Synuclein-γ在直腸癌組織中表達及與直腸癌中西醫(yī)臨床指標關系的研究.pdf

1、中醫(yī)是應用型科學，需要有堅實的基礎科學的支撐。西醫(yī)靠強大的現(xiàn)代科學技術取得了飛速發(fā)展。中醫(yī)也應該充分利用現(xiàn)代科學技術發(fā)展的成果，為進一步解釋中醫(yī)理論和拓展臨床治療尋求支撐。 中醫(yī)臨床研究中證型和證候是真實可靠的，但是因為缺乏客觀評價的標準，讓人感覺既難以完全相信又沒法予7以否定。那么，應當怎樣正確記錄和評價中醫(yī)的臨床證型和證候？如何處理臨床研究中的共性與個性的關系？ 中醫(yī)具備形象思維和直覺思維能力、擁有“天人合一”整體思

2、維。但是在現(xiàn)代科學技術突飛猛進的今天，在人類疾病譜、基因遺傳和生活環(huán)境與古代迥異的今天，還能夠無視科學技術在診治疾病中帶來的好處，固守不需任何儀器設備的幫助，用“司外揣內(nèi)”診斷疾病、僅僅延用古代理論和方法去治療疾病？ 中醫(yī)對于直腸癌的認識起源于先秦，此后歷代醫(yī)家對直腸癌的病因病機進行了論述。晉、隋、唐時期進行了進一步探索和研究，宋以后逐漸完善了對直腸癌的認識。 中醫(yī)古典醫(yī)籍中無直腸癌病名。直腸癌的描述散在于“積聚’、“腸

3、覃”、“鎖肛痔”“臟癰痔”、“癥瘕”等病證的論述中。已認識到直腸癌是一種全身性疾病，認為其發(fā)生的根本病因是正氣虧虛，與脾胃功能密切相關。其兼挾病因為七情、飲食、外感邪氣三種?，F(xiàn)代醫(yī)家認為，直腸癌根本病機是機體陰陽失調(diào)，脾虛、腎虧、正氣不足為病之本，濕熱、火毒、瘀滯屬病之標，常是幾種因素互為因果。因此對于直腸癌的中醫(yī)理論探索還任重道遠。 由于不同學者受疾病認識和不同的知識結構等因素的影響，給中醫(yī)歸納總結不同學者的經(jīng)驗帶來了困難。而

4、且經(jīng)驗總結雖然為以后的中醫(yī)臨床研究提供了直腸癌證治規(guī)律的線索，但是無法用現(xiàn)代科學的指標和語言對其進行準確的概括和量化，使這些經(jīng)驗的可重復性和概括性以及今后的標準化受到了限制，也成了中醫(yī)持續(xù)向前發(fā)展的瓶頸。 實踐證明，中醫(yī)藥在直腸癌的綜合治療中效果是肯定的，但是直腸癌的中醫(yī)臨床研究雖有很多，也有以中醫(yī)為主治療直腸癌且取得滿意療效的報道，但多為個案報道，沒有嚴格設計的大宗病例的研究，少數(shù)還有比較嚴重的統(tǒng)計學分析錯誤，導致晚期直腸癌成

5、為目前中醫(yī)治療的主要對象?；颊呷頎顩r往往較差，經(jīng)中醫(yī)扶正祛邪，雖可使癥狀減輕，生存質(zhì)量提高，但多數(shù)已無治愈可能。隨著大眾醫(yī)療保健意識的增強，晚期病例越來越少，并且中醫(yī)治未病的優(yōu)勢仍然沒有發(fā)揮出來，這和中醫(yī)理論無法用現(xiàn)代科學理論解釋，中醫(yī)指標無法用現(xiàn)代科學技術標準量化是有關的。 腫瘤中醫(yī)辯證分型是根據(jù)中醫(yī)理論對疾病過程中某一階段病因、病機、病性、病勢要素的綜合性概括，是對疾病當前本質(zhì)做出的結論，是辨證施治的依據(jù)。腫瘤的西醫(yī)學指標

