物，它由精氨酸、甘氨酸和天冬氨酸組成，它與肺上皮細胞上αv類整合素競爭結合于構成ECM的纖粘連蛋白(FN)、玻璃體蛋白(VN)、層粘連蛋白(LN)等成分的RGD序列，非特異性阻斷RGD整合素的信號傳導上游通路，從而能抑制相關細胞因子的釋放，減輕肺損傷。本研究著重探討合成短肽S247對于呼吸機相關性肺損

4、傷的治療作用和機制。實驗分兩個部分：(1)不同潮氣量通氣對大鼠呼吸機相關性肺損傷的影響。(2)合成短肽S247對呼吸機相關性肺損傷的實驗研究。 第一部分不同潮氣量通氣對大鼠呼吸機相關性肺損傷的影響 目的：通過比照不同潮氣量通氣導致呼吸機相關性肺損傷的情況，評估不同潮氣量對肺損傷的影響。方法：92只成年SD大鼠(250～360g)隨機分為A組(自主呼吸組)，B組(vt=10ml/kg)，C組(vt=20ml/kg)，及D組

5、(vt=40ml/kg)，每組23只，各組按時段(1h、2h和4h)再隨機分為3個亞組，每亞組5只，共15只，觀察各組通氣1小時、2小時和4小時肺病理改變、肺含水量、肺灌洗液(BALF)中自細胞總數、總蛋白(Tp)、乳酸脫氫酶(LDH)含量的變化，每組其余8只用來觀察4小時內各時間段生存率。結果：與對照組和正常通氣組相比，大潮氣量使BALF中WBC、LDH、Tp含量增加(p＜0.05或p＜0.01)，D組BALF中WBC量、總蛋白、LD

6、H含量較C組為高(p＜0.05)，且隨著時間延長而增加，各組大鼠同時間段生存率無明顯差異(p＞0.05)。結論：潮氣量20ml/kg和40ml/kg通氣均會導致不同成都的呼吸機相關性肺損傷，其中潮氣量為40ml/kg，通氣4h較為適合建立呼吸機相關性肺損傷模型。 第二部分合成短肽S247對呼吸機相關性肺損傷治療作用的實驗研究 目的：研究合成短肽S247對呼吸機相關性肺損傷的治療作用和機制。方法：清潔級雄性成年SD大鼠隨機

7、分為3組：對照組(C組)、肺損傷組(Ⅰ組)和S247治療組(S組)，每組7只，40ml/kg潮氣量損傷性通氣4小時復制呼吸機相關性肺損傷模型，光境觀察肺病理改變，測定肺濕/干比，收集肺泡灌洗液，考馬斯亮蘭法測BALF中總蛋白含量，光境下行wbc計數，酶聯(lián)免疫法測MIP-2、TNF-α含量，免疫組化法測定各組大鼠肺組織αvβ6整合素。結果：Ⅰ組死亡2例，存活大鼠肺病理改變明顯，各組肺濕/干比、BALF中總蛋白含量、wbc計數以及MIP-2