米諾環(huán)素在L-谷氨酸誘導的視網膜神經節(jié)細胞損傷中的保護作用和分子機制.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討米諾環(huán)素在L-谷氨酸誘導的視網膜神經節(jié)細胞損傷中的保護作用和分子機制。
　　 方法:體外實驗,原代小鼠視網膜神經節(jié)細胞體外穩(wěn)定培養(yǎng)24h后,分為三組:對照組、L-谷氨酸組及L-谷氨酸+米諾環(huán)素組,相應干預48h后分別觀察各組間神經節(jié)細胞的存活率及神經軸突生長的差異。體內實驗,將C57BL/6小鼠分為三組:對照組、L-谷氨酸組及L-谷氨酸+米諾環(huán)素組。前兩組小鼠腹腔內注射生理鹽水(對照組,L-谷氨酸組),第三組腹腔內注射

2、米諾環(huán)素(L-谷氨酸+米諾環(huán)素組,60mg/kg),每天一次,連續(xù)7天,第二天時,第一組玻璃體腔內注射生理鹽水,后兩組小鼠玻璃體腔內注射2ul L-谷氨酸(2mM),誘導視網膜神經節(jié)細胞損傷。第八天采用組織免疫熒光法技術和激光共聚焦顯微鏡觀察β3tubulin陽性細胞數及視網膜GFAP蛋白表達以評估視網膜神經節(jié)細胞的損傷情況。Real-time PCR和Western blot法分別檢測視網膜組織中IFN-γ,IL-1,TNF-α與GF

3、AP與Vimentin的mRNA及蛋白表達水平以初步探討損傷的分子機制。
　　 結果:體外實驗結果顯示:與對照組比較,L-谷氨酸組視網膜神經節(jié)細胞的存活率明顯降低,呈劑量和時間依賴性；神經軸突生長受抑制。米諾環(huán)素干預后可明顯減輕L-谷氨酸導致的上述效應(P<0.01)。動物實驗結果顯示,L-谷氨酸組小鼠神網膜神經節(jié)細胞數目較對照組小鼠顯著減少,視網膜組織中GFAP的表達量明顯增加(P<0.01)。米諾環(huán)素治療后可明顯改善L-谷氨

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