6、反映了病變的程度和發(fā)展趨勢及腫瘤的生物學特性，因此，了解腫瘤的中醫(yī)學指標與西醫(yī)學指標之間的關系，有可能為中醫(yī)理論提供現(xiàn)代科學理論依據(jù)，為中醫(yī)指標用現(xiàn)代科學技術標準量化提供幫助。但是如何使直腸癌病因病機研究與現(xiàn)代醫(yī)學的科研成果相結合，并利用現(xiàn)代醫(yī)學的科研成果進一步拓展和深入中醫(yī)直腸癌病因病機理論研究仍然需要探索。 中醫(yī)臨床以辨證論治為指導核心，“同病異治，異病同治”，處方用藥隨證而變。中醫(yī)“證”與西醫(yī)的病存在一定的分歧，而且中醫(yī)的

7、臨床特點決定了符合中醫(yī)醫(yī)理的大多中醫(yī)臨床研究難以完全嚴格按照隨機、對照、重復的標準設計和實施。另有一些研究只是臨床病例報告和描述，或是治療經(jīng)驗的總結，這些研究由于沒有嚴格的科研設計和質(zhì)量控制方法而缺乏可信度。 本研究希望結合現(xiàn)代科學技術的發(fā)展成果，為進一步理解中醫(yī)基礎理論和協(xié)助臨床治療提供方法和依據(jù)。 γ-syn是神經(jīng)核蛋白家族成員，正常主要位于神經(jīng)元的軸突內(nèi)。異常表達與許多腫瘤的發(fā)生、分期、有無淋巴結轉移相關。SNCG

8、異常調(diào)節(jié)發(fā)生在轉錄水平，和SNCG低甲基化有關。γ-syn異常表達危害正常有絲分裂監(jiān)控點，使細胞通過非整倍體持續(xù)增殖，還可抑制半胱天冬酶活性，阻斷凋亡應答；可通過MAPK途徑，使MMP基因表達增加，提高MMP2活性和水平，促進腫瘤轉移。γ-syn是潛在腫瘤生物標志，用基因調(diào)控技術抑制腫瘤轉移復發(fā)和針對γ-syn的分子靶向藥物研究正在進行。 為了研究直腸癌組織中γ-syn蛋白的表達情況，我們選取2005年～2007年南京市中醫(yī)院肛

9、腸中心病理證實的直腸癌患者86例，收集手術切除的癌組織標本進行檢測。同時收集患者的人口學和臨床資料，包括年齡、性別、腫瘤距肛門距離、術前血清CEA水平、腫瘤分化程度、有無淋巴結轉移。用免疫組織化學法檢測86例直腸癌組織γ-syn蛋白的表達。我們發(fā)現(xiàn)86例直腸癌組織中都有γ-syn蛋白的表達（86/86）。γ-syn蛋白的表達與患者年齡、性別、直腸癌部位、術前血清CEA水平之間無相關性；與直腸癌的組織分化程度，有無淋巴結轉移無關。表明直腸

10、癌組織高表達γ-syn蛋白；γ-syn蛋白是直腸癌普遍存在表達的蛋白，可以作為直腸癌的生物標記。目前國內(nèi)文獻尚無γ-syn蛋白在直腸癌組織中表達的報道。 為了解γ-syn蛋白在直腸癌組織中表達調(diào)控的狀況，我們選取22對新鮮直腸癌組織標本和相同直腸正常粘膜標本，用甲基化特異PCR（methylation-specific PCR，MSP）技術來檢測直腸癌組織的γ-syn基因（SNCG）甲基化情況。我們發(fā)現(xiàn)，直腸癌組織中SNCG普遍

11、存在甲基化的現(xiàn)象。提示直腸癌中SNCG表達的調(diào)控，可能與SNCG某些CpG位點是否甲基化有關，而并非是SNCG整個基因的低甲基化。 為了解直腸癌的常見證候及其分布規(guī)律與現(xiàn)代西醫(yī)學指標之間的聯(lián)系，我們選取2004年-2006年間在南京市中醫(yī)院全國肛腸醫(yī)療中心進行手術治療并經(jīng)病理證實，符合納入標準的直腸癌患者71例（n=71）。將所有入選病例編號，在術前完成中、西醫(yī)指標，術后完成病理分型，同時進行相關性分析。我們發(fā)現(xiàn)，中醫(yī)辨證分型在

12、西醫(yī)Dukes B、C期以氣血瘀滯型最為常見，以薄膩苔和弦澀脈多見；體重70.4％在正常范圍，25.4％體重超重。未見中醫(yī)虛證患者。氣血瘀滯型患者的腫瘤病變部位距肛門口的平均距離顯著大于濕熱毒蘊型患者，有統(tǒng)計學差異（P<0.01）。我們認為，目前直腸癌患者多為氣血瘀滯和濕熱毒蘊型（西醫(yī)Dukes B、C期），中西醫(yī)指標間有相似分布，可以相互佐證。氣血瘀滯型患者的腫瘤病變部位距肛門口的平均距離顯著大于濕熱毒蘊型，術前分型為氣血瘀滯型保肛手

13、術的幾率較大。沒有發(fā)現(xiàn)中醫(yī)虛癥患者，我們分析認為，這是因為直腸癌和結腸癌對身體的影響不同造成的。結腸癌早期對人體營養(yǎng)物質(zhì)的攝取會造成影響，因此會出現(xiàn)虛癥表現(xiàn)。而直腸癌患者，到了晚期才會對人體的營養(yǎng)狀況產(chǎn)生影響，才會出現(xiàn)虛癥的表現(xiàn)。建議今后對于結腸和直腸癌的中醫(yī)診治應該加以區(qū)分，以使中醫(yī)直腸癌的診斷治療更加具體可行。 我們選取2004年-2006年間在南京市中醫(yī)院全國中醫(yī)肛腸醫(yī)療中心進行手術治療并符合納入標準的直腸癌患者71例（n

14、=71）。將所有入選病例編號，在術前完成中醫(yī)指標，術后完成病理分型和癌組織中γ-syn表達的檢測，同時進行相關性分析。我們發(fā)現(xiàn)氣血瘀滯型與濕熱毒蘊型兩組患者γ-syn表達無統(tǒng)計學差異（P=0.54>0.05）。超重與非超重患者γ-syn表達，兩組間沒有統(tǒng)計學差異（P=0.82>0.05）?；佁颊吲c薄膩苔兩組患者γ-syn表達有統(tǒng)計學差異（P=0.03<0.05）。弦澀脈患者與弦滑脈患者兩組患者γ-syn表達有統(tǒng)計學差異（P=0.03

15、<0.05）。我們認為，直腸癌患者腫瘤組織中γ-syn表達與中醫(yī)分型沒有統(tǒng)計學相關性。薄膩苔，弦滑脈患者與滑膩苔，弦澀脈患者γ-syn表達有統(tǒng)計學差異，有可能和其他指標一起對直腸癌的中醫(yī)診斷治療起參考作用。但是早期直腸癌的中醫(yī)學常見證候及其分布與西醫(yī)學腫瘤生物標記之間是否有其他的聯(lián)系和分布規(guī)律，還需要大樣本的多中心隨機對照研究去證明。 通過本研究，我們得出以下結論：1.γ-syn蛋白是直腸癌普遍存在表達的蛋白，可以作為直腸癌的生

16、物標記。目前國內(nèi)文獻尚無γ-syn蛋白在直腸癌組織中表達的報道。2.目前直腸癌患者（西醫(yī)Dukes B、C期）多為氣血瘀滯和濕熱毒蘊型。氣血瘀滯型患者的腫瘤病變部位距肛門口的平均距離顯著大于濕熱毒蘊型，推測術前分型為氣血瘀滯型保肛手術的幾率較大。3.沒有發(fā)現(xiàn)中醫(yī)虛癥患者，結腸癌和直腸癌由于對機體影響不同，其中醫(yī)診治應該加以區(qū)分，以使中醫(yī)直腸癌的診斷治療更加具體可行。4.薄膩苔，弦滑脈患者γ-syn表達呈梯度上升，滑膩苔和弦澀脈患者γ-s

17、yn表達以2+為主，有可能和其他指標一起對直腸癌的中醫(yī)診斷治療起參考作用。但是早期直腸癌的中醫(yī)學指標和西醫(yī)學腫瘤生物標記之間是否有其他的聯(lián)系和分布規(guī)律，還需要大樣本的多中心隨機對照研究去證明。5.直腸癌組織中SNCG普遍存在甲基化的現(xiàn)象。提示直腸癌中SNCG表達的調(diào)控，可能與SNCG某些CpG位點是否甲基化有關，而并非是SNCG整個基因的低甲基化。 通過本研究，我們也提出了一個研究思路，即是否可以通過研究西醫(yī)臨床指標與中醫(yī)證型